摘要：目的建立一种多重实时荧光定量PCR法,同时检测常见蜱传病原体嗜吞噬细胞无形体、伯氏疏螺旋体及斑点热群立克次体(SFGR)。方法针对各病原体的保守区序列设计特异性引物及TaqMan探针,建立并优化多重实时荧光定量PCR反应体系,评价方法的特异性、灵敏度、重复性及对蜱样本的检测准确性。结果建立的多重实时荧光定量PCR法检测嗜吞噬细胞无形体、伯氏疏螺旋体、SFGR,与大肠埃希菌、问号钩端螺旋体、布鲁氏菌等病原体间无交叉反应,特异性良好;灵敏度均达到102拷贝/μl,重复性变异系数均<2.00%;蜱样本检测中,多重实时荧光定量PCR法与单重实时荧光定量PCR法检测结果一致性为100%。结论研究建立的3种蜱传细菌性病原体多重实时荧光定量PCR法特异性好、灵敏度高,为蜱传病原体的检测提供了技术手段。

摘要：目的分析山东省低温暴露死亡风险的季节内差异。方法通过山东省疾病预防控制中心收集2013—2018年山东省的全人群死亡数据, 基本资料主要包括死亡日期、年龄、性别、受教育程度、死亡原因、家庭住址等;通过中国气象数据网同期逐日气象资料, 主要包括日平均温度(℃)、日平均相对湿度(%)等0.01°×0.01°经纬度的网格坐标数据。将冷季定义为11月至次年2月, 其中前两个月为早期冷季, 后两个月为晚期冷季, 极端低温定义为冷季温度范围中的P10。利用时间分层的病例交叉设计结合分布滞后非线性模型, 分析冷季的温度与死亡的关联以及不同滞后时间下极端低温与死亡的关联, 并比较冷季早期(11—12月)与晚期(1月至次年2月)的季节内差异。结果 2013—2018年山东省冷季四个月温度变化范围为(-17.3~18.6)℃, P10(即极端低温)为-13.7 ℃。冷季早期日均温度为(3.63±4.66)℃, 晚期日均温度为(-0.09±3.70)℃;冷季早期日均相对湿度为(63.89±14.75)%, 晚期日均相对湿度为(62.27±14.19)%。山东省2013—2018年冷季死亡1 473 300例, 其中男性824 601例(55.97%);年龄<65岁者349 824例(23.75%);死于循环系统疾病803 691例(54.55%), 死于呼吸系统疾病140 415例(9.53%)。分布滞后非线性模型模型分析结果显示, 以冷季最适温度18.6 ℃为参考, 冷季4个月极端低温的累积OR为1.74(95%CI:1.63, 1.86);冷季早期和晚期累积OR分别为1.50(95%CI:1.32, 1.71)、2.56(95%CI:2.12, 3.09)(P<0.001);滞后效应持续12 d。结论山东省冷季的低温暴露所致死亡风险存在季节内差异, 冷季晚期高于早期。

摘要：目的 应用聚合酶链反应(PCR)技术建立巴尔通体的检测鉴定方法并用于诊断临床疑似猫抓病合并双侧支气管肺炎患者。方法 根据16S～23S rRNA ITS基因序列较其他属细菌长,而且位于这段基因序列中的tRNA^(Ile)-tRNA^(Ala)基因间隔区具有高度变异性,tRNA^(Ile)和tRNA^(Ala)基因序列在巴尔通体属中完全保守,设计引物;同时应用文献发表的2对引物直接扩增1例临床可疑猫抓病患者全血基因组DNA。将研究设计引物的PCR产物直接测序,并进行序列分析。结果 3对引物扩增全血基因组DNA均获得巴尔通体特异基因片段,根据其中2对引物扩增产物大小与阳性对照不同,可初步确定样本与阳性对照菌株是不同巴尔通体;序列分析结果显示,研究设计引物TIle.455p-TAla.885n扩增产物核苷酸序列与中国云南省巴尔通体-分离株对应位置的序列相一致,同源性100％。结论 应用PCR技术从血液中直接扩增特异基因片段,可以快速检测巴尔通体感染;测序及序列分析结果进一步提供了此种致病巴尔通体在中国南北方均存在的线索。

摘要：【目的】应用TaqMan-MGB探针技术,建立具有种水平特异性、高敏感性的荧光定量PCR方法,用于快速检测文森巴尔通体博格霍夫亚种。【方法】在序列特异性扩增区标记(Sequence characterized amplifiedregion,SCAR)技术基础上,依据文森巴尔通体博格霍夫亚种一段特有的基因序列设计探针和引物,分别优化扩增反应的退火温度、探针和引物的反应浓度;分析此方法的特异性、敏感性及重复性;绘制标准曲线,评估PCR反应的扩增效率和稳定性。【结果】本研究设计的TaqMan-MGB探针具有种水平特异性;最低检出限为每个PCR反应11个拷贝;组内和组间的变异系数CV值分别为0.12%-0.70%和0.14%-0.55%,在允许范围内;标准曲线线性关系良好(R2=1),扩增效率高(E=104.7%)。【结论】本研究建立的基于TaqMan-MGB探针技术的荧光定量PCR方法能够在种水平特异性、高灵敏度检出文森巴尔通体博格霍夫亚种,为这种巴尔通体所引起的一系列疾病的早期快速诊断、监测和流行病学调查等研究提供有效手段。

摘要：我们现在的生活是越来越好了大家的居住水平也在逐年提高特别是我们的小区环境也越来越美丽了。可是我们身边的苍蝇蚊子却也不见得少．而且时不时的还能看到老鼠。它们给我们的生活带来了麻烦被人们通俗的称为“麻烦生物”。

摘要：目的研究黄胸鼠不同地理区域种群的遗传差异,用磁珠富集法筛选其微卫星位点。方法将黄胸鼠基因组DNA用限制性内切酶消化后的小片段与接头连接,再用生物素标记的(AC)15重复序列探针与酶切片段杂交,应用链霉素亲和磁珠捕获300～600bp含有微卫星序列的DNA片段,通过载体转化到JM109感受态细胞中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库,测序后设计引物并筛选。结果本次实验从约900个转化子中获得304个阳性克隆,对其中140个进行测序,并成功设计黄胸鼠微卫星引物13对。结论筛选出的13对微卫星引物多态性高,能稳定扩增出目标条带,可用于种群遗传研究。

摘要：目的通过深入访谈,了解重点流行地区(云南和广东省)登革热流行的影响因素和防控工作存在的不足,为当地登革热的防控提出针对性的建议。方法在我国云南和广东省登革热疫情严重的市(州)选择25名从事登革热防控研究、流行病学调查、治疗等方面的专业人员,用自行设计的访谈提纲逐一进行访谈,获得访谈资料电子文稿,将资料导入MAXQDA 2020软件,利用主题框架法进行分类、标记和分析,并制成表格。结果通过对访谈资料的分析,共得到一级主题4个:(1)登革热防控现状,即目前的防控策略和措施,归纳出4个归属于日常应对的措施,7个归属于登革热暴发时的应对策略和措施;(2)影响登革热防控的因素,气候因素有2个,社会因素有6个,其中,社会因素可以通过人为干预而控制登革热流行;(3)登革热防控工作中存在的问题,访谈资料显示,专家提到次数最多的是政府重视程度不够、财政投入不平衡不充分、群众参与度低、考核监督机制缺乏,其他存在问题有6个;(4)登革热应对关键点,此部分通过归纳总结,共提取出10个应对关键点。结论我国云南和广东省登革热重点流行地区应建立长效应对机制,发挥政府主导、多部门合作并全力调动当地居民参与防控的积极性,合理分配防控资金,加强媒介伊蚊控制,为我国登革热疾病可持续精准控制提供科学依据。

摘要：【目的】应用Taq Man探针实时荧光定量PCR技术建立特异性强、敏感性高和稳定性好的快速杆菌样巴尔通体检测方法。【方法】应用生物信息学方法查找杆菌样巴尔通体特有基因,从中筛选出一段特有的基因序列为模板设计探针和引物。通过比较Ct值和荧光强度确定扩增反应的最佳退火温度、探针和引物浓度;将扩增产物连接到p EASY-T载体上制备标准品,绘制标准曲线,分析扩增效率和线性关系;评估方法的特异性、敏感性及重复性。【结果】优化后退火温度为60°C,探针和引物浓度均为200 nmol/L,反应体系20μL。特异性实验显示只有杆菌样巴尔通体扩增出荧光信号,其他种属细菌均未见荧光信号;标准曲线线性关系良好(R2=1),扩增效率E=98.18%;最低检出限为每个PCR反应3个拷贝;组内和组间的变异系数CV值分别为0.21%–0.42%和0.29%–0.59%,在允许范围内。【结论】研究建立的实时荧光定量Taq Man-MGB探针法特异性强、灵敏度高、稳定性好,可快速检测鉴定杆菌样巴尔通体,为这种巴尔通体所引起的一系列疾病的早期快速诊断、监测和流行病学调查等研究提供有效手段。

摘要：目的分析病媒控制产品市场的采购情况,为病媒控制产品研发、市场需求及公共卫生决策提供依据。方法爬取发布在国家政府采购平台及各省、市级采购平台上的病媒控制产品招标公告和中标公告,并利用大数据的数据处理技术,对公告中的关键信息进行抽取和分析。结果分析结果显示,我国病媒控制产品的采购高峰为4、5月;公开招标和竞争性谈判/磋商为病媒控制产品的主要采购方式;爱国卫生运动委员会办公室及卫生和计划生育局等政府部门为主要采购方;病媒控制市场仍处于分散、均衡的竞争状态。结论研究和分析结果有助于决策部门和相关企业了解政府和企业的供需特点,并为未来病媒控制产品服务资源的配置、制度设计和宏观决策等提供参考。

摘要：目的通过研制相关标准规范,对国家重要生物安全监测数据进行处理整合。方法设计以数据为核心、基于数据自身特点的整合方案。结果在分析现有国家重要监测数据特征的基础上,基于时空特征、生物学特征对多元、多平台、多尺度及动态化的全国重要监测数据进行抽取、转换、清洗和整合,形成覆盖面广、结构与标准统一、内容完整的数据库。结论基于数据的时空特征和生物学特征的整合方案,可有效地整合国家重要监测数据,为构建国家重要生物安全监测数据查询及可视化平台建设提供有力的数据支持。