摘要：为利用大肠埃希菌表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白特异性纳米抗体,并对其抗原结合活性进行鉴定,以Cap蛋白特异性纳米抗体基因(vhh cap)序列为模板,利用Primer 5.0软件设计一对通用vhh cap特异性扩增引物,通过PCR方法扩增vhh cap基因片段,经双酶切处理后分别克隆到pCold-SUMO和pET-32a(+)载体上,转化宿主菌*** BL21(DE3),使用IPTG进行诱导表达,表达产物通过Ni 2+亲和层析柱进行纯化,经SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,同时使用ELISA方法对两种载体表达的纳米抗体ELISA效价进行检测和对比分析。SDS-PAGE结果显示pCold-SUMO和pET-32a(+)载体均能实现VHH cap纳米抗体重组蛋白的原核可溶性表达,Western blotting表明纳米抗体重组蛋白可通过6×His-Tag进行检测;ELISA结果显示pCold-SUMO载体表达的纳米抗体重组蛋白效价为1∶500,ELISA效价明显高于pET-32a(+)载体表达产物。PCV2 Cap特异性纳米抗体成功表达为PCV2检测及治疗用新型的抗体开发奠定了基础。

摘要：目的应用比较蛋白质组学方法分析并鉴定脑梗死肝阳化风证和阴虚生风证的相关蛋白质,探讨中医肝阳化风证及阴虚生风证的本质内涵。方法设计选择脑梗死肝阳化风证、阴虚生风证患者及健康人各15例,提取外周静脉血淋巴细胞总蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuest V7.3.1软件比较分析3组双向凝胶电泳图谱并识别差异表达蛋白质,对有意义的蛋白进行质谱分析和数据库检索鉴定。结果经比较分析,发现肝阳化风证组与阴虚生风证组差异蛋白质点23个,鉴定出22个共15种蛋白质,相同表达蛋白质点8个,鉴定出6个蛋白质点共5种蛋白质。包括代谢酶类、信号传导蛋白、细胞骨架蛋白、抗氧化蛋白等多类蛋白质表达异常。结论脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证具有相同蛋白和差异蛋白,提示二者具有相同的物质基础和不同的本质内涵。

摘要：为利用大肠埃希菌表达猪链球菌Ide通用截短蛋白,通过对Gen Bank公布的Ide S蛋白家族基因同源性分析,使用Primer 5.0软件设计一对特异性引物,以猪链球菌2型强毒株JZLQ全基因组为模板,采用PCR方法扩增Ide基因截短片段,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后将目的片段分别克隆到p ET28a、p ET32a和p ET-sumo表达载体上,分别转化宿主菌*** BL21(DE3)。通过优化诱导温度及诱导剂IPTG浓度进行表达并对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,PCR扩增片段大小约为1200 bp,经双酶切和测序验证构建正确;三种重组表达载体转化大肠埃希菌后均有目的蛋白表达,但不同表达条件下目的蛋白表达量存在差异,其中p ET28a-Tr Ide重组表达载体用25℃诱导、IPTG终浓度为1 mmol/L时可实现重组蛋白的高效可溶性表达,为IdeSsuis蛋白在猪链球菌通用疫苗研发方面的研究奠定了基础。

摘要：油气矿业权是依法进行油气资源勘探和开发的先决条件,是油公司的核心资产。而油气储量作为矿业权价值的体现是核心资产的核心资产,因此摸清油气储量地下分布和有效的管理这些核心资产则变得尤为重要。本文以MAPGIS空间数据三维建模为关键技术,将构建油气储量三维模型所需的等高线、相对厚度和等厚图整理入库,并利用空间数据三维建模技术将各类数据构建成三维图形,建立油气田储量范围三维建模软件,摸清油气储量地下分布,有效支持今后的油气勘探开发工作;本文将从系统分析设计、实现与部署等方面来介绍该系统的研发。