摘要：目的 探讨三维重建术前规划对腹腔镜超声引导下肝癌射频消融术的意义.方法 2014年1月至2015年12月解放军总医院肝胆外科连续对32例肝癌患者的肝脏进行三维重建,并根据三维重建模型进行术前规划,以指导腹腔镜下射频消融术（LRFA）（3D-LRFA组）;按照1：2的比例配对同期开展的未经术前三维重建规划的腹腔镜超声引导下LRFA的64例患者资料（LRFA组）.采用多层螺旋CT对3D-LRFA组患者进行肝胆胰平扫＋三期增强扫描检查,通过IQQA（R）-Liver肝脏评估和介入治疗计划辅助系统完成肝脏三维重建图像.测量三维重建系统中肿瘤的最大径和范围,选择合适的射频针型号（长度和射频长轴径）和针数,模拟射频效果和范围,规划设计合理的针道,设计引导射频针进针的腹腔镜超声探查角度、模拟超声探查融合图像.收集两组患者术中及术后数据,两组资料之间计量资料的比较采用t检验或秩和检验,计数资料采用x2检验或Fisher确切概率法分析.患者的肿瘤复发和生存情况用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,行Log-rank （Mantel-Cox）检验.结果 与LRFA组[（216.8 ±66.2）min、（389.1±183.4）s]相比,3D-LRFA组的手术时间[（173.3±59.4） min]和进针时间[（242.2±90.8）s]均明显缩短（t=-3.138,P=0.002;t=-2.340,P=0.021）.两组术中出血量（P =0.170）、首次消融符合率（P =0.871）、术后Clavien-Dindo Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ级并发症发生率（P=0.181）的差异均无统计学意义.3D-LRFA组术后住院时间[（4.3±3.1）d]较LRFA组[（6.3±3.9）d]短（t=-2.527,P=0.013）、术后ALT变化程度[（285±102） U/L]较LRFA组[（330±102） U/L]小（t=-2.038,P=0.044）、术后肿瘤坏死因子-α水平[（139 ±43） ng/L]较LRFA组[（167 ±64） ng/L]低（t=-2.233,P=0.028）.两组患者的无瘤生存期的差异有统计学意义（x2=4.049,P=0.044）.3D-LRFA组和LRFA组患者12个月无瘤生存率分别为77.6％和65.7％,LRFA组患者中位无瘤生存期为16.0个月,而3D-LRFA组大于24.0个月.结论基于患者真实影像信息的肝脏重建模型可在术前模拟患者肿瘤位置、重要管道结构、规划手术治疗的方案,节省LRFA术中进针时间、缩短手术时间、缩短平均住院日、延长无瘤生存时间.

摘要：目的了解乙型肝炎病毒(HBV)X基因在HBV相关肝病肝移植受体术后外周单个核细胞(PBMC)和骨髓CD34+细胞内的整合情况及其对乙肝疫苗接种的影响。方法采集1999年6月-2005年11月25例HBV相关肝病肝移植受体的外周静脉血及其中23例的骨髓血,以密度梯度离心结合单克隆免疫磁珠分离法获取外周血单个核细胞及骨髓CD34+细胞后,提取细胞DNA。因HBV X基因的整合频率最高,设计HBV X基因的特异引物,进行HBV-Alu-PCR,终产物进行电泳并回收、连接载体、筛选扩增后测序,检测有无X基因整合。结果经PCR后电泳及测序分析,25例HBV相关肝病肝移植受体术后的PBMC内未检测出HBV X基因的整合,其中采集到骨髓标本的23例CD34+细胞中亦未检测到HBV X基因的整合。结论肝移植术后受体体内HBV微生态的剧烈改变,使HBV整合的基本条件丧失,在此情况下,外周免疫细胞及骨髓造血干/祖细胞不是发生HBV整合的适宜场所,乙肝疫苗接种效果与HBV X基因整合关系不明确。

摘要：目的建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）荧光定量聚合酶链反应（荧光定量PCR）。方法设计检测HBVDNA（tDNA）和cccDNA特异性引物及探针，用3．44×10^0～3．44×10^9copies／pl含HBV全基因组序列（C基因型）质粒作为标准品，建立荧光定量PCR检测标准曲线。取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本，验证该法灵敏度和特异度。提取肝组织中DNA，取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶（PSAD）酶切；另一部分不酶切作为tDNA和β—globin检测样本，分别进行HBV cccDNA、tDNA和β—globin定量检测，以β-globin为参比，对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化。结果检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3．44×10^0～3．44×10^9copies／μl。检测HBV cccDNA和HBVDNA下限均为3．44×10^0copies／μl。33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0．003copies／cell和0．031 copies／cell；检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性。应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性，提高cccDNA检测法特异度达7．24×10^2倍。对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次，Ct值的变异系数为0．224％-0．609％。结论该方法灵敏度和特异度高，重复性好，可用于检测肝组织中HBV cccDNA。

摘要：目的　前瞻性地评价肝门胆管良性狭窄的处理方式与近远期疗效的关系。方法　前瞻性地观察了按病因不同分为 4组的 2 5例患者 ,分别以不同方式治疗所取得的近远期疗效。结果　肝门胆管空肠吻合术治疗良性医源性肝门胆管狭窄疗效确切 ,随访期间返流性胆管炎 1例 ,发生率较低 ,仅为 10 % ;肝门胆管原位整形保持了胆管生理学的完整性 ,惟需可用的良好的自体修补组织及合理的手术设计两个因素 ;含石的萎缩右半肝切除加肝门胆管整形既达到了清除病灶的目的 ,又保持了胆管的通畅性及生理功能的完整性 ;气囊扩张虽对轻度环形狭窄有良效 ,但继发性硬化性胆管炎伴肝门管状狭窄气囊扩张疗效欠佳。结论　根据不同病因选择各异的治疗方案 (个体化 ) ,处理肝门胆管良性狭窄可获近远期良效。

摘要：目的:了解乙肝相关性失代偿肝硬化肝移植术后使用拉咪呋啶预防移植物乙肝再感染的疗效及乙肝标志物在血清及肝组织中的动态变化.方法:用酶联放免法,血清HBVDNA荧光定量法、肝穿组织免疫组化LSAB法及HBVDNA原位杂交法定期检测25例受体血清及肝穿组织,观察肝移植术后HBV标志物在血清及肝组织中的动态变化.本研究设计为前瞻的开放的非随机的临床对照研究.25例被分为乙肝病毒活跃复制(15例)及非活跃复制组(10例)两组,皆以拉咪呋啶100mg/d术前后服用预防,非活跃复制组中有3例未能及时服用拉咪呋啶作为对照组.结果:在HBV活跃复制组,术前口服拉咪呋啶平均2wk能使80%以上的患者血清HBVDNA阴转;继续口服,术后表面抗原消失,部分血清乙肝病毒抗体(表面抗体HBsAb9/15,核心抗体HBcAb13/15及HBeAb11/15)可在术后1-2wk出现,至6mo可逐渐消失;血清中HBVDNA荧光定量可一直维持阴转的状态;肝穿组织中HbsAg,HBcAg及HBVDNA原位杂交可长期维持阴性.10例乙肝病毒活跃复制受体其HBV血清标志物在12-44wk之间完全消失;本组中2例(2/15,13.3%)在2a时发生拉咪呋啶预防失败而致移植物再感染或乙肝复发;在HBV非活跃复制组,乙肝病毒抗原抗体表达同活跃复制组:表面抗原术后即消失,乙肝病毒抗体即在1-2wk出现(BsAb4/7,HBcAb6/7,HBeAb2/7),6mo左右消失.3例(43%,3/7)在近2a时血清及肝组织中HBV标志即完全消失.本组无移植物再感染,乙型肝炎复发及乙肝病毒相关死亡.若血清中重新出现表面抗原或HBVDNA荧光定量阳性或肝穿组织免疫组化或HBVDNA原位杂交阳性则可诊断为HBV再感染.未能及时服用拉咪呋啶的3例非活跃复制的乙肝受体分别在术后8、10、12mo移植物感染及复发新肝乙型肝炎,移植物再感染率及乙肝复发率为100%,其中1例死于纤维淤胆性肝炎,后二者经加用拉咪呋啶治疗为主的综合治疗而缓解.本研究除对照组外,拉咪呋啶预防下移植物总的乙肝再感染率为9.1%(2/22),受体HB复发率为4.5%(1/22),1-2a生存率达87%.结论:拉咪呋啶能有效地预防失代偿期乙肝相关性肝脏疾病受体、尤其是乙肝病毒活跃复制受体肝移植术后移植物乙肝病毒的再感染及乙型肝炎复发,甚至使血清中及移植物的乙肝病毒达到临床清除.远期疗效正在进一步的评价中.