摘要：将抗栓肽 ( Decorsin)嫁接到低分子量尿激酶原 ( scu PA-3 2 k)上 ,可以期望获得既具有抗血小板聚集活性 ,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子 .利用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构 ,证明其活性区可以正常发挥功能 .根据大肠杆菌偏好密码子合成 Decorsin的基因 ,与 scu PA-3 2 k基因融合在一起 ,构建新的嵌合体基因 dscu PA,并在大肠杆菌中通过 IPTG进行诱导表达 ,该重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式存在 .对包涵体进行变性和复性并通过层析纯化得到目的蛋白质 .用纤维蛋白平板法测得重组蛋白的比活为 92 0 0 0 IU/mg.激活纤溶酶原的酶促动力学性质与天然低分子量尿激酶相似 ,且有较强的抑制血小板聚集的功能 .重组蛋白 dscu PA不但具有较强的溶栓功能 ,而且具有抗栓功能 .

摘要：参考E .coli偏爱密码子 ,设计并合成人MT 3α结构域 (α MT 3)的DNA片段 ,克隆到表达载体pGEX 4T 1中。经IPTG诱导 ,在E .coli中高效表达出谷胱甘肽 S 转移酶 (GST) α融合蛋白。凝血酶酶切融合蛋白 (用CdCl2 或ZnSO4辅助 )后 ,得到纯化的结合镉或锌的α MT 3蛋白。质谱分子量检测及氨基酸组成分析证明得到了目的蛋白。紫外吸收光谱及圆二色性光谱研究重组α MT 3的结构。MT 3的与其余MT的α结构域不同 ,α MT 3的圆二色性光谱在 2 2 0nm左右为负峰 ,说明α MT 3可能包含一个α 螺旋的二级结构。