摘要：背景:Neurturin对多巴胺能神经元、运动神经元、感觉神经元、交感神经元等多种神经元具有促进存活及保护作用的研究报道甚多,关于Neur-turin对胆碱能神经元的影响报道较少。目的:探讨神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)和Neurturin联合应用对体外培养的神经生长因子受体阳性神经元生长发育的影响。设计:以细胞为研究对象,重复测量,验证性研究。单位:一所大学的解剖学教研室。材料:实验于2001-09/2002-06在广州医学院人体解剖教研室完成。新生的SD大鼠,培养液采用DMEM/F12培养基,另加20g/L无血清添加剂,抽滤灭菌后备用。方法:实验分4组:NGF组,NTN组,NGF+NTN组及对照组。前3组分别加入NGF,NTN,NGF+NTN,使其各浓度达到100μg/L。对照组加培养液替代。神经元原代培养新生大鼠基底前脑胆碱能神经元,然后用免疫组化结合图像分析技术观察Neurturin,NGF对培养的新生大鼠基底前脑胆碱能神经元生长发育的作用。主要观察指标:培养4,8d时新生大鼠前脑的NGFR阳性神经元存活情况和生长情况。结果:培养4d时,NTN组的各项指标均与对照组有显著性差异(P0.05),NGF+NTN组各项指标仍然优于NGF组或NTN?

摘要：背景:学习记忆与中枢神经系统突触的结构和功能的可塑性密切相关。目的:探讨痴呆模型鼠海马的突触素改变及其与学习记忆的关系,为老年性痴呆的发病过程提供实验依据。设计:随机对照实验。单位:广州医学院人体解剖学教研室。材料:实验于2003-02/2004-05在广州医学院人体解剖学教研室完成。选取成年SD大鼠20只,随机分为正常组和损伤组,10只/组。方法:损伤组大鼠切断左侧穹窿海马伞,建立基底前脑-海马胆碱能通路受损的痴呆模型。造模4周后,用三等分Y型迷宫检测两组大鼠的学习记忆能力。大鼠学习成绩以连续10次测试中有9次达到正确反应(2min以内逃避电击并第一时间到达安全区)时所需的训练次数来表示,记录每只大鼠达到学会标准所需的训练次数,训练次数少说明学习能力强。训练结束24h后测试记忆能力,以10次训练中的正确反应次数代表记忆保持能力的优劣,正确反应次数少则记忆能力低。然后用免疫组织化学染色和图像分析技术等方法对大鼠海马突触素进行定量分析,以实际吸光度值进行比较,以避免染色过程中的非特异性染色导致的误差。主要观察指标:①两组大鼠行为测试中学会逃避电击并第一时间到达安全区所需的训练次数。②两组大鼠海马结构突触素免疫反应物检测结果。③两组大鼠损伤侧海马CA1区和齿状回分子层突触素免疫反应物的实际吸光度值。结果:实验纳入大鼠20只,全部进入结果分析。①两组大鼠学会逃避电击并第一时间到达安全区所需的训练次数:损伤组学习能力达到标准所需的训练次数明显多于正常组(98.40±4.51),(62.21±2.43)次,P<0.01;而记忆能力达到标准所需的训练次数则明显低于正常组(3.82±0.64),(8.81±0.32)次,P<0.01。②两组大鼠海马结构突触素免疫反应物检测结果:海马结构突触素免疫反应物呈板层分布,神经元胞体、胶质细胞、血管及白质不被染色。神经毡内免疫反应产物呈持异性颗粒状或点状。海马CA1区以多形层和辐射层染色较深,腔隙分子层次之,锥体层和颗粒层细胞的轮廓边缘有点状标记。齿状回染色较浅,突触素免疫反应物分布稀疏。③两组大鼠损伤侧海马CA1区和齿状回分子层突触素免疫反应物的实际吸光度值:与正常组相比,损伤组海马CA1区多形层、辐射层、腔隙分子层和齿状回分子层均明显降低(80.34±4.33,43.40±2.57;78.25±5.48,40.21±3.22;30.01±4.05,12.37±1.78;60.50±3.80,26.63±2.36;P均<0.01)。经相关分析表明,大鼠窿海马伞损伤后学习记忆能力与海马CA1区多形层、辐射层、腔隙分子层和齿状回分子层突触素免疫反应物的实际吸光度值呈显著正相关(多形层:r=0.739,P<0.01;辐射层:r=0.624,P<0.05;腔隙分子层:r=0.892,P<0.01;齿状回分子层:r=0.853,P<0.01)。结论:痴呆模型鼠损伤侧海马CA1区多形层、辐射层、腔隙分子层和齿状回分子层突触素免疫反应物的吸光度明显下降,并与其学习记忆能力呈显著正相关。提示海马突触素含量减少与学习记忆能力存在密切关系。

摘要：背景:神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)能促进青年痴呆鼠的学习记忆能力的恢复,但老年痴呆鼠对NGF是否敏感?目的:探讨NGF对老年痴呆鼠学习记忆能力的影响。设计:以动物实验为依托,与对照组比较分析。地点和材料:实验在广州医学院解剖学教研室完成。材料:24个月龄雄性SD大鼠30只,NGF(人工脑脊液配制,3.0g/L,军事医学院提供),人工脑脊液配制细胞色素C溶液。方法:切断老年SD大鼠左侧穹窿海马伞(fimbria-fornix,FF),侧脑室注射NGF,用Morris水迷宫和Y迷宫测试正常组、损伤组和治疗组大鼠的学习记忆能力。主要观察指标:Morris水迷宫行为测试中大鼠平台平均潜伏期的变化及撤除平台后3组大鼠120s内在各象限游泳距离占总距离的百分比和跨过原平台位置数;Y迷宫检测中大鼠的学习和记忆能力的改变。结果:治疗组大鼠与损伤组相比较,治疗组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限游泳距离和穿环次数增多,学会Y迷宫所需训练次数减少和正确反应次数增多,但未完全达到正常水平。结论:NGF能够改善老年FF损伤鼠学习记忆能力。

摘要：背景:心肌肌钙蛋白在检测心肌梗死的诊断中有极其重要的临床意义。目的:将荧光标记物5-iodoaccetamidofluorescein(5-IAF)应用于心肌肌钙蛋白,观察其是否可用作与收缩调节蛋白之间相互作用的研究。设计、时间及地点:随机对照实验,于2002-01/2005-12在广州医学院人体解剖教研室完成。材料:成年兔,由广州医学院实验动物中心提供。方法:利用反转录-聚合酶链反应技术制备兔心肌肌钙蛋白C的基因片段,应用基因重组技术将兔心肌肌钙蛋白C基因片段克隆到pET表达载体,根据PCR定点诱变的方法,取得突变型的兔cTnC(C35S),分别将5-IAF和2-(4’-(iodoacetamido)anilino)naphthalene-6sulfonic acid(IAANS)标记在兔肌钙蛋白C(C35S),并进行恒态荧光测定和时间-分辨荧光测定。主要观察指标:兔cTnC(C35S)-IAF及cTnC(C35S)-IAANS的荧光特性。结果:5-IAF标记的兔肌钙蛋白C在波长491nm处进行激发,其发射峰值出现在波长520nm处,加入饱和的镁离子可导致荧光强度减少35%,继续用饱和的钙离子滴定,其荧光强度再减少35%,而且波峰向蓝光方向移动3nm。IAANS标记的cTnC(C35S)在加进镁离子和钙离子后引起的荧光反射的跃迁,并不出现在用5-IAF标记的cTnC上。然而,不管使用哪一种荧光标记物,钙引起cTnC的构象变化这个作用并没有改变。钙滴定实验表明,两种荧光标记物标记的荧光发射结合参数是一致的。结论:5-IAF标记可以应用于心肌肌钙蛋白与其他收缩调节蛋白之间相互作用的研究。

摘要：目的构建脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组逆转录病毒表达载体。方法根据 BDNF基因已知序列,设计合成一对引物并导入HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点;从大鼠海马组织提取总 RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得编码BDNF的基因片段,与克隆载体pMD 18-T Simple连接构建pMDT-BDNF质粒;经HindⅢ、BamHⅠ双酶切,获得BDNF基因片断再克隆至逆转录病毒载体 pLEGFP-N1中构建重组质粒pLEGFP-BDNF。结果限制性内切酶酶切分析和PCR法鉴定表明为正确重组子,测序结果证实与已知序列吻合。结论构建的重组逆转录病毒表达载体 pLEGFP-BDNF含有序列正确的大鼠BDNF基因,可以作为今后治疗老年性痴呆动物模型转基因实验的基因来源。

摘要：医学院校以培养优秀医护人才为主要目的。医学生从医学知识储备到临床实践的过渡过程中,局部解剖学发挥着重大作用。新时代背景下,医学课程教学中要求充分体现思政教育。为响应政策要求,本文介绍局部解剖学课程思政元素的发现、设计以及融入,分析思政教育与学习效果的关系,探讨局部解剖学教学过程中加强医学生思政教育的方法,以提高课程教学质量。