摘要：根据转基因玉米品系MIR604外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系MIR604的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价,评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。

摘要：目的建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达。方法将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转录PCR引物,通过不同的PCR反应程序和引物浓度组合试验,摸索最佳反应体系条件,用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力研究。结果用所建立的检测VBNC状态副溶血性弧菌的实时荧光逆转录PCR方法,对接种于陈化海水培养的不同时期的AS079副溶血性弧菌进行荧光定量逆转录PCR扩增,结果显示,随着培养时间的延长,毒力基因tdh2和鉴定基因toxR表达水平持续下降,但即使细菌进入VBNC状态,这两个基因也能够得到很好的扩增,说明以toxR基因和tdh2基因对进入VBNC状态的副溶血性弧菌进行检测和毒力研究方法可行。灵敏度试验表明,鉴定基因toxR的最低检测限可达到48 cfu/ml,研究毒力基因tdh2的表达需要细菌浓度至少为4.8×102cfu/ml,同时试验证明此方法与其他相近食源性致病菌无交叉反应。结论该实时荧光逆转录PCR方法检测快速、特异性强、敏感度高,适用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力分析。

摘要：国内的各类高校都在探索和研究情境教学法在教学中的运用,情境教学法在高职英语教学中的运用和实践也是教学改革的趋势,具体的教学案例和成绩对比说明:在高职英语教学中教师创设各种教学情境和设计不同的教学活动,并组织、引导学生参与其中,学生的英语学习兴趣和热情可以得到有效激发,学生的语言交际能力和自主学习能力得到培养和强化,从而获得更好的教学效果。

摘要：对如何建立冷热电联产(CCHP)系统综合评价指标体系进行研究,提出了一种CCHP系统综合评价指标体系的建立方法:首先构建设计框架,再将指标整理并按属性归类,形成多层次的指标体系,最后用主成分分析(PCA)法对指标体系进行修正。据此方法,建立了一套具有一定灵活性的多层次指标体系,该指标体系由固定指标体系和灵活性指标框组成,可用于不同场合的CCHP系统的综合评价。

摘要：选取新鲜甜玉米为原料,经预筛、打浆、调配、均质、杀菌等工艺制得甜玉米饮料。确定甜玉米打浆最佳料液比为1∶5 g/mL,并研究了蔗糖、柠檬酸、NaCl添加量对甜玉米汁感官评价的影响。选用了四种不同的亲水胶体研究其对甜玉米饮料稳定性的影响,在单因素试验的基础上,设计正交试验,进一步优化甜玉米饮料调配工艺。试验结果表明:蔗糖添加量4%、柠檬酸添加量0.1%、NaCl添加量0.15%时制得的甜玉米饮料感官评价最好,呈黄色,酸甜爽口,饱满柔和。加入魔芋胶0.01%、CMC0.06%、海藻酸钠0.06%作为甜玉米汁饮料的复配稳定剂,制得甜玉米饮料稳定性最佳。

摘要：根据转基因大豆A5547-127品系外源插入片段与植物基因组序列设计品系特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立了转基因大豆A5547-127品系成分特异性LAMP的快速检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度和稳定性测试。结果表明:该方法能快速、特异性检测出转基因大豆A5547-127品系成分,定性检测低限为0.5%,稳定性和特异性均能达到100%。

摘要：建立快速检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的多重PCR(MPCR)方法。针对古典型霍乱弧菌 (CVC)和埃尔托型霍乱弧菌 (EVC)的共有序列霍乱肠毒素基因 (ctxB)、CVC的毒力协调A亚单位基因 (C -tcpA)、EVC的毒力协调A亚单位基因 (E -tcpA)、副溶血性弧菌的热稳定性直接溶血素基因 (tdh)为靶序列设计引物 ,建立多重PCR检测方法 ,相应扩增片段依次为 5 6 4bp、6 17bp、4 71bp和 2 0 2bp。用该方法检测EVC、CVC、副溶血性弧菌、非O1群霍乱弧菌、沙门氏菌等 35株菌株表现出极好的特异性 ,对人工污染的罗非鱼、小虾、牡蛎、鱼鳃和鱼肠混合物的检出限EVC为 2 .2cfu/mL、CVC为 2 .8cfu/mL、副溶血性弧菌为 6 .5cfu/mL ,扩增片段表现出极好的特异性 ,整个实验过程 8～ 10h完成。实验结果表明该方法是特异性强、省时、省力的检测方法。

摘要：[目的]发展一种快速、敏感、特异的荧光PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌。[方法]针对单增李斯特氏菌溶血素基因(hlyA),设计特异的引物和TaqMan探针,优化体系,建立荧光PCR检测方法,对该方法的特异性和敏感性进行评价,并且在对188个进出口食品样本的检测中与传统方法进行对比。[结果]经对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株检测,结果显示该方法具有良好的特异性。灵敏度检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h。在实际样本的检测中,检测结果与传统方法结果一致。[结论]该方法能快速、简便和准确地检出单核细胞增生李斯氏菌,具有良好的应用前景。

摘要：本研究通过对咖啡基因信息的检索分析,根据咖啡的XMT1基因序列设计了一组咖啡特异性的引物与探针,建立咖啡物种特异性实时荧光PCR检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性测试,结果表明,该方法能快速检测出咖啡物种特异性,定性检测体系对咖啡DNA的检测灵敏度为0.1 ng/μL,特异性和稳定性良好。

摘要：根据编码拟态弧菌不耐热溶血素(Vibrio mimicus heat-labile hemolysin,Vmh A)的基因保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)特异性引物,建立拟态弧菌vmh A基因的RPA检测方法并测试其特异性、灵敏度和应用效果。结果显示,建立基于RPA的检测方法特异性好,能够从拟态弧菌中扩增得到467 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;对比RPA和PCR两种检测方法的灵敏度一致,均达到0.1 ng/μL。应用检测结果也表明该方法与传统培养方法相当。因此,本研究建立的RPA方法检测vmh A特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室快速检测。