摘要：为提高变速器直驱式电磁阀的控制性能,开发了一测试系统,采用先进的传感器技术和控制技术,模拟直驱式电磁阀恶劣的实际工作环境。大量测试获得的数据表明,该系统的测试精度、稳定性和重复性与再现性满足测试的性能指标要求,为直驱式电磁阀的开发提供了准确的测试数据。

摘要：目的构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepa1-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定。用Lipofectamine脂质体将构建的重组载体转染293肿瘤细胞,检测AFP蛋白在293细胞中的表达情况。结果成功克隆了mAFP基因编码区全长序列,构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,脂质体转染后可检测到mAFP基因在293细胞中的表达。结论该研究成功构建了重组pcDNA3.1-mAFP真核表达载体,为进一步开展原发性肝癌的靶向性基因治疗奠定了基础。

摘要：目的构建表达小鼠甲胎蛋白(murine alpha fetoprotein,mAFP)基因的重组腺病毒载体pAd-BM5-GFP-mAFP,并测定其滴度。方法从Hepa1-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增mAFP基因,测序确认后,插入到pAdBM5-GFP穿梭载体中,双酶切鉴定重组腺病毒载体。线性化重组腺病毒载体与病毒骨架DNA质粒用磷酸钙共沉淀法共转染HEK293A细胞,通过同源重组使腺病毒表达mAFP基因,并在HEK293A细胞中大量扩增含目的基因的重组腺病毒,用TCID50法测定重组腺病毒滴度。结果成功克隆了小鼠mAFP基因,构建出表达mAFP基因的重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-mAFP,获得了表达mAFP基因的重组腺病毒,病毒滴度达3.2×108PFU/ml。结论本研究成功构建了pAdBM5-GFP-mAFP载体,获得了高滴度表达mAFP基因的重组腺病毒,为进一步开展肝癌的免疫基因治疗奠定了基础。

摘要：为提高汽车燃油通风阀的控制性能,开发了一套基于PLC控制器的流量检测系统。通过对燃油通风阀流量检测特性及功能需求进行分析,选择了利用层流管作为系统的流量检测元件,提出了系统基于PID调节的整体控制方案,同时对系统所涉及的关键性技术进行了研究,包括工件两端压差调控技术、数据存储技术等。最终生产表明检测系统功能完善,所得测试结果稳定可靠,为燃油通风阀的开发提供了试验论证和保障。

摘要：目的:通过HBx基因的克隆、序列对比和进化树分析以及pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,为进一步研究HBx基因与肝癌发生发展的关系打下基础。方法:用O liga6.0结合P rim er P rem ier 5.0软件设计特异性引物,通过PCR方法从广西HB sA g阳性病人血清中(血清型A drq+)分离得到的病毒株构建的HBxA g质粒中扩增HBx基因。用DNA star5.01和V ector NT I Su ite 8.0软件进行序列对比分析和进化树构建。经双酶切将HBx基因定向插入到pcDNA 3.1(+)质粒中。结果:成功克隆了基因型C型突变型HBx基因,并构建出真核表达载体pcDNA 3.1(+)-HBx。新基因被G eneB ank接受,在G eneB ank上登录号为AY 839630。序列对比和进化树分析表明,新克隆的基因与野生基因型C型有高度的同源性(97.8%),2.2%的变异。结论:从广西HB sA g阳性病人病毒株(血清型A drq+)中发现了新的基因型C型突变型HBx基因(m u tan t genotype C)。pcDNA 3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,将为进一步研究HBx基因在树实验性肝癌诱发过程中所起的作用打下基础。

摘要：目的:构建重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-hIL-2,并测定病毒滴度。方法:从Jurkat细胞中提取mRNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增hIL-2基因全编码区序列。将测序正确的片段用BglII和PmeI双酶切定向插入到pAdBM5-GFP腺病毒载体中。通过磷酸钙共沉淀法将线性化重组质粒和腺病毒骨架共转染HEK293A细胞,扩增纯化重组腺病毒,TCID50法测定重组腺病毒滴度。结果:成功构建出表达hIL-2基因的重组腺病毒载体(pAdBM5-GFP-hIL-2),获得了高滴度表达hIL-2基因的重组腺病毒。结论:重组腺病毒表达载体(pAdBM5-GFP-hIL-2)的成功构建及重组腺病毒的获得有利于进一步开展肝癌的转基因治疗研究。

摘要：目的克隆人白细胞介素2基因（hIL-2），构建其重组穿梭载体pAdBM5-GFP—hIL-2。方法：应用PHA体外刺激培养的Jurkat细胞以促进hIL-2基因表达．设计特异性引物，应用RT—PCR法扩增hIL-2基因。将测序正确的片段用PmeⅠ和BglⅡ双酶切定向插入到pAdBM5-GFP穿梭载体中，酶切鉴定。结果：RT—PCR方法，成功克隆了hIL-2基因，并构建出pAdBM5-GFP-hIL-2真核表达载体．克隆的hIL-2序列全长528bp，含462个碱基开放读框．结论；构建含人白细胞介素2基因片段的重组腺病毒表达载体（pAdBM5-GFP—hIL-2），为下一步扩增重组腺病毒开展肝癌的免疫与基因治疗研究奠定基础．