摘要：以拟南芥为材料,对热激蛋白HSP70基因片段进行了克隆研究,获得了最佳的分子克隆实验体系.首先提取拟南芥总DNA,接着在热激蛋白HSP70编码区设计引物,扩增出HSP70编码区的片断,再将HSP70编码区的片断加上具有EcoR I酶切位点双链的人工接头,通过EcoR I对其进行酶切.再与经过EcoR I酶切并已经去磷酸化的PUC19载体通过T4连接酶进行连接,然后将连接产物置入到感受态大肠杆菌细胞中(即转化),并让这种细胞在含有Amp+/IPTG/X-Gal的LB培养基上生长.挑取培养基上蓝白斑中的白斑,进行质粒DNA提取,通过酶切质粒DNA,从而初步判断目的片段已被克隆.

摘要：目的优化雪上一枝蒿中乌头碱的提取工艺。方法采用正交设计法考察料液比、乙醇浓度、提取时间3个因素对雪上一枝蒿中乌头碱提取率的影响,以HPLC法测定提取液中乌头碱的含量。结果乙醇用量对试验结果有显著影响,其他因素影响不显著,最佳提取条件为3倍量70%乙醇渗漉提取8 d。结论该方法稳定可靠,为工业化生产提供了理论依据。