摘要：目的设计并化学合成针对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins,BMP-2)的siRNA分子片段,转染人肝癌SMMC7721细胞,观察其对SMMC7721细胞迁移和侵袭能力的影响。方法设计并化学合成针对BMP-2的3个siRNA分子序列,阳离子脂质体法瞬间转染SMMC7721细胞,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测细胞中BMP-2在mRNA水平和蛋白水平的变化,体外侵袭实验检测转染后细胞侵袭能力的变化。实验共分6组,①正常对照组;②空白对照组;③阴性对照组;④～⑥分别为BMP-2-siRNA-A、BMP-2-siRNA-B、BMP-2-siRNA-C转染组。结果RT-PCR和Western blot显示3对特异性BMP-2-siRNA转染肝癌细胞SMMC7721之后,其BMP-2的基因和蛋白表达均受到抑制,以siRNA-B抑制效果最明显[(0.32±0.07)vs(0.92±0.14),(0.37±0.10)vs(0.89±0.17),P<0.01]。体外侵袭实验显示转染后肝癌细胞数明显低于未转染组和阴性对照组[分别为(6.48±3.62)、(23.72±3.24)、(22.38±3.84),P<0.05]。结论BMP-2与肝癌的侵袭转移潜能相关,siRNA-BMP-2能明显抑制肝癌细胞SMMC7721的BMP-2表达,从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。

摘要：目的设计并化学合成针对骨形态发生蛋白2(BMP-2)的siRNA分子片段,转染人肝癌SMMC7721细胞,观察其对SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响。方法阳离子脂质体法瞬间转染SMMC7721细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western印迹法检测转染BMP-2-siRNA后细胞BMP-2mRNA水平和蛋白水平的变化,MTT法和流式细胞术检测转染BMP-2-siRNA后SMMC7721细胞增殖、细胞周期和凋亡的变化。结果 3对特异性BMP-2-siRNA均有效地抑制了BMP-2基因的表达,以siRNA-B抑制效果最好。转染BMP-2-siRNA后SMMC7721细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05)且明显促进了SMMC7721细胞的凋亡。结论靶向BMP-2基因的siRNA分子片段可以有效地抑制人肝癌SMMC7721细胞的增殖并促进其凋亡。

摘要：目的探讨Bip反义寡核苷酸(Bip AS-ODN)对体外轻度热应激脾脏巨噬细胞功能的影响。方法设计特异性Bip AS-ODN,经脂质体包裹后转染至小鼠脾脏巨噬细胞,观察Bip AS-ODN对轻度热应激后脾脏巨噬细胞功能的影响。结果轻度热应激60 min后,脾脏巨噬细胞吞噬功能及趋化、杀伤活性增强,Bip mRNA表达明显上调;Bip AS-ODN转染脾脏巨噬细胞后,与未转染细胞比较,热应激后Bip mRNA表达明显减少,巨噬细胞吞噬功能及趋化、杀伤活性明显回落(P<0.01)。结论Bip对热应激脾脏巨噬细胞功能起调节作用。