摘要：本实验运用PCR-SSCP技术对大白猪TLR4基因外显子1遗传变异进行分析,同时利用ELISA方法对外周血重要细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IFN-Beta、IL-10、IL-12)的水平进行测定,旨在分析大白猪TLR4基因外显子1多态性及其与重要细胞因子水平间的关系,探讨将其作为抗F18大肠杆菌病遗传标记的可行性。结果表明:大白猪TLR4基因外显子1存在G93C同义突变位点,共检测到3种基因型,分别定义为BB、BC和CC;关联分析结果表明,大白猪TLR4外显子1变异位点对机体重要细胞因子水平没有显著影响(P>0.05),表明基于该位点的分子选育不会对机体免疫应答和一般抗病力产生不利影响。结果提示,有必要将TLR4基因外显子1的变异位点作为抗大肠杆菌病的重要遗传标记进行深入研究。

摘要：本研究旨在构建并筛选猪(Sus scrofa)BPI基因的高效siRNA干扰载体,为在细胞水平上研究猪BPI基因的功能和作用机制提供基础。参照猪BPI基因(GenBank登录号:EF436278)全长编码区序列,设计其特异性发夹siRNA干扰片段,并将其克隆插入pcDNA 6.2-GW/EmGFPmiR干扰载体中,构建猪BPI基因4个干扰siRNA表达载体RB1、RB2、RB3和RB4,1个阴性对照NC,并通过PCR和测序进行验证,构建成功后转染猪小肠上皮细胞IPEC-J2并检测其干扰效率。结果发现,所构建的4个特异性siRNA载体均可显著降低猪BPI基因mRNA表达(P<0.05),其中RB4载体干扰效果最好,其干扰效率达到69%。本研究成功筛选可靶向干扰猪BPI基因的高效siRNA,为今后在细胞水平进一步研究BPI基因对猪肠道革兰阴性菌感染抗性的作用及其机制奠定了试验基础。

摘要：本试验以98头苏太猪为研究对象,检测BPI基因部分编码区的单核苷酸多态性(SNPs),并预测分析碱基突变对BPI蛋白结构和功能的影响。利用PCR-SSCP和PCR-RFLP结合测序的方法检测BPI基因外显子1、4和10的SNPs,运用生物信息学比较分析原蛋白和突变型蛋白的理化性质和结构。结果表明,以BPI基因cDNA序列作为参照,BPI外显子1、4和10存在6个SNPs,3个同义突变(c.24A>G、c.54T>C和c.522C>T)和3个错义突变(c.433C>T(Arg145Trp)、c.1060A>G(Thr354Ala)和c.1151T>G(Leu384Arg))。3种错义突变未改变BPI蛋白的理化性质、信号肽、跨膜区、糖基化位点以及二、三级结构,但是导致磷酸化位点的改变或存在其他潜在功能位点区域。Western blot试验发现,BPI蛋白的分子量为53ku,苏太猪F18大肠杆菌抗性型猪的BPI蛋白表达量显著高于敏感型猪。猪BPI外显子4和10的碱基突变不同程度影响到蛋白功能,并可能对机体疾病的抗性/易感性产生影响。

摘要：本研究旨在分析CD14基因在大白猪F18大肠杆菌耐受型和敏感型个体间的mRNA表达差异,以探讨CD14基因在断奶仔猪抗F18大肠杆菌中发挥的潜在作用。挑选大白猪耐受型和敏感型个体各4头,通过利用Real-time PCR方法比较分析CD14基因在个体各组织间的表达规律。结果表明:CD14基因在大白猪耐受型和敏感型个体各组织间的表达趋势有着高度的一致性,其中CD14基因在肝中呈现高水平表达,在肺、肾和淋巴结中呈现中度表达,而在其他组织中的表达水平都非常低,CD14基因在耐受型个体各组织间的表达水平几乎都高于敏感组,其中CD14基因表达量在空肠组织中差异达到极显著水平(P<0.01)。由此推测,CD14基因对*** F18抗性的调节可能不是通过直接作为F18大肠杆菌的受体来实现,而是通过参与并调节机体的免疫反应来实现的,并且CD14基因的上调可能与F18大肠杆菌的抗性存在一定的联系。

摘要：本实验运用Real-time PCR方法检测分析α-(1,2)岩藻糖转移酶1(FUT1)和α-(1,2)岩藻糖转移酶2(FUT2)基因在大肠杆菌(***)F18ab、F18ac感染以及内毒素(LPS)诱导小肠上皮细胞(IPEC-J2)前后的mRNA表达差异,在细胞水平上进一步验证FUT1、FUT2基因的功能并探讨其在抗*** F18侵染过程中的作用机制。结果表明:FUT1、FUT2基因在***感染和LPS诱导细胞后的mRNA表达水平均极显著升高(P<0.01),且FUT2基因的上升趋势要高于FUT1基因。由此推测,FUT1和FUT2基因的表达水平与仔猪抵抗*** F18感染的能力密切相关,FUT2基因可能发挥着比FUT1基因更重要的调控作用。

摘要：研究报道MUC13基因第2内含子的插入／缺失突变与ETEC F4导致的仔猪腹泻病密切相关，但该突变位点是否会对基因表达和经济性状（如一般抗痛力、生产性状及繁殖性能等）造成影响还有待评估。本试验通过PCR方法检测大白猪群体中该突变位点的多态性，并分析其对大白猪MUC13基因mRNA表达水平、部分重要细胞因子水平（IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IFN—γ、TGF-β；及TNF—α）、生产性状及繁殖性能的影响，以探究将该位点作为抗性遗传标记应用于抗病育种实践的可行性。结果表明：该位点在大白猪群体中存在3种基因型；不同基因型个体间组织inRNA表达水平、重要细胞因子水平、生产性状及1～4胎繁殖性能（总产仔数、产活仔数和断奶仔猪数）差异均不显著（P〉0．05）。综上所述，将MUC13基因第2内含子插入／缺失突变作为大白猪抗性遗传标记进行分子选育时，不会对机体基因表达和重要经济性状造成显著影响。本研究为将该突变位点作为大白猪抗仔猪腹泻分子选育遗传标记的可靠性提供了一定的理论依据。

摘要：已有大量研究将猪MUC4基因第17内含子243位点作为ETEC F4ab/F4ac抗性的重要遗传标记,本研究采用PCR-RFLP方法检测138头大白猪MUC4基因第17内含子243位点多态性,利用RT-PCR检测不同基因型个体的组织mRNA表达水平,同时测定部分重要细胞因子(IIL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、TGF-β及TNF-α)的水平,旨在分析该位点对基因表达和重要细胞因子水平的影响,为下一步将该位点作为遗传标记用于分子选育提供指导和依据。结果表明:在大白猪群体中检测到3种基因型,分别定义为AA、AG、GG基因型,基因型频率分别为0.42、0.46、0.12。MUC4基因在11个组织中均有表达,其中心脏、肺和肾脏中表达量较高;GG基因型个体在各个组织中MUC4基因mRNA表达水平普遍高于AA和AG基因型个体。GG基因型个体IL-8、IL-10水平显著高于AA和AG型个体(P<0.05),其他细胞因子3种基因型个体间差异不显著。结果提示,将MUC4基因第17内含子243位点变异作为潜在的重要遗传标记用于大白猪的分子选育,不仅会提高断奶仔猪对ETEC F4的抗性,在一定程度上还能提高机体的一般抗病力。

摘要：东串猪作为我国优良地方猪品种,测定其纯种及其与杜洛克杂交猪的生长性能、屠宰性能及血清生化指标,对于下一步的保种和开发利用具有十分重要的意义。本试验分别选取体质量约50 kg、体况相近的健康东串猪和杜洛克×东串猪(杜东猪)各32头(公母各半),换料期3 d,饲养期80 d,按照猪场管理要求正常饲养,并测定生长性能、屠宰性能及血清生化指标。结果显示,杜东猪较东串猪的平均日增质量高出89.52 g,平均日采食量高出569.31 g;杜东猪的屠宰率、后腿比例和瘦肉率分别较东串猪高出9.15、2.36、3.80百分点;东串猪的谷草转氨酶、总蛋白、球蛋白和乳酸脱氢酶含量显著性高于杜东猪(P<0.05)。试验结果表明,东串猪与杜洛克的杂交后代生产性能有很大的改善,但对肉质和环境适应性会有一定程度的影响。杜东猪的生长性能、屠宰性能和肉品质在中国地方猪种二元杂交猪中处于中等水平,今后还需要进一步加强东串猪的纯种选育以及杂交配套工作。

摘要：本研究旨在对猪杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)基因的多态性进行系统分析,为今后探讨猪BPI基因与疾病抗性的关系提供理论依据。采用PCR-RFLP方法对野猪和国内外10个猪品种BPI基因第10外显子HpaⅡ遗传变异进行检测及序列分析。结果表明:11个猪品种中共检测到AA、BB和AB 3种基因型,2个等位基因,其中野猪、藏猪、荣昌猪和淮猪群体中AA基因型为优势基因型,A等位基因为优势等位基因;外来商业化猪品种中,杜洛克群体AA基因型频率较高。序列分析表明AA基因型与GenBank中的序列一致,BB基因型存在A27G同义突变位点和T118G错义突变位点。基于BPI基因的等位基因频率构建11个猪群体的系统发生树,第1类群包括野猪、淮猪、藏猪、荣昌猪、杜洛克;第2类包括约克夏、长白猪、枫泾猪、梅山猪、二花脸、苏太猪。本研究结果显示,猪群体间基于BPI基因多态性上存在的差异与体型、生产类型及地理分布等因素没有显著的联系。

摘要：本研究采用PCR-RFLP方法对梅山猪Mx1基因第14外显子Hin6 I酶切位点多态性进行分析,同时对机体部分重要细胞因子(IFN-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-10和IL-12)水平以及早期生长性能(初生重、20日龄重以及40日龄重)进行测定,进一步分析梅山猪Mx1基因第14外显子多态性与细胞因子水平和早期生长性能间的关系,探讨将该酶切位点标记运用于梅山猪抗病育种实践的可行性。结果表明:梅山猪Mx1基因第14外显子Hin6 I酶切位点存在G36T突变,共检测到3种基因型,分别定义为AA、AB和BB。关联分析结果表明,AA基因型个体的IFN-γ水平显著高于AB基因型个体(P0.05);3种基因型个体间其他细胞因子水平以及对应的早期生长性能间差异不显著(P>0.05)。结果提示,针对梅山猪群体Mx1基因Hin6 I酶切位点的分子选育可能会在一定程度提高机体的抗病毒能力,而不会对机体一般抗病力和生长发育产生不利影响。