摘要：由于转座因子“Ｍａｒｉｎｅｒｅｌｅｍｅｎｔ”在昆虫中可垂直亦可横向传播，携带此因子后昆虫眼睛变色，故而是一种极有发展前途的将杀虫基因转入按蚊的载体。在非洲的冈比亚按蚊中已发现有此因子的存在。本研究通过计算机队列分析，从一些昆虫中查出Ｍａｒｉｎｅｒ因子的保守区，并以此为基础设计出ＰＣＲ简并引物，通过扩增技术，从白端按蚊的基因组中发现了预期的基因片段，表明白端按蚊也存在Ｍａｒｉｎｅｒ因子。

摘要：全世界已经有超过二千万人死于获得性免疫缺陷综合征(又称艾滋病)。人类免疫缺陷病毒(HIV)是引起艾滋病的病原体,是由Montagnier在1983年发现的。HIV是一种逆转录病毒,有两条单链RNA组成,在逆转录酶的作用下,转录成前病毒双链DNA。HIV主要通过使CD4T细胞衰竭来破坏免疫系统。当CD4T细胞降至全血200个/mm-3时,免疫系统功能就会发生紊乱,并且会伴随机会性感染如结核杆菌、隐孢子虫等。本文概述了由于HIV感染引起的复杂、多面性的免疫反应,并重点介绍了CD4T细胞衰竭的机制。Th1和Th2辅助细胞的平衡改变也与疾病的进展有关。为了控制此疾病,研究者设计了多种疫苗,并且有些疫苗已经进入了临床试验阶段。

摘要：目的体外扩增弓形虫棒状体分泌抗原2(ROP2)靶基因,构建真核表达载体pc-DNA3-ROP2。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取基因组DNA;根据基因库ROP2基因序列设计合成1对引物,应用PCR扩增ROP2基因片段,回收纯化后克隆入TA载体质粒pUCm-T;用限制性内切酶EcoRⅠ、HindⅢ双酶切该重组子,将切下的ROP2基因在T4DNA连接酶作用下插入真核细胞表达载体质粒pc-DNA3,并进一步作双酶切、PCR及测序鉴定。结果以弓形虫基因组DNA为模板,PCR扩增出1.7kbROP2基因片段,克隆于pUCm-T载体中,再将ROP2基因亚克隆于真核表达载体质粒pc-DNA3,经筛选鉴定,构建pc-DNA3-ROP2重组质粒;测序结果显示,重组质粒包含了ROP2蛋白基因读码框内的完整序列,能完整表达ROP2的抗原蛋白。结论弓形虫ROP2基因片段,经TA克隆及亚克隆,构建弓形虫pc-DNA3-ROP2重组质粒。

摘要：目的研究弓形虫核酸疫苗,以用于弓形虫病的防治。方法根据ROP2基因序列,设计合成能表达ROP2完整蛋白基因的扩增引物,扩增ROP2靶基因并克隆于PUCm-T载体,然后再亚克隆于真核表达载体pc-DNA3质粒中,制备弓形虫pc-DNA3-ROP2核酸疫苗;应用裸pc-DNA3-ROP2免疫小鼠,通过免疫学指标的检测,评价小鼠的免疫应答反应,最后应用弓形虫RH株攻击实验,评价出该疫苗的有效保护率、安全性和在人类及畜类的应用价值。结果以ROP2基因为模板,PCR扩增出1.7kbDNA条带,与预想结果一致;将扩增DNA回收并成功的克隆了ROP2(PUCm-T-ROP2),然后亚克隆并构建了pc-DNA-ROP2重组体,通过酶切、PCR扩增和基因测序证明亚克隆的重组子正确,ROP2扩增基因包含了ROP2蛋白基因读码框内的完整序列;在应用疫苗免疫接种小鼠结果显示,疫苗接种能使小鼠产生强烈的细胞、体液免疫反应;攻击实验结果显示,实验组小鼠的存活时间明显延长,并且开始死亡时间明显延迟(P<0.001),实验组9只小鼠中有1只长期存活;在实验的整个过程中,没有发现小鼠对免疫接种的毒性和异常反应。结论该疫苗免疫原作用强,具有很好的开发应用价值,目前可在动物群体中试验应用。

摘要：本课题为探索间日疟灵敏特异的诊断和检测方法,解决灭疟后期疟疾监测的难题而设计.并从分子生物学角度,根据DNA分子碱基的互补原理和基因遗传的稳定性,从克隆的间日疟DNA重复序列中设计合成了CS9211寡核苷酸片段,由35 mer组成,经同位素标记作为探针,以斑点杂交法对不同虫种的疟原虫进行杂交,检验其特异性;对已知不同原虫密度的原虫血进行杂交,了解其敏感性和对现场采集的现症病人血样进行检测及现场传染源检索,以对其现场应用价值进行评价.在现场监测中对发热病人、流动人口、出国回归人员,疫点周围人群进行了检测,并使用镜检,IFA和PCR技术对结果进行验证以评价其结果的可靠性.