摘要：目的选择野生型C57BL/6J小鼠为研究模型,利用CRISPR/Cas9技术建立Gata4基因H435Y突变型小鼠。方法针对Gata4基因的基因序列信息设计针对Gata4基因H435Y位点的单链向导RNA(single-guideRNA,sgRNA),经活性检测后,将具有活性的sgRNA和Cas9体外转录成RNA,通过显微注射将sgRNA、Cas9 mRNA以及含有点突变序列的donor DNA片段注射到小鼠受精卵中,通过PCR和基因测序方法对Gata4基因突变进行检测及鉴定,培育Gata4基因突变小鼠并分析后代的突变情况。结果顺利构建sgRNA载体并体外转录,成功sgRNA、Cas9 mRNA以及含有点突变序列的donor DNA片段注射到受精卵中。基因测序鉴定获得4只F0代初建鼠。选取阳性F0代小鼠与野生型C57BL/6J小鼠杂交,得到F1代鼠,再相互交配获得F2代鼠。PCR显示F2代鼠Gata4基因H435Y突变,成功建立Gata4基因H435Y突变小鼠模型并传代繁育。结论通过CRISPR/Cas9技术可以成功建立Gata4基因H435Y突变小鼠动物模型。

摘要：一、我国教育考试的历史与现状及国外高等工科教育的特点我国传统的考试方法源于古代的私塾教学和科考制度的长期盛行。私塾教育的主要内容是人文、社科及哲学思想等方面的教育 ,并有少量数学、物理、地学、天文学等方面的内容 ,即使带有科学萌芽的教学内容也基本上都是为儒、道、佛等哲学或宗教思想服务的。所有这些教育内容的传播均以死记硬背作为最基本的教学手段 ,教师的“传道、解惑”必须以死记硬背为基础。传统私塾教育的另一个特点是对书法的过度重视。不管学生本身是否有书法才华 ,都要被迫花大量的时间去追求书法上的上乘境界。书法的水平甚至成为影响科考是否成功的主要因素之一。因此 ,我国古代私塾教育的教学内容、教学方式和僵化的科举制度 ,使闭卷笔试成为唯一考试方式。自唐朝以来 ,我国的各个朝代都有一些有识之士主张对全国考试的名列前茅者进行灵活多样的复试 (殿试 )。殿试多以口试为主 ,一般由君主直接主考 ,以便为考生进入国家重要部门严格把关。新中国成立后 ,我国教育基本延续了这种闭卷笔试的方式。我国高等工科教育的体系实际上是 2 0世纪 50年代院系调整之后才真正形成的。经过 50年代的院系调整 ,我国工科教育体系虽然已初步形成 ,但...