摘要：课堂提问是一种重要的教学手段,也是一种艺术。在化学新课程理念的指导下,教师要关注课堂教学中关于提问存在的问题,充分发挥主导作用,提出具有启发性、趣味性和层次性的问题,实现提问的有效性,做到有效提问。

摘要：连续性问题情境模式是指在课堂教学中,教师依据学习类型的内在逻辑关系,根据学生现有的知识水平和能力特点,设计若干个有内在逻辑关系的、连续的问题情境教学模式,以引发学生思考,促进学生的思维能力和认知能力。教师的课堂时间,需要具备稳定的课堂结构以及步骤实施过程,课堂活动要保持衔接与连续性,引发学生不断深入思考。教师可从连续性问题情境教学的指导思想与目标、实施原则、实施方法三方面进行探讨。

摘要：目的在体外分离培养的大鼠神经干细胞内，通过慢病毒介导的shRNA实现持续稳定的NgR沉默。方法设计并合成表达NgRshRNA的慢病毒载体，通过转染293T细胞系收集包装好的病毒颗粒。分离培养初生大鼠脊髓神经干细胞，以不同MOI值感染慢病毒，流式细胞术确定感染所需的最佳MOI值。感染慢病毒的神经干细胞经潮霉素筛选后进行单克隆培养，Westernblot法检测NgR的沉默效率。取感染后不同天数的神经干细胞，实时定量PCR检测NgR沉默的稳定性。结果神经干细胞分离培养6天后可见神经球形成；流式细胞术测定慢病毒感染的最佳MOI=10；慢病毒感染后NgR的沉默效率可达80％．并可在7～28天内维持在70％～80％。结论慢病毒介导的shRNA可以在体外分离培养的大鼠神经干细胞内实现较为稳定的NgR基因沉默，为开展神经于细胞移植治疗脊髓损伤奠定了基础。

摘要：目的构建靶向大鼠Nogo受体(NgR)的小发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并进行病毒颗粒包装及滴度测定。方法设计合成3对针对大鼠NgR及1对非特异性的寡核苷酸单链,退火后得到shNgR双链,克隆入慢病毒载体pGC-LV,行聚合酶链反应(PCR)并测序鉴定重组体;构建NgR过表达载体,双酶切并测序鉴定插入序列正确性;NgR过表达载体和各慢病毒shRNA干扰载体共转染293T细胞后,定量反转录(RT)-PCR及蛋白印迹法筛选有效的慢病毒shRNA干扰载体;重组NgR慢病毒shRNA干扰载体和病毒包装质粒共转染293T细胞,包装并收集病毒颗粒,进行病毒浓缩液滴度检测。结果 PCR及DNA测序结果均显示慢病毒载体pGC-LV-shNgR构建正确;双酶切及测序亦显示NgR过表达载体插入序列正确;定量RT-PCR及蛋白印迹法结果表明所构建的3个慢病毒载体pGC-LV-shNgR均可以有效干扰NgR的表达,其中pGC-LV-shNgR-A干扰效率最高;包装病毒颗粒后,检测病毒浓缩液的滴度为2×107 TU/mL。结论成功构建靶向大鼠Nogo受体的shRNA慢病毒载体并进行病毒颗粒包装,浓缩的病毒液可以用于后续研究。

摘要：一般研究中,通常将类似澄江动物群或关岭动物群为代表的生物软体印痕化石保存归因为与缺氧环境等有关的特异条件。本文关注到通常与化石降解和埋藏有关的缺氧环境推测并没有表达机理和成立条件;生物体内自身携带大量的微生物可能对生物的降解作用需要得到重视。为证实水体中氧气含量与生物非矿化组织印痕保存间的关系,本文通过设计条件控制(太湖银鱼,30℃,无菌纯净水、无外界微生物)进行有氧和缺氧环境的对比实验。该条件下的模拟对比实验研究证实:1)总体来说生物降解过程在有氧和缺氧环境下具有相似的降解速度;2)两者的降解实验在前期有短暂的差异,而144小时(6天)后有氧和无氧环境具有基本一致的降解速度和程度,其中较多样本6天后在缺氧环境的降解速度略高于有氧环境,短时间(6天)的降解差异是否会造成矿化差异有待研究;3)生物体本身携带的以肠道微生物为主的好氧和兼性厌氧微生物,足以使生物以蛋白质为代表的器官结构产生相似的破坏性降解,在本研究中是主要的降解因素;4)实验中所检出的生物体肠道内普遍存在的兼性厌氧微生物,可能是导致有氧和缺氧环境具有相似降解过程的主要原因;5)生物降解过程早期由于蛋白质的降解,微环境趋向于弱碱性而非一般推测的酸性;6)在实验设定条件下的有氧环境和缺氧环境对化石的形成和保存的早期过程相似,其他理化条件下的降解过程和结论需要进一步实验证实。