摘要：以长吻仔鱼为实验对象,探讨不同投喂水平对7—14日龄阶段和21—29日龄阶段的长吻仔稚鱼存活、生长以及鱼体组成的影响。7—14日龄阶段设计6个投喂水平,分别为:20、30、40、50、60和70%IBW/d(IBW:initial body weight);21—29日龄阶段设计6个投喂水平:10、20、30、40、50、60%IBW/d。实验结果表明:(1)投喂水平显著影响长吻仔稚鱼的存活和生长(P<0.05)。7—14日龄阶段,投喂水平为30%—60%IBW/d处理组的仔鱼存活率显著高于20%与70%IBW/d投喂组(P<0.05)。特定生长率随投喂水平的增加显著上升,以60%IBW/d投喂组最高(P<0.05)。21—29日龄期间,10%IBW/d投喂组存活率显著低于50%IBW/d投喂组(P<0.05),特定生长率(SGR)则显著低于其他各处理组(P<0.05);(2)鱼体体长体重变异系数未受投喂水平的显著影响。鱼体产出与饲料投入之比、鱼体水分含量随投喂水平升高显著下降(P<0.05),粗蛋白含量则显著上升(P<0.05);粗脂肪和粗灰分含量无显著差异;(3)分别通过存活率和投喂水平做一元二次回归、特定生长率与投喂水平做折线回归得到7—14日龄阶段的仔鱼最适投喂水平为43%IBW/d;通过仔鱼存活率和特定生长率与饲料投喂水平做折线回归得到21—29日龄阶段的仔鱼最适投喂水平分别为30.62%IBW/d和28.41%IBW/d。

摘要：【目的】获取鲤鱼线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)基因CDS区,对其进行生物信息学分析,并探讨MAVS基因在免疫反应中的功能。【方法】参考NCBI中公布的鲤鱼MAVS基因预测序列(GenBank登录号:XM_019072216.2)设计引物对MAVS基因进行克隆和测序,使用生物信息学软件分析鲤鱼MAVS蛋白的性质和功能。对鲤鱼进行嗜水气单胞菌攻毒试验,使用实时荧光定量PCR技术检测MAVS基因在攻毒前后鲤鱼各组织中的表达水平。通过免疫荧光检测试验进行MAVS和线粒体的亚细胞定位;使用双荧光素酶报告基因系统检测MAVS基因调控下游基因的表达情况。【结果】克隆得到鲤鱼MAVS基因CDS区序列全长1749 bp,共编码582个氨基酸。鲤鱼MAVS基因核苷酸序列与鲫鱼、多磷白甲鱼、虎皮鱼、野鲮、草鱼、团头鲂、拉氏鱥、金线鲃、胖头鱥的相似性分别为92.3%、89.5%、85.1%、79.1%、73.6%、73.1%、72.0%、70.1%和69.8%。系统进化树结果显示,鲤鱼与鲫鱼、野鲮、多磷白甲鱼等聚为一支。鲤鱼MAVS蛋白为酸性、不稳定蛋白质,具有较强的亲水性,含有133个磷酸化位点及1个跨膜螺旋,属于跨膜蛋白;不含有信号肽,不属于分泌蛋白。蛋白保守性分析显示,MAVS蛋白的N-端CARD结构域、中间富含脯氨酸结构域(PRR)和C-端跨膜结构域(TM)在不同物种之间高度保守。鲤鱼MAVS蛋白的二级结构和三级结构显示,该蛋白主要由无规则卷曲(58.93%)和α-螺旋(23.37%)构成,延伸链(13.92%)和β-转角(3.78%)含量较低,表明其为一种混合性蛋白。蛋白互作结果显示,MAVS蛋白与NLRP3、TRAF6、ATG5、DDX58、TBK1等免疫蛋白之间存在相互作用。实时荧光定量PCR结果表明,与对照组相比,攻毒后鲤鱼MAVS基因在心脏、脑、脾脏、肝脏、肠道、肌肉、鳃组织中表达量显著或极显著升高(P0.05)。细胞免疫荧光结果显示,MAVS蛋白表达位置与线粒体一致。双荧光素酶基因检测报告结果显示,MAVS基因能够极显著激活IFN和ISRE启动子(P<0.01)。【结论】MAVS基因在不同物种及在遗传进化过程中高度保守,在鲤鱼不同组织中广泛表达。本试验结果为进一步研究MAVS基因在鲤鱼先天免疫反应中的功能及分子机制提供了理论依据。