摘要：目的:探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响.方法:设计合成三对特异性siRNA,构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810,应用有荧光标记的非特异性小分子的siRNA检测转染效率,RT-PCR检测黏蛋白5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测黏蛋白5AC的表达;MTT检测细胞生长增殖情况;流式细胞仪分析细胞凋亡.结果:基因测序表明成功构建质粒;转染后荧光蛋白表达率28.57%;RT-PCR结果表明在mRNA水平,三个质粒都可抑制黏蛋白5AC基因的表达,并可使黏蛋白5AC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用,流式细胞仪分析结果使肿瘤细胞凋亡增加.结论:构建pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3质粒明显抑制了黏蛋白5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达,并可抑制肿瘤细胞的生长增殖和诱导其凋亡.

摘要：目的:系统评价超声内镜引导下细针穿刺活检(EUS-FNA)在胰腺实性占位定性诊断中的价值.方法:计算机检索MEDLINE、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、万方数据库、中国学术期刊全文等数据库,检索时间均为建库至2011-10.全面查找有关EUS-FNA诊断胰腺实性占位的文献,按照诊断试验的纳入标准筛选文献,提取纳入文献的特征信息(研究背景、设计信息和诊断参数信息),根据QUADAS质量评价标准纳入文献的质量.采用Meta-Disc1.4软件进行Meta分析,检验异质性,并根据异质性结果选择相应的效应模型.对纳入文献予以加权定量合并,计算汇总敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断优势比及其95%CI,绘制汇总受试者工作特征(SROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC).结果:共检索出相关文献280篇,按照文献纳入标准,最终纳入18篇文献(均为英文文献).EUS-FNA对胰腺实性占位定性诊断价值分别为:汇总敏感度为0.90[95%CI(0.89-0.92)],汇总特异度为0.95[95%CI(0.93-0.97)],汇总阳性似然比为13.56[95%CI(8.31-22.15)],汇总阴性似然比为0.12[95%CI(0.10-0.15)],汇总诊断优势比为143.62[95%CI(93.98-219.46)],SROC曲线下面积AUC为0.9711,Q*=0.9215.另外,本研究还对有无病理医生在场指导进行了亚组分析,发现有病理医生在场的AUC为0.9757,Q*=0.9295.且汇总诊断优势比173.37[95%CI(98.09-306.44)],明显较无病理医生在场的113.64[95%CI(60.22-214.46)]高.结论:经SROC曲线证实,EUS-FNA活检在胰腺实性占位定性诊断中具有较高的灵敏度和特异度,尤其是有病理医生在场指导的情况下,可作为临床上胰腺实性占位定性诊断的重要检查手段.