摘要：根据NCBI上报道的基因序列设计引物,以长野芽孢杆菌(Bacillus naganoensis)ATCC53909的染色体DNA为模板,PCR扩增普鲁兰酶编码基因pulB。将此基因与表达载体pWB980连接构建重组质粒pWB-pulB,并转化枯草芽孢杆菌WB600。SDS-PAGE结果显示,在100 kD处有特异性条带,经测定重组转化子粗酶液酶活力达10.94 U/mL。酶学性质分析表明,其最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0,且在温度30-60℃及pH4.0-6.0范围内稳定,适合淀粉加工行业的应用。

摘要：为了提高碱性果胶酶基因工程茵(pWB980-pel521/WB600)产酶能力,实验室在摇瓶条件下采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对产酶有重要影响的3个因素(豆饼粉、磷酸盐以及氯化钠的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果表明,摇瓶发酵培养基成分为:麸皮30.00 g/L(浸汁)、豆饼粉35.3345g/L、磷酸盐0.04552 mol/L、氯化钠4.2988g/L、氯化钙1.11g/L的条件下,碱性果胶酶基因工程菌产酶能力得到了显著提高,酶活力达到约760 U/mL,产酶能力比发酵优化前提高了3倍。

摘要：充分发挥课堂教学主渠道在高校思想政治工作中的作用,运用教学创新方法、创新方式,助力课程思政工作创新。我们在微生物学课程教学中,通过改革教学模式,采用大班授课小班辅导,注重过程考核,将理论教学与实验教学、创新实践紧密结合,以及挖掘典型教育案例、代表性人物励志故事、我国科技创新的事例等,将课程知识点与思政元素相结合。实践表明,改革后的课程教学培养了学生的自主学习能力,夯实了学生的专业基础,有效提升了教学效果和学生的科学素养,提高了学生的应用能力和综合素质,有助于增强学生的自信心和服务社会的责任感,增强学生的爱国主义情怀,能够实现知识传授、能力培养与价值引领的有机统一。

摘要：随着高等教育管理体制改革的进一步深化．21世纪教学内容和课程体系的改革．“创新精神和实践能力”的培养已经成为“新世纪素质教育”工程的重中之重．这就要求学生不仅要具有宽广和坚实的理论基础．而且要具备较强的创新意识和实际动手能力。作为实验教学、科学研究、技术开发和学术交流的重要场所，实验室是培养人才创新思维和创新能力的重要基地。根据教育部《普通高等学校教学水平评估指标体系》的要求，开设综合性、设计性的实验课程比例必须达到80％以上．这为实验室建设确立了明确的目标和方向。

摘要：将来源于Paenibacillus campinasensis G1-1的木聚糖酶编码基因成功整合到毕赤酵母GS115基因组上,构建了高产木聚糖酶XynG1-1的毕赤酵母工程菌。采用响应面法对该工程菌的发酵条件进行优化。首先使用Design-Expert软件进行Plackett Burman实验设计筛选出影响产酶量的3个主要因素,即甲醇含量、生物素含量和培养时间。在此基础上使用Design-Expert软件进行Box-Behnken实验设计,通过响应面分析得出优化的发酵培养条件为:甲醇含量2.28%,培养时间37.29 h,生物素4 mg/L,酵母粉20 g/L,蛋白胨20 g/L,YNB 30 g/L,装液量100 m L/L,转速250 r/min、温度28℃、磷酸缓冲液pH 6.0。经实验验证,优化后的培养条件下胞外重组酶活达到707.2 IU/m L,与响应面预测结果一致,较优化前木聚糖酶酶活提高了7.9倍,较原始菌株产酶量提高了19.8倍。经10 L发酵罐扩大培养之后,重组木聚糖酶的酶活达到2 703 IU/m L。因此,该研究有效提高了木聚糖酶XynG1-1的发酵产量,并且,该重组酶保持了良好的酶学性质,可为工业化生产及应用奠定基础。

摘要：在"互联网+教育"迅速发展背景下,微生物学线上线下混合式教学模式弥补了传统教学在教学方法和手段及考核方式等方面的不足,实现了优势互补,两线教学必将成为高校教学发展的主要方向。在混合教学模式建构下,微生物学课程应克服传统教学中不足,构建包括教学团队组建、课程设置及安排调整,教学知识体系重构、课程考核方式改变在内的线上线下混合教学模式,以提高学生课堂学习积极性,激发学生学习兴趣,培养学生创新思维。

摘要：结构岩棉金属面夹芯板因其具有质量轻、刚度大、隔热和隔声性能好及绿色环保等优点,被广泛应用于建筑外墙。为墙板安装方便,同时具有良好的室内感观,无檩体系墙面构造做法应运而生。从理论计算、承载力试验及工程实践3个方面阐述结构岩棉金属面夹芯板在无檩体系墙面中应用的可行性,并提出无檩体系墙面夹芯板设计注意事项。

摘要：以克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶(PRO)为研究对象,运用HotSpotWizard3.0设计了PRO在Gly97-Gly102loop区的突变库,筛选得到了胶原蛋白降解活力显著降低的G97E突变体.G97E突变体的碱性蛋白酶活力和胶原蛋白降解活力分别为野生型PRO的91.97%和65.84%;最适温度和最适pH分别为60℃和pH10.0;其稳定性相比于野生型PRO无显著差异.综上所述,本研究利用理性设计技术,获得了在碱性蛋白酶活力基本保持不变的情况下,胶原蛋白降解活力显著降低的G97E突变体,这个新酶品种的开发和工业化生产对于扩大PRO在皮革工业中的应用具有重要意义.

摘要：以玉米芯粉为基质富集培养牛粪中生物质降解菌系,提取该降解菌系的宏基因组DNA,并以其为模板,通过简并引物PCR扩增出200bp左右的木聚糖酶基因片段,选择与耐热木聚糖酶相似性最高且丰度最高的基因序列,应用mTAIL-PCR扩增得到1 059bp的基因全长序列(xynHAD4),编码352个氨基酸,经序列比对分析,该木聚糖酶(XynHAD4)属于典型的GH11家族木聚糖酶,与来源于Dictyoglomus thermophilum的xylanase229B相似度为93%。将xynHAD4连接于表达载体pET22b(+),在*** BL21中成功得到表达,表达产物经纯化后,测定其分子质量约为36kDa,最适作用温度和pH分别为80℃和6.0,该酶在90℃保温1h,残余酶活为72%,pH作用范围较广,在pH4.0保存1h,残余酶活为82%,可见,XynHAD4属于耐热木聚糖酶,并且在酸性条件下可保持较高稳定性,在食品、饲料等领域具有潜在的应用价值。

摘要：从牛粪堆肥中分离、筛选到1株产耐高温木聚糖酶的细菌NF1,经形态特征和16S rDNA序列分析,鉴定菌株NF1为类芽孢杆菌,命名为类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)NF1。采用响应面法对该菌种产木聚糖酶的发酵条件进行优化。首先利用Plackett Burman试验设计筛选出影响产酶量的3个主要因素,即牛肉膏浓度、NaCl浓度和初始pH值。在此基础上使用Design-Expert软件进行Box-Behnken试验设计,通过响应面分析得出菌株NF1发酵产酶的最佳条件为玉米芯20g/L、牛肉膏28.2g/L、K2HPO45g/L、MgSO40.5g/L、NaCl 7.1g/L、初始pH值为6.9;装液量40mL、转速160r/min、接种量2%、温度28℃。经过验证试验,优化后粗酶液酶活达到160.6IU/mL,与响应面预测结果一致,较优化前木聚糖酶酶活提高了51.4倍。