摘要：目的探索慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)沉默黏蛋白3A(Muc3A)表达对肝外胆管癌QBC939细胞生长和增殖能力的影响。方法设计、合成针对Muc3A基因的shRNA干扰序列,重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度。转染肝外胆管癌QBC939细胞,采用最佳药物筛选浓度筛选获得稳定阳性细胞株。将肝外胆管癌QBC939细胞分为三组培养:慢病毒介导shRNA转染细胞(转染组)、空病毒转染细胞(阴性对照组)及未转染细胞(空白对照组)。蛋白印记(western blot)检测shRNA对Muc3A基因的沉默效率;MTS法检测细胞生长情况,平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功包装慢病毒,病毒悬液的滴度为1×10^8 TU/ml;病毒液感染EHCCQBC939细胞,Western blot证实shRNA序列定向插入慢病毒载体质粒中;选择3μg/ml嘌呤霉素最佳筛选浓度,获得稳定细胞株;Western blot结果分别显示转染组Muc3A表达明显低于阴性对照组与空白对照组(P0.05)。结论慢病毒介导shRNA转染干扰Muc3A基因表达后可明显抑制肝外胆管癌QBC939细胞的生长增殖和克隆能力,提示Muc3A能促进肝外胆管癌细胞的生长与克隆增殖。