摘要：目的建立一种可同时检测27种呼吸道病原体的多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)MassARRAY技术,并探讨其临床应用价值。方法针对呼吸道病原体设计扩增引物和延伸引物,并构建病原体标准质粒;按梯度稀释标准质粒,用于考察多重RT-PCR MassARRAY方法的灵敏度、特异性和重复性。分别采用建立的多重RT-PCR MassARRAY方法和实时RT-PCR方法检测207份呼吸道感染患者鼻咽拭子样本,比较2种方法的检测性能。结果建立的多重RT-PCR MassARRAY方法对29种病原体的最低检出限为1×10^(1)~1×10^(3)拷贝/μL,特异性高。207例鼻咽拭子样本中共检出57份阳性,阳性检出率为27.54%。细菌性病原体中检出率较高的是肺炎链球菌、卡他莫拉菌、肺炎支原体和流感嗜血杆菌;病毒性病原体阳性检出率较高的为副流感病毒、人偏肺病毒和甲型流感病毒。2种方法检测结果总符合率为99.03%,具有高度的一致性(kappa=0.98)。结论基于RT-PCR MassARRAY技术的27种呼吸道病原体检测方法具有较高的灵敏度和特异性,且操作简单,通量高,可以为临床呼吸道病原体感染的诊断提供实验室依据。

摘要：目的建立一种基于多重实时荧光定量PCR(MRT-PCR)技术的可同时检测14种高危亚型人乳头瘤病毒(HPV16、18、31、33、35、39、52、45、51、56、58、59、66、68)癌基因E6/E7 mRNA的方法。方法对14种高危型HPV各自的E6/E7基因序列区域设计特异性引物和探针,配以优化的反应体系,形成HPV E6/E7 mRNA检测体系,评价方法检出限、特异性。收集223例临床样本,分别用自建的一步法MRT-PCR法与转录介导等温核酸扩增(TMA)技术(Aptima®HPV试剂盒)检测HPV E6/E7 mRNA,同时评估HPV E6/E7 mRNA检测结果与薄层液基细胞学检测、宫颈组织病理学检测结果的一致性。结果建立的检测方法对常见的低危型HPV无交叉检出,且对14种高危型HPV的检测限可达10~100 copies/μL。该方法检测223例临床标本的结果与Aptima®HPV检测结果相比,一致性较好(Kappa=0.910)。以组织病理结果为CINⅡ及以上的作为阳性,MRT-PCR法临床检测敏感性为84.0%,特异性为94.4%,阳性预测值为65.6%,阴性预测值为97.9%。结论建立的MRT-PCR方法具有特异性好、灵敏度高和稳定性好等优点,为HPV临床快速检测以及宫颈病变筛查提供了一个有效的技术平台。

摘要：文中介绍了利用EDA设计软件Multisim7和Ultiboard7,采用模拟、数字及模数混合集成器组成的三相对称SPWM调制器的设计、仿真过程。简述了幅值、频率稳定可调的三相对称正弦交流信号的产生方法及电路的设计过程。在频率的选择与显示、启动/运行转矩的控制和输出换相控制及保护复位等功能上均达到三相变频器对调制信号的相应要求,为变频器在低端用户的推广使用创造了条件。

摘要：本文采用了工程上实用的薄壳理论和有限元两种方法以及进行实验验证相结合的方针对外导流筒进行了全面的应力应变分析研究,并同时考虑了开孔,特别是大开孔情况。