摘要：针对当前国内关于交通信号灯的研究存在的人性化缺失的问题,本研究结合工程心理学领域的可用性研究,着重在于探索交通信号灯的人性化因素,通过设计激发被试焦躁情绪的方案,利用实验法研究当个体处于焦躁情绪状态下时在新型设计的红灯场景中其红灯忍耐时间、违规行为频率的变化规律。实验结果表明:当红灯形状为心形,并且有提示音时,个体表现出了较高的忍耐力,表现为对红灯的忍耐时间最长且违规次数最少。

摘要：目的构建钙网织蛋白(CRT)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,并检测其对喉鳞状细胞癌细胞Hep-2中CRT表达的影响。方法设计CRT特异性靶序列,合成含有靶序列的线性化载体pSIH1-H1-copGFP,通过转染喉鳞状细胞癌细胞Hep-2筛选基因表达效率最高的靶序列。包装生产CRT-shRNA慢病毒并测定滴度,转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测重组慢病毒载体对CRT基因在mRNA和蛋白水平的沉默效果。结果PCR阳性鉴定及测序分析结果显示,插入片段的序列及方向均与预期结果一致。含靶序列CRT siRNA1、CRT siRNA2、CRT siRNA3的载体转染喉鳞状细胞癌细胞Hep-2的表达量均低于空白对照组(P﹤0.05)。含靶序列CRT siRNA1、CRT siRNA2的载体转染喉鳞状细胞癌细胞Hep-2的基因表达效率均低于CRT siRNA3(P﹤0.05)。经测定,慢病毒载体的滴度为3.5×10^7 TU/ml,感染复数(MOI)=30时慢病毒转染至Hep-2细胞的转染率在90%以上。实时PCR结果显示,shRNA组中CRT基因的表达水平低于空白对照组和阴性对照组(P﹤0.05)。Western blot结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,shRNA组喉鳞状细胞癌细胞Hep-2中CRT蛋白的表达水平明显下降。结论成功构建针对CRT的重组慢病毒载体可有效抑制喉鳞状细胞癌细胞Hep-2中CRT的表达,为后续研究CRT基因的功能提供了实验工具。