摘要：研究以牛的泌尿系统为例设计并制作立体书式解剖学教具并采用访谈的方法对立体书的使用进行反馈调查。结果表明:立体书式解剖学教具设计制作简便,能够有效提高学生阅读兴趣,有助于学生学习。制作的兽医解剖立体书将复杂的解剖知识转化成直观的图像,能够在有限空间内创造出符合形式美感的知识构架,是一种可行的有发展前景的教具材料。

摘要：旨在建立一种针对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的敏感性高、特异性强的快速临床诊断方法。以猪流行性腹泻病毒cDNA为模板,在重组酶和聚合酶的共同作用下实现对目的基因的扩增,本研究设计了用于重组酶聚合酶扩增的引物,优化了重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)反应体系,检测了反应的特异性和敏感性,确定了反应的最佳温度和时间,通过结合琼脂糖凝胶电泳和侧流层析试纸条的方法进行分析和鉴定。试验结果显示反应的最佳温度和时间为30℃、20 min,反应可以检测到的最低质粒拷贝数为102 copies·μL^(-1),且在对猪的丁型冠状病毒、传染性胃肠炎病毒、轮状病毒和圆环病毒2型的检测中具有良好的特异性。综上所述,通过对RPA反应条件的摸索与优化,成功建立了猪流行性腹泻病毒重组酶聚合酶扩增结合琼脂糖凝胶电泳(Basic RPA)和侧流层析试纸条(LF-RPA)的检测方法,两种方法相比较于RT-PCR,有更短的检测时间且具有更高的敏感性,对仪器、场地和检测环境的要求更低,为今后PEDV的临床诊断及快速检测提供了更多的选择和更有效的技术支持。

摘要：为从东北地区腹泻仔猪粪便样品中分离猪萨佩罗病毒(PSV)流行株,本研究采集2020年~2022年东北地区不同猪场仔猪腹泻粪便样品,首先利用PSV特异性的RT-PCR方法对临床样品初步检测,将RT-PCR检测为PSV阳性样品接种PK-15细胞进行病毒分离并传至30代,然后将第30代病毒经PCR和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,采用Reed-Muench法测30代分离病毒的TCID50及全基因组序列分析,最后将分离病毒经口服5 mL(10^(7.386)TCID_(50)/0.1 mL)感染3日龄仔猪进行致病性分析。结果显示,在采集的95份样品中有17份样品在624 bp左右出现目的条带,将PSV阳性粪便样品接种PK-15细胞,结果有1份样品于接种后24 h细胞出现变圆、皱缩和脱落等PSV特征性细胞病变,表明分离到1株PSV,将其命名为HLJ 2204株;病毒蚀斑纯化后的30代病毒效价为107.386TCID50/0.1 mL;HLJ 2204株基因组全长7306 bp,同源性分析结果显示其与GenBank中PSV基因组核苷酸的相似性为84.3%~91.5%,系统发育树结果显示,HLJ 2204株与上海流行株SHCM2019处于同一分支,亲缘关系最近。HLJ 2204株经口服感染3日龄仔猪进行致病性研究,结果发现仔猪感染后24 h出现腹泻、体重减轻、精神亢奋等症状,肠道、肺脏以及脑组织出现不同程度的剖检病变,肠黏膜上皮细胞脱落,黏膜下层明显水肿;脑组织神经元变形、神经细胞空泡化、神经纤突变短。感染组仔猪在感染后4 d粪便病毒载量最高,病毒主要分布在肠道组织。综上,本实验成功分离获得了PSV HLJ 2204株,并分析了其全基因组序列特征及致病性,对深入了解黑龙江地区猪病毒性腹泻的流行及防控具有重要意义,并进一步丰富了PSV病毒库,为开发设计新型疫苗奠定了基础。