摘要：背景:肾移植后感染已成为肾移植患者移植肾失功和死亡的主要原因之一,肾移植后感染目前尚无统一、标准的治疗方案。目的:探讨肾移植患者后感染临床特点及诊治方法,提高肾移植后感染的治愈率。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2006-02/2008-02在昆明医学院第一附属医院器官移植中心完成。对象:84例肾移植患者中18例移植后的感染者。方法:所有患者入院后均行胸部X射线检查,X射线检查未提示肺部明显病变或肺部感染症状及体征明显者行肺部CT检查。行病原学检测,包括血、尿、痰、鼻拭子、咽拭子培养,痰涂片+培养查真菌,抽血查CMV、EB-DNA及支原体,痰查抗酸杆菌。对所有肺部感染患者均采用综合治疗,即抗菌素+抗病毒药物+抗真菌药物,根据患者病情、血常规淋巴细胞绝对值及CD4+T细胞绝对值计数调整免疫抑制剂用量对患者感染发生时间、临床症状、辅助检查及诊断和治疗策略进行分析。主要观察指标:①感染发生时间及症状。②影像学表现和病原学检测结果。③抗生素的选用和免疫抑制剂调整。结果:18例患者中,11例(61.2%)为尸体供肾肾移植患者。12例(66.7%)发生于移植后3月内,15例(83.3%)发生于移植后6月内。14例(77.8%)以发热为主要症状,呼吸道感染15例(83.3%),其中13(72.2%)例为肺部感染。6例病原学检查提示真菌感染,且以念珠菌为主。3例(16.7%)死亡其中2例合并巨细胞病毒感染,均为混合性感染。结论:肾移植后感染患者病原体呈多样性,但以细菌、真菌和病毒为主。重症肺炎合并CMV感染提示预后不良,真菌和病毒感染在肾移植后感染患者中应引起足够重视。治疗以综合降阶梯治疗为主,及时调整免疫抑制剂治疗方案甚至停用免疫抑制剂是治疗的关键之一。

摘要：目的肾透明细胞癌(ccRCC)是一种代谢性疾病,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与ccRCC的发生发展及患者的不良预后呈正相关。文章首次构建了G6PD缺陷型ccRCC稳定细胞株,检测其迁移表型。方法 Oligo Engine RNAi设计针对人G6PD基因3'端非编码区的siRNA及无关siRNA序列,合成双链后通过BglⅡ和HindⅢ酶切位点插入p SP-GFP/Neo表达载体,构建Caki-1-G6PD siRNA细胞株及Caki-1-Negative control细胞株,进而转染并经G418筛选。应用Real-time RT-PCR、Western blot及酶活性方法,检测细胞株的G6PD表达和酶活性;Transwell方法检测细胞迁移表型、Western blot检测p-STAT3/STAT3表达。结果荧光显微镜下可见Caki-1-G6PD siRNA细胞与Caki-1-Negative control细胞形态良好,通过GFP表达量计算细胞转染效率约为45%~55%;48 h后细胞贴壁密度达90%,荧光表达略有增强,转染效率可达60%。光镜和荧光显微镜下亦可见细胞状态良好,GFP阳性率达95%。与Caki-1-Negative control细胞相比,Caki-1-G6PD siRNA细胞的G6PD mRNA表达量蛋白表达量和酶活性均显著降低(P<0.05)。与Caki-1-Negative control细胞相比,Caki-1-G6PD siRNA迁移细胞的相对数量明显降低[(64.0±4.2)个vs(30.0±2.9)个,P<0.01],p-STAT3/STAT3值亦明显下降[(0.45±0.05)vs(0.24±0.01),P<0.01]。结论文章首次成功构建了G6PD稳定敲低和迁移能力低下的Caki-1细胞系,其G6PD敲低所致ccRCC细胞迁移能力降低与STAT3信号相关。