摘要：目的建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）荧光定量聚合酶链反应（荧光定量PCR）。方法设计检测HBVDNA（tDNA）和cccDNA特异性引物及探针，用3．44×10^0～3．44×10^9copies／pl含HBV全基因组序列（C基因型）质粒作为标准品，建立荧光定量PCR检测标准曲线。取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本，验证该法灵敏度和特异度。提取肝组织中DNA，取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶（PSAD）酶切；另一部分不酶切作为tDNA和β—globin检测样本，分别进行HBV cccDNA、tDNA和β—globin定量检测，以β-globin为参比，对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化。结果检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3．44×10^0～3．44×10^9copies／μl。检测HBV cccDNA和HBVDNA下限均为3．44×10^0copies／μl。33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0．003copies／cell和0．031 copies／cell；检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性。应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性，提高cccDNA检测法特异度达7．24×10^2倍。对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次，Ct值的变异系数为0．224％-0．609％。结论该方法灵敏度和特异度高，重复性好，可用于检测肝组织中HBV cccDNA。

摘要：目的比较国产局部麻醉镇痛系统与进口静脉输注装置的镇痛效果和安全性。方法研究设计为两中心前瞻性随机对照试验。研究对象为2008年1至9月在北京大学第三医院和北京大学第一医院普通外科实施腹腔内或腹壁手术的患者。将患者按照随机区组法分为试验组与对照组,每组80例。试验组使用国产局部麻醉镇痛系统经伤口局部输注利多卡因,对照组使用进口静脉输注装置输注吗啡。观察2组术后24及48 h视觉模拟评分(VAS)、患者对镇痛系统或装置的满意程度、是否使用镇痛药、使用镇痛系统或装置时是否出现不适感、是否影响活动、是否出现炎性反应或液体渗漏以及不良反应或不良事件的发生情况。结果试验组男47例,女33例,平均年龄(50.3±14.6)岁;对照组男48例,女32例,平均年龄(49.5±12.7)岁。2组受试者年龄、性别、身高、体重、手术类型及镇痛初始的VAS评分差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后24、48 h2组患者VAS评分、使用镇痛系统或装置的满意程度、不适感、影响活动程度、炎性反应发生率的差异均无统计学意义(均P>0.05)。但试验组出现局部渗液者(10例,12.5%)明显多于对照组(2例,2.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。试验组局部渗液发生率较高的主要原因为局部麻醉镇痛系统输液导管放置部位不合适。结论国产局部麻醉镇痛系统与进口静脉输注装置均具有良好的术后镇痛效果与安全性。