摘要：目的研究淋病奈瑟球菌(NG)表面Porin B(Por B)蛋白特异性及免疫保护性在临床中的应用价值。方法登录Gen Bank获取NG世界卫生组织(WHO)标准株E株Por B-PIA基因,设计引物与合成,培养WHO标准株E株,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出Por B-PIA DNA片段,采用GST·Bind^(TM)树脂纯化Por B蛋白,对噬菌体随机12肽库进行筛选并对阳性克隆进行提取,应用DNA测序及MIXOX软件分析;将培养后的人尿道上皮细胞分别与Por B蛋白特异性结合的多肽、NG活菌进行培养,并将未加入抗体作为对照组。观察Por B蛋白的纯化表达,Western blot检测Por B蛋白与NG特异性关系,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测筛选后蛋白的特异性抗体水平,比较Por B蛋白特异性结合多肽对细胞内形成微菌落的差异。结果Ecoli-BL21中克隆表达的诱导产物经Ni+-NTA Purification System纯化后,获得纯度较高的Por B蛋白;制备出Por B蛋白相应的特异性结合多肽,蛋白出现特异性条带;间接ELISA检测筛选后蛋白的特异性抗体水平,筛选后蛋白的抗体水平在1∶200;加入Por B蛋白特异性结合多肽的组形成的微菌落显著少于对照组(P<0.05)。结论NG表面Por B蛋白发挥显著特异性和免疫保护性,但还需大量研究及临床试验来证明其临床效果并进一步分析Por B蛋白的相关机制和作用,为临床NG疫苗的研究提供依据。