摘要：近10年来,噬菌体表面呈现技术(Phage Dislay Techniques,PDT)发展迅速,特别是在蛋白质结构研究、抗原表位分析、分子识别、细胞间信号传导、药物设计、疫苗研制、诊断试剂等方面应用广泛.Smith[1]博士于1985年首先报道小分子多肽可以在丝状噬菌体表面表达形成有活性的多肽片段.由于噬菌体易于扩增,可从含多种外源蛋白的噬菌体库中筛选出表达特异外源蛋白的噬菌体,且外源多肽或蛋白的氨基酸序列可通过测定插入噬菌体DNA序列来推测,故该技术受到许多学者的青睐.

摘要：目的利用荧光定量PCR技术,建立b型流感嗜血杆菌的快速敏感特异的检测方法。方法以b型流感嗜血杆菌荚膜基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以b型流感嗜血杆菌菌株,提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和退火温度。以b型流感嗜血杆菌和8种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为800 nM、200 nM,退火温度为56℃时,具有良好的特异性和敏感性。在8株相关菌株的检测中,除b型流感嗜血杆菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,定量检测低限100 cfu/mL。稳定性分析表明:同一样品重复检测4次C t值的最大变异系数为5.46%。与常规方法比较,符合率达100%。结论该方法特异性强,稳定性高,操作简便快速,具有较大的推广及应用价值。

摘要：目的　克隆人源性抗腮腺炎病毒抗体轻链和重链Fd基因。方法　从腮腺炎患者和腮腺炎抗体IgG阳性者中各抽取其外周血 3ml,分离出淋巴细胞后 ,提取总RNA ,逆转录成cDNA。设计人抗体轻链κ、λ和重链Fd基因的引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增轻链和重链Fd段基因。结果　从 4 8名腮腺炎病毒IgG抗体阳性者中 ,共提取高质量RNA约 1 1 0 μg,经RT PCR分别扩增出约 70 0bp大小的κ、λ和Fd基因。结论　从人淋巴细胞中成功克隆出抗体轻链κ、λ和重链Fd基因 ,为制备抗体Fab重组表达载体 。

摘要：目的　扩增霍乱弧菌不同血清型I类整合子基因片段 ,并分析I类整合子在霍乱弧菌O1和O13 9血清型中的分布。　方法　收集霍乱弧菌O1和O13 9血清型 40株 ,根据GenBank资料设计PCR引物 ,扩增霍乱弧菌I类整合子基因片段 ,并用限制性酶切分析法进行鉴定 ,分析I类整合子在不同血清型的分布情况。　结果　从霍乱弧菌O1和O13 9血清型中均能扩增约 80 0bp的基因片段 ,扩增片段经PstI酶切后可获得 671和 12 7bp的片段 ,经HindIII酶切后可获得 5 80、160和 5 8bp的片段 ,经HindIII和PstI酶切后可获得 45 3、160、12 7和 5 8bp的片段 ,I类整合子在O13 9血清型霍乱弧菌中分布多于O1血清型。　结论　I类整合子与霍乱散发菌株耐药性的传递、血清型的分布有密切的联系。