摘要：目的:探讨椅旁计算机辅助设计与制造(CAD/CAM)联合激光修复后牙牙体缺损的效果。方法:选取2016年1月—2020年12月就诊于郑州市中心口腔医院口腔科的86例(108颗)牙龈覆盖部分牙体组织的牙体缺损患者作为研究对象,均给予CAD/CAM联合激光修复后牙牙体缺损治疗,修复后1年进行随访,观察其疗效。结果:108颗修复体中成功102颗,失败6颗。失败的患者中,修复体粘接失败4颗,含前磨牙1颗,磨牙3颗;修复体折裂2颗,均为活髓牙;术后敏感1颗,1周后敏感症状消失,余修复体边缘密合,边缘线未见着色,牙龈颜色质地正常。结论:CAD/CAM联合激光修复牙龈覆盖部分牙体组织的后牙牙体缺损短期临床效果显著,是修复后牙牙体缺损的有效方法。

摘要：为探讨PRRSV非结构蛋白4(NSP4)功能,体外构建了pEGFP-N1-nsp4真核表达载体,转染Marc-145细胞,利用NSP4-GFP融合蛋白携带的绿色荧光标记,研究NSP4蛋白在Marc-145细胞中的定位,并根据蛋白疏水性设计构建含有nsp4基因N端不同长度的重组pEGFP-N1表达载体,转染细胞以进一步了解NSP4蛋白是否存在核定位信号序列及其在细胞中的分布。试验结果表明:融合蛋白主要位于细胞核,部分在胞浆内。PRRSV NSP4蛋白铰链区(hinge region,HR)145～168氨基酸是决定蛋白核内定位的功能区,该片段缺失影响NSP4蛋白进入细胞核。结论:体外转染细胞内表达的NSP4蛋白主要分布在细胞核内,HR区是其核定位信号,NSP4蛋白通过HR区信号作用主动进入细胞核内。

摘要：以在新媒体研究中使用较为频繁的技术接受模型为基础,假设感知的有用性、感知的易用性,以及用户对广告信息内容的风险感知、广告投放的精准程度等因素对于用户接受程度产生影响。通过问卷调查法验证了研究假设,发现感知有用性、感知易用性、广告创意等因素是影响用户智能广告接受的关键性因素。随着智能技术在广告行业的日益成熟与运用,受众对于智能广告接受程度的影响因素及各因素的作用机制研究相对较少,具有技术创新扩散的意义。

摘要：猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)作为一种新型的猪肠道腹泻病毒,建立快速有效的检测手段十分必要。本研究根据PDCoV N基因中的保守序列设计了1对特异性引物,PCR扩增后克隆至pEASY-Blunt Zero载体,构建了阳性质粒pEASY-PDCoV/N。以阳性质粒pEASY-PDCoV/N为模板,建立了检测PDCoV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,并对其敏感性、特异性和重复性等进行了优化与验证。结果显示,C_(1)值与标准模板在5.83×10^(7)~5.83×10^(1)copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数(R^(2))为0.999,线性方程的斜率为-3.323,最低检测限度为5.83×10^(1)copies/μL。该方法特异性和重复性均较好,对PEDV、PRV、TGEV等病毒均未出现检测信号,批内和批间变异系数分别小于1%和2%。利用建立的PDCoV荧光定量PCR检测方法对60份猪腹泻样品进行核酸检测,阳性率为18.3%,比普通PCR检出率高6.7%。结果表明,该方法可适用于临床快速检测PDCoV,为该病的预防和控制提供技术支持。

摘要：根据猪流感病毒血凝素蛋白基因(Heamuglutinine,HA)的核苷酸序列,设计、筛选HA蛋白氨基酸序列的主要表位多肽4个,将4个片段以柔性连接串联成模拟蛋白,核苷酸约为300 bp,体外扩增该模拟蛋白基因,插入到原核表达载体pET30a(+)中,转染宿主菌诱导表达,结果获得分子量为20 kD的表达蛋白,该蛋白可与抗His-tag抗体、抗猪流感病毒H1N1、H3N2亚型高免血清发生免疫学反应。纯化后免疫小鼠,ELISA及血凝抑制(Heamuglutinine inhibitor,HI)试验检测,小鼠产生针对多肽抗原的血清抗体,同时还可检测到H1N1、H3N2亚型SIV血凝抗体。流氏细胞仪检测免疫组外周血淋巴细胞高于对照组,说明该模拟蛋白具有与H1N1、H3N2亚型猪流感病毒相似的免疫原性及反应原性,为H1N1、H3N2血清亚型猪流感病毒疫苗研制提供了新手段。

摘要：参考GenBank发表的传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）S基因序列，设计合成了1对引物，模拟PCR表明，该引物能扩增现已发表的所有IBV的S2基因部分核酸序列，扩增片段493bp。建立的RT—PCR检洲体系检测灵敏度达10～50ELD50，检出限量为0．1ng。采集上海地区12个鸡场疑似IBV禽样品34份进行检洲，阳性为32份，序列分析表明均为肾变型IBV S2基因片段，S2基因同源性较高（≥99％），与其他地区肾变型IBV也有较高同源性，而与腺胃型和呼吸型相比较，序列差异较大。进化分析表明，尽管IBV S2片段变异率明显低于S1基因，但二者表现相同的进化趋势，S2基因亦可反映出IBV的分子变异及毒株间的亲缘关系。

摘要：采集以腹泻、呼吸困难为主要症状的雏番鸭肝、脾病料，接种１４日龄非免疫番鸭胚，８０％胚在３－７天死亡，胚体呈弥漫性充血、出血。接种番鸭胚成纤维原代细胞７２小时可见细胞圆缩、聚团等变化。聚苯乙烯乳胶凝集试验呈阳性，提取病毒接种细胞及尿囊液 ＤＮＡ，用自行设计引物扩增到与设计相符的 ６００ｂｐ片段，克隆至 Ｔ载体，经酶切及序列分析表明我们所分离到的病毒为雏番鸭细小病毒（Ｍｕｓｃｏｖｙ　 Ｄｕｃｋｉｌｉｎｇ　 Ｐａｖｏｖｉｒｕｓ，ＭＰＶ）。

摘要：目的探讨种植牙修复牙列缺损的临床效果。方法选择牙列缺损患者57例,植入种植体73颗,3～6个月后行冠修复,定期复查,检查种植体与周围软硬组织的结合情况和修复体使用情况。结果经1～2年观察,1例出现牙龈轻度萎缩、食物嵌塞,1例出现基台松动,1例未能达到骨结合,其余患者各项评价指标良好。结论种植牙修复牙列缺损临床效果良好,但修复设计需合理,操作需规范,并要定期复查。

摘要：为了检测、区分猪传染性胃肠炎 (TGE)和猪流行性腹泻 (PED) ,建立了同时检测这 2种疾病病原体的多重 PCR方法。参考 Gen Bank登录的 TGEV和 PEDV纤突蛋白 S基因序列 ,经 DNAsis 2 .0比较分析 ,分别筛选出 TGEV、PEDV S基因相对保守区。以 TGEV TH- 98株 (Gen Bank登陆号为 AF4 94 337)和 PEDV CV777株 (Gen Bank登陆号为 NC0 0 3436 )为参考模板 ,利用软件 Primer 3设计合成了 2对寡核苷酸引物 ,以 ST细胞培养的 TGEV和 PEDV毒株核酸为模板 ,利用所设计的 2对引物进行多重 RT- PCR扩增 ,结果同时得到与试验设计相符的 4 99bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带 ,而对其他 3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明 ,建立的多重 RT- PCR方法可检测出 10 pg TGEV RNA和 10 0 pg PEDV RNA。

摘要：参考Gen Bank中猪乙型脑炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通过比对分析,选取8个保守区域设计了6条引物,经条件优化及临床样品验证,本研究建立了能同时检测JEVⅠ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法。该方法的最低检测灵敏限度为15 copies,具有较好的特异性,对猪常见病原如猪流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病病毒(PRV)等均没有特异性扩增。与RT-PCR检测方法相比,其灵敏性高10倍。用本研究建立的RT-LAMP方法检测来自屠宰场的1 500份猪血清,阳性检出率为0.4%,与RT-PCR吻合率达100%,表明本试验建立的RT-LAMP方法适用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量筛检,为JEV感染的流行病学调查提供了必要的技术手段。