摘要：参照Zadori等发表的鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)B株基因序列,设计合成了一对引物,扩增GPVVP3基因。将该基因克隆于转移质粒载体pFastBac/HBM-TOPO中,获得重组转移质粒pFastBac/HBM-TOPO-VP3,并将其转化入DH10Bac细胞中,得到重组穿梭质粒Bacmid-VP3,再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBacmid-VP3,经PCR鉴定证实目的基因正确插入到杆状病毒基因组中。

摘要：通过克隆鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)分离株VP1-VP3非重叠区基因,并对其进行序列分析,为鹅细小病毒感染与疫苗免疫的鉴别诊断奠定理论基础。进行鹅胚病毒增殖,收集尿囊液,提取基因组,参考发表的B株序列,设计合成一对引物,经PCR扩增,克隆VP1-VP3基因,筛选阳性克隆,对其进行序列测定及同源性分析。结果表明,克隆的基因片段为901 bp,VP1-VP3基因共594 bp,编码198个氨基酸;弱毒株之间亲缘关系很近,核苷酸同源性99.5%～100%, 氨基酸同源性98.5%～100%; 强毒株与B株亲缘关系较近, 核苷酸同源性96.6%,氨基酸同源性97.5%;弱毒株与强毒株亲缘关系较远,核苷酸同源性92%～93%,氨基酸同源性96%～97.5%;弱毒株与B株亲缘关系最远,核苷酸同源性92.5%～93%,氨基酸同源性93.9%～95.5%。说明强毒株与弱毒株之间核苷酸序列存在差异。