摘要：目的 PIWIL1基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞增殖活性的影响,为乳腺癌的基因诊断和治疗提供理论依据。方法针对PIWIL1 mRNA序列设计合成siRNA并筛选最佳siRNA,构建pGCsilencer^(TM)H1/GFP/Neo/PIWIL1 RNAi和pGCsilencer^(TM)H1/GFP/Neo/Non RNAi重组质粒;将重组质粒导入乳腺癌MCF-7细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株;实验分为脂质体对照组、阴性质粒转染对照组(阴性对照组)及PIWIL1-shRNA重组质粒转染组(PIWIL1-shRNA组),实时荧光定量PCR法检测PIWIL1 mRNA表达水平的变化,Western blot检测细胞中PIWIL1蛋白表达,CCK-8检测干扰质粒对MCF-7细胞增殖活性的影响。结果荧光显微镜检测显示稳定表达重组质粒pGCsilencer^(TM)H1/GFP/Neo/PIWIL1 RNAi的乳腺癌MCF-7细胞株筛选成功,其PIWIL1 mRNA抑制率(74%)明显高于阴性对照组(5.4%),PIWIL1-shRNA组细胞PIWIL1蛋白表达水平显著低于脂质体对照组和阴性对照组细胞,MCF-7细胞增殖活性显著低于阴性对照组和脂质体对照组差异具有统计学意义(P <0.05)。结论重组质粒pGCsilencer^(TM)H1/GFP/Neo/PIWIL1 RNAi可抑制乳腺癌细胞中PIWIL1基因的表达,进而降低细胞活性。