摘要：文章旨在探讨RFID技术在中小型专业图书馆文献自动分类中的应用。首先,详细分析当前中小型专业图书馆存在的问题,包括馆藏资源不足、智能设备应用不足和RFID技术构建不足。然后,结合图书馆文献分类的实际需求和现状,提出基于RFID技术的中小型专业图书馆管理系统,总结图书馆需求,设计系统体系结构。最后,设计图书馆管理系统模块。结果表明,基于借助RFID技术的图书馆管理系统,可快速实现对图书馆文献的快速、准确分类和定位,大幅度提高图书馆工作效率和文献检索体验。

摘要：根据GenBank已发表的鸡γ干扰素(ChIFN-γ)cDNA基因序列设计一对引物,以ConA刺激8 h后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出ChIFN-γ基因,将其连接到pMD18-T载体上获得阳性重组质粒。测序结果表明,该ChIFN-γ与GenBank上发表的ChIFN-γ序列的同源性可达99.6%,其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸。通过Kpn I和Not I两个酶切位点将该基因插入酵母表达载体(pPICZa-A),并将该重组酵母ChIFN-γ载体线性化,通过电转化使ChIFN-γ基因整合到酵母(X-33)基因组上,经甲醇诱导后,成功表达出ChIFN-γ。利用Western-blotting分析测定表达的ChIFN-γ蛋白的活性。结果表明,本试验得到的重组酵母ChIFN-γ是具有反应原性的蛋白。

摘要：根据GenBank上所公布的新城疫病毒（NDV）的全基因组序列，设计了10对引物，运用RT-PCR方法获取了三黄鸡新城疫病毒（SHJ00株）全基因组序列，并对其进行了比较分析。结果表明：此株三黄鸡新城疫病毒（SHJ00）的全基因组序列由15192个碱基组成，在NP基因和P基因之间的非翻译区多了6个核苷酸ACACTC；与NDV一致，SHJ00基因由6个ORF组成，即3’-NP-P-M-F-HN-L-5’；测序后拼接的F基因长1672bp，包含完整的开放阅读框（1662bp），编码553个氨基酸，F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112^R-R-Q-K-R-F^117，具有强毒株序列特性；根据NDV基因分型标准，三黄鸡新城疫病毒SHJ00株归属基因Ⅶ型新城疫病毒；F基因与国内外NDV代表株的核苷酸同源性为80．9％～97．7％，其中与F48E9同源性为84．3％，与Lasota的同源性为82．0％；测序后拼接的HN基因长为1716bp，编码571个氨基酸，与国内外NDV代表株的核苷酸同源性为80．0％～98．1％，其中与F48E9同源性为84．5％，与Lasota的同源性为81．4％。

摘要：通过对GenBank发表的鸭副粘病毒(DPV)和鸭H9亚型禽流感病毒(AIV,H9)基因序列分析,针对保守区分别设计并合成2对特异性引物。通过对扩增条件的优化,建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果表明,该检测方法可同时扩增出DPV(363 bp)和H9亚型AIV(732 bp)的特异性片段,而对照DHV、IBV、IBDV及SPF鸡胚尿囊液均未见条带。该方法具敏感性,对鸡胚感染尿囊液中两种病原核酸的检出率均为2 ng.μL。对保存不同时间的两种病毒及临床可疑病料均可检测到阳性条带。试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,可以用于临床样品的早期快速检测和鉴别诊断。

摘要：根据GenBank发表的DHVI的基因序列,设计了1对针对DHVI保守区的特异性引物。通过对反应条件的优化,建立了鸭病毒性肝炎病毒快速鉴别诊断的RT-PCR方法,扩增片段大小为632bp。试验表明,RT-PCR法具有很强的特异性,且该方法的敏感性明显高于常规的检测方法。对鸭病毒性肝炎的病料检测证明,该方法能有效鉴别DHV,特异性良好。

摘要：为了建立一种适用于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法,本试验根据IBV衣壳蛋白M基因保守区域设计了一套特异性引物,并对反应条件进行优化。结果显示,建立了IBV的RT-LAMP检测方法,该方法既可通过将反应产物进行凝胶电流观察结果,也可直接通过向反应产物中加入荧光染料对结果进行可视化观察。该方法具特异性,对鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV H9)、坦布苏病毒(TMUV)及正常鸡胚尿囊液均无扩增反应。该方法对IBV的最小检测量为12 fg。表明本研究建立的方法简便而快速,灵敏而特异,适合于兽医临床对IBV的快速检测及流行病学调查。

摘要：【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入Flag标签序列和酶切位点,采用PCR扩增GTMUV的E蛋白结构域III基因(EIII),然后与p ET32a原核表达载体连接构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导融合蛋白表达,并以Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】PCR扩增获得携带Flag标签序列的EIII基因片段约430 bp,将其插入p ET32a载体可成功构建重组质粒p ET32a-EIII。阳性重组菌经IPTG诱导表达5 h即可得到融合蛋白,分子质量约33.0 k Da,主要以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与抗Flag标签单克隆抗体、小鼠抗坦布苏病毒多克隆抗体均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域Ⅲ能在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于研制GTMUV诊断抗原和亚单位疫苗。

摘要：根据GenBank发表的鸭瘟病毒(DPV)的基因序列,设计了针对DPV UL6 UL7保守区1对特异性引物。通过对反应条件的优化,建立了鸭瘟病毒快速鉴别诊断的PCR方法,扩增片段大小为1 293 bp。试验结果表明PCR法具有很强的特异性,且敏感性较高,最低DNA模板检出量为15 pg/mL。对鸭瘟的临床病料检测证明,该方法具有特异、快速和敏感的特点,可有效鉴别DPV。

摘要：以鹅坦布苏病毒（ goose Tembusu virus ， GTMUV ）的囊膜蛋白基因序列为基础，采用 Chou -Fasman 法、Garnier-Robson法和Karplus-Schulz法预测蛋白质的二级结构，采用Kyte -Doolittle 方案、Emini 方案和Jameson -Wolf方案预测鹅坦布苏病毒囊膜蛋白的B细胞表位。结果表明，鹅坦布苏病毒囊膜蛋白肽链的35～41、80～89、148～159、245～251、314～320、392～402和475～482区段为预测的B细胞表位优势区。综合研究结果，利用多参数方案综合预测E蛋白的B细胞抗原表位为进一步鉴定表位及设计疫苗奠定了基础。

摘要：选取鹅黄病毒囊膜蛋白(E蛋白)基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断和可作为亚单位疫苗的重组蛋白。根据鹅黄病毒JS804株全基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR方法扩增出了鹅黄病毒的E基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-E,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。结果表明,鹅黄病毒E基因在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子量约为70 kDa,主要以包涵体形式存在于菌体中。Western Blot和间接免疫荧光试验发现,重组E蛋白具有较好的反应原性和良好的免疫原性。鹅黄病毒E蛋白的原核表达为进一步研究该蛋白功能、建立血清学检测方法及研制亚单位疫苗奠定了基础。