摘要：本研究旨在通过CRISPR/Cas9体外酶切法及细胞水平上的PCR扩增测序筛选出靶向食蟹猴NTCP基因具有高敲除活性的gRNA。首先通过比对食蟹猴与人类NTCP氨基酸序列,选择差异位点,即第84—87位和第157—165位氨基酸作为基因靶点序列区;利用gRNA软件设计针对上述基因靶点序列的gRNA,每个靶点设计3～4条候选gRNA序列;然后利用gRNA体外检测试剂盒,筛选出靶向NTCP基因的体外敲除活性较高的两条gRNA序列：gRNA1.2和gRNA2.1。将gRNA1.2和gRNA2.1分别插入pLV hUbC-Cas9-T2A-GFP载体中,转染食蟹猴原代肝细胞。提取转染后细胞基因组DNA,通过PCR扩增NTCP基因并将其克隆到T载体中进行测序分析。结果表明,gRNA1.2和gRNA2.1均可使NTCP基因产生移码突变,但gRNA2.1比gRNA1.2具有更高的敲除活性。本研究为下一步编辑食蟹猴NTCP基因及研究其在乙型肝炎病毒（HBV）感染中的功能奠定了基础。

摘要：为了获取低温保存蓝狐精液的最适稀释剂,试验设计了3种不同精液稀释剂配方,并与常用稀释剂进行对比,1组为对照组,2组为0.5×（G＋柠）组,3组为（G＋柠）组,4组为2×（G＋柠）组,G为葡萄糖,柠为柠檬酸钠溶液。分别在4℃存放0,12,24,36,48 h后检测精子活率。结果表明：在保存温度为4℃的情况下,存放0小时时,第4组的精子活率最高,与其他各组差异显著（P〈0.05）;存放12小时时,不同稀释剂的精子活率差异不显著（P〉0.05）;存放24小时时,第2组的精子活率最高,但与其他各组差异不显著（P〉0.05）;存放36小时时,第2组的精子活率最高,与第3组、第4组差异显著（P〈0.05）,与第1组差异不显著（P〉0.05）;存放48小时时,第2组的精子活率最高,与其他各组差异显著（P〈0.05）。

摘要：以波尔山羊以及波尔山羊与唐山奶山羊的杂交后代共计102只山羊为材料,根据山羊MSTN基因序列(GenBank登录号:DQ167575)设计一对引物,用PCR-RFLP法进行多态性分析。对该片段测序发现共有2处突变。对突变位点产生的不同基因型与体重进行分析表明:AA型个体的断乳重显著高于BB型和AB型(P<0 05)。CC型个体的初生重显著高于CD型(P<0 05)。由此初步推断MSTN基因可能是影响山羊体重性状的主基因或与主基因相连锁,可以用该位点对山羊体重性状进行标记辅助选择。

摘要：为探明山羊MyoG基因的启动子序列与结构及转录调控机制,本研究设计了1对引物,采用PCR扩增、测序以及序列比对分析,从波尔山羊基因组中扩增出一段长度为969bp的山羊MyoG基因的5′侧翼序列,其GC含量为50.6%。经过生物信息学分析,确定了其转录起始位点及活性区域;发现在转录起始位点上游-24bp处存在1个TATA-box,另外还发现了1个GC-box、2个CAAT-box、2个E-box和1个富含A-T碱基的模体结构;该序列还包含HSF、ADR1和cap等转录因子结合位点。通过比对分析,所得山羊MyoG基因5′侧翼序列与牛、马鹿、人、小鼠和鸡同源序列的相似性在37.22%～96.85%之间,说明不同物种间该序列具有一定的保守性。本研究为进一步探讨山羊MyoG基因的表达和调控机制奠定了理论基础。

摘要：为了对北极狐小眼畸形相关转录因子（MITF）基因启动子进行预测及对转录因子进行分析,以家犬MITF基因序列为参考,设计引物并利用PCR扩增获得北极狐MITF基因启动子区,通过TSSW和TSSG等软件对北极狐MITF基因启动子、转录因子等进行预测和分析。结果表明：北极狐MITF基因的-2 154 bp处为候选启动子区,核心启动子区在-242--193 bp处,转录起始位点在-202 bp处;北极狐MITF基因的启动子区无CpG岛,结构较为简单,无甲基化现象,但存在与毛色有关的Sp1、CREB和ATF等转录因子,推测这些转录因子可能影响北极狐毛色的代谢通路。

摘要：依据猪趴卧、采食、排便占据舍内不同区域和寻求温热舒适位置趴卧的生物学习性，在各种简易保温猪舍的设计基础上，改单一猪舍为母猪及肥猪联合猪舍，并将猪舍外围护墙（北墙）和猪床改造成空心结构，内填充保温材料，以提高猪舍的保温性能。为防止潮湿和有害气体的增加，在塑料棚上方前檐下设换气窗，使舍内形成通过换气量可以控制温热状态的小气候。加强了猪床及围护结构的隔热性能。在北墙设有防暑通风窗。越冬时在运动场上方扣双层塑料棚。每单元舍内净面积２２ｍ２，可同时饲养６～８头育肥猪和１头带仔哺乳母猪。适合我国北方地区中小养猪场及养猪专业户养猪使用。

摘要：对庭院模式化保温猪舍进行了 4年中间试验。结果表明 :围护结构和猪床采用保温隔热设计满足了使用要求 ,冬季窝内温暖干燥 ,气温和气湿分别为 9 84℃和 70 9% ,夏季舍内外温差 3℃以内。育肥猪全年平均日增重约为 6 43 6 5g。通风换气系统性能可靠 ,有效地排除水汽和有害气体 ,氨、硫化氢和二氧化碳的体积分数各为 6 9cm3 /m3 、5 34cm3 /m3 和 0 0 0 31m3 /m3 。猪舍布局合理 。

摘要：为了对罗斯308(Ls308)肉鸡白细胞介素2(IL-2)基因进行生物信息学分析,试验根据GenBank中已登录的鸡IL-2 mRNA基因序列,设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法成功克隆Ls308肉鸡的IL-2基因。结果表明:Ls308肉鸡IL-2基因CDS区全长为432 bp,含有1个432 bp开放阅读框(ORF),编码143个氨基酸,该基因序列与Gen Bank中登录的鸡、丝毛鸡、印度肉鸡、来航鸡、野猪、狼、猫、牛、人、羊的IL-2核苷酸序列同源性分别为97.2%、99.8%、98.6%、100%、27.5%、31.7%、27.8%、30.3%、30.3%、30.3%,与其氨基酸序列同源性分别为98.6%、99.3%、97.9%、100%、10.5%、10.5%、9.1%、8.4%、10.5%、8.4%。该蛋白理化性质分析结果表明,该蛋白分子质量为16 429 ku,理论等电点(PI)为5.66,分子式为C728H1178N184O225S10,由20种常见氨基酸组成,其中带负电荷的氨基酸(Asp+Glu)占14.0%,带正电荷的氨基酸(Arg+Lys)占11.9%。该蛋白的半衰期为30 h,不稳定系数为41.70,为不稳定蛋白;该蛋白脂溶性为92.03,平均亲水指数为-0.294,该蛋白为亲水蛋白。信号肽预测结果表明,该蛋白N端有信号肽,信号肽位置为前22个氨基酸,说明其分泌蛋白;跨膜区预测结果表明,该蛋白含有一个跨膜区域,预测其为跨膜蛋白;二级结构中以α螺旋和无规则卷曲为主,延伸链和β转角只是在局部出现;三级结构与二级结构预测结果一致,亚细胞定位显示该蛋白可能主要在细胞膜上发挥作用。