摘要：目的建立针对非结核分枝杆菌中瘰疬分枝杆菌菌株的real-time PCR检测方法。方法在我们的研究中,根据瘰疬分枝杆菌的SodA基因设计MGB探针和特定的引物,并用来检测模拟样品中的瘰疬分枝杆菌。结果该方法最低瘰疬分枝杆菌DNA检测浓度是101拷贝数,标准曲线显示阈值周期和SodA基因片段拷贝数之间的相关系数是0.973,斜率为-3.249,表现出良好的线性关系。此外,模拟样品最低检测浓度是每毫升101个细菌,此外,其他9株菌为阴性结果,验证了良好的特异性。结论该方法对于检测瘰疬分枝杆菌模拟标本显示很高的敏感性和特异性,可用于瘰疬分枝杆菌菌株的生态和流行病学监测。

摘要：目的建立并评估一种快速鉴定分枝杆菌的多重PCR法,为结核病的快速病原诊断提供技术手段.方法选取16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因,设计特异性引物,经条件优化,建立多重PCR方法.对非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、卡介苗(BCG)菌株、7种常见的非结核分枝杆菌(NTM)、7种常见的呼吸道病原菌和甘肃省93株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行检测鉴定,评价其敏感性和特异性.结果16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因产物长度分别为543 bp、786 bp、369 bp和231 ***北京基因型的4个基因均为阳性,而非北京基因型mtbk_20680基因为阴性;非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、BCG菌株均为16S rRNA和Rv0577阳性;7种NTM仅16S rRNA为阳性;7种呼吸道菌检测结果均为阴性.93株MTB临床分离株中鉴定为北京基因型菌株的有80株,占86.02%,非北京型菌株有13株,占13.98%.该方法的特异性为100%.结论该多重PCR法可以准确鉴别分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群(MTBC)、NTM、MTB、北京基因型与非北京基因型MTB,具有高度的敏感性和特异性.