摘要：背景：骨髓基质细胞的分离纯化、细胞培养、细胞标记、诱导因子、基因转染对细胞生物学影响、细胞载体构建及细胞复合物回植时间的选择等尚处于实验研究阶段。目的：摸索一种较为简便且可有效获得骨髓基质细胞的体外培养方法。设计、时间及地点：细胞学体外实验，于2006—06／2007-01在中国科学院北京基因组研究所完成。材料：SPF级6周龄新西兰大白兔8只，由中国科学院遗传发育研究所实验动物中心提供。方法：无菌条件下抽取兔骨髓1mL，***液稀释后，离心弃上清，DMEM培养基重悬，制备单细胞悬液，叠加在密度为1．077的等体积淋巴细胞分离液的液面上，离心后取界面云雾状的单个核细胞层，用含有20％胎牛血清的DMEM培养基重悬。以1×10／cm^2接种后贴壁法纯化细胞，待70％～80％长满单层后消化传代。主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞生长情况，锥虫蓝染色计数活细胞，苏木精．伊红染色对细胞进行鉴定，MTT法检测细胞活性，观察传代培养的细胞冻存后复苏情况。结果：接种24h后细胞开始贴壁，呈短梭形或三角形，且有长短不等的细胞突起：3d后贴壁细胞开始分裂增殖，部分区域形成细胞团簇；1周后大部分细胞呈成纤维状散落在培养瓶底生长；传代后细胞均匀分布，形态呈细长梭形，并沿一定方向排列，1mL骨髓基质细胞悬液传3代后的贴壁细胞数可达5×10^6-1×10^7数量级。骨髓基质细胞成活率约为90％，经鉴定为单核细胞，接种后1-6d细胞持续旺盛生长，至第8天细胞活性最高，随后生长活性下降。复苏冻存56d的细胞，其生长良好，增长迅速。结论：以淋巴细胞分离液梯度离心后可获得纯度较高的骨髓基质单核细胞，经体外扩增培养能够得到足够数量的种子细胞，冻存复苏后细胞活性无变化。

摘要：背景:SOX-9在软骨组织的发生和发育中具有重要作用,可促进间充质细胞凝集,具有转录激活结构域,能直接调控转录。目的:选用SOX-9基因构建pDC316-SOX-9质粒转染兔骨髓基质细胞,观察SOX-9基因对骨髓基质细胞生长特性及产物表达的影响。设计、时间及地点:细胞基因工程体外实验,于2006-06/2007-01在中国科学院北京基因组研究所完成。材料:SPF级6周龄新西兰大白兔8只,用于分离培养骨髓基质细胞。方法:采用脂质体介导法将构建的pDC316-SOX-9质粒转染兔骨髓基质细胞,细胞转染分为SOX-9质粒转染组、空质粒组、只加入等量脂质体的空白对照组。主要观察指标:通过细胞形态、细胞生长活性、免疫组织化学及HE染色、RT-PCR法、ELISA法检测SOX-9基因转染骨髓基质细胞是否成功。结果:pDC316-SOX-9质粒转染4d出现小片的细胞集落,挑取克隆扩增培养后,细胞呈梭形纤维状。随转染时间的延长,空白对照组细胞逐渐死亡,SOX-9质粒转染组、空质粒组的细胞活性均显著延长,在转染2周达高峰,之后逐渐降低。转染第6天,SOX-9质粒转染组骨髓基质细胞免疫组织化学染色呈棕黄色,稳定表达SOX-9蛋白,HE染色可见多个双核细胞,细胞增殖旺盛,与成软骨细胞类似;空质粒组无SOX-9蛋白表达,组胞增殖分裂不旺盛。SOX-9质粒转染组表达SOX-9 mRNA,空质粒组及空白对照组均无SOX-9 mRNA表达。转染后24,48,72h及1,2周,SOX-9质粒转染组细胞上清液中SOX-9含量均明显高于空质粒组、空白对照组(P<0.01)。结论:利用pDC316-SOX-9质粒成功转染兔骨髓基质细胞,增强细胞生长活性,并能持续稳定的分泌SOX-9蛋白,可诱导骨髓基质细胞向软骨方向分化。

摘要：背景:长期以来许多学者认为股骨头缺血性坏死与髋关节一过性滑膜炎二者之间有着因果关系,但观点不一致。目的:观察去甲肾上腺素诱导髋关节一过性滑炎对髋关节引起的各种变化,探讨股骨头缺血性坏死与髋关节一过性滑炎之间的相互关系。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:在暨南大学医学院附属第二医院完成。40只年龄2～3个月的幼狗,体质量5～7kg,雌雄不限,由中山医科大学动物实验室提供。干预:随机分为4组,分别在髋关节内注入2g/L的去甲肾上腺素,在不同时间用99锝m—亚甲基二磷酸盐(99Tcm-MDP)三相骨显像,观察股骨头局部循环血流变化,同时测定关节内压变化、病理组织学检查,观察整个髋关节引起的病理变化及发展过程。主要观察指标:①各组各时间点关节内压。②99Tcm-MDP骨显像。③病理组织学观察。结果:注入去甲肾上腺素3h～2周,第1,2,3,4组关节内压升高(第4组升高持续4周),第1,3组股骨头99Tcm-MDP骨显像的血流量下降,与对侧比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。第2组注入滑石粉悬浮液后1周及第4组注入去甲肾上腺素后,血流量第4周恢复正常。病理组织学观察显示一过性滑膜细胞增生。未引起股骨头坏死。结论:去甲肾上腺素可能在髋关节一过性滑膜炎发病机制中起重要的作用,髋关节一过性滑膜炎可能是一单独疾?

摘要：背景:目前在探讨骨缺损的物理和药物方法治疗的效果、检验手术方式的有效性、以及评价骨替代材料在骨缺损修复中所起的作用时,尚缺少一种客观的、标准的动物模型。目的:为骨不连的实验研究建立一种客观的动物实验模型。设计:制作兔骨不连模型的验证性实验。单位:深圳市人民医院骨科。材料:取普通级纯种新西兰大白兔20只,体质量(2.5±0.5)kg,6～8月龄,雌雄不限。方法:实验于1999-05/08在深圳市人民医院动物实验中心完成。选取纯种新西兰大白兔20只,在前臂桡骨中段截除1.5cm骨段(包括骨膜),骨断端用骨蜡封闭髓腔,10周后经大体标本、病理组织学及X射线检查确定骨不连形成情况。主要观察指标:兔前臂桡骨骨缺损模型大体观察及病理组织学和放射学检查结果。结果:纳入白兔20只(40侧桡骨)均进入结果分析。①兔骨缺损区大体观察:10周后骨缺损区可见纤维瘢痕组织填充,无骨性连接,骨蜡未吸收,骨端硬化,髓腔闭塞,两侧断端有少量骨痂形成,骨缺损范围为0.8～1.2cm。②兔骨缺损区病理组织学检查:光镜下骨断端髓腔封闭,有软骨细胞及骨细胞,细胞呈无序排列,纤维膜覆盖,缺损区为纤维瘢痕组织。③兔骨缺损区放射学检查:于10周X射线拍片见骨缺损区无骨性连接,断端硬化,髓腔封闭,两侧断端有少量骨痂形成,骨痂形成不规则。结论:实验所建立的动物模型,具有骨不连的病理改变,符合骨不连的要求,反映了骨不连的一般特征,可以认为是一种可靠而实用的实验性骨不连动物模型。

摘要：为了解决宠物门诊中的烈性犬保定问题,以Φ6′镀锌自来水管为主要材料设计、焊制脱卸式活动围栏,并在临床实践中不断改进和观察应用效果。结果表明,该围栏对于各种体格的烈性犬均具有可靠的保定效果,对人和犬均十分安全,而且操作简单,容易清洗和消毒。

摘要：为了解决宠物门诊中的烈性犬保定问题,以Φ6′镀锌自来水管为主要材料设计、焊制脱卸式活动围栏,并在临床实践中不断改进和观察应用效果。结果表明,该围栏对于各种体格的烈性犬均具有可靠的保定效果,对人和犬均十分安全,而且操作简单,容易清洗和消毒。

摘要：为了解决宠物门诊中的烈性犬保定问题,以Φ6′镀锌自来水管为主要材料设计、焊制脱卸式活动围栏,并在临床实践中不断改进和观察应用效果。结果表明,该围栏对于各种体格的烈性犬均具有可靠的保定效果,对人和犬均十分安全,而且操作简单,容易清洗和消毒。

摘要：目的　为股骨干骨折的治疗提供一种新的简单有效的内固定方法。　方法　研制出防旋加压髓内针 (anti-rotationandcompressionintramedullarynail,ACIN)。将 14根成人股骨干标本随机分为两组 ,制成中下 1/3骨折模型 ,一组置入ACIN ,另一组置入梅花针 ,在MTS试验机上进行扭转试验 ,SWD - 10试验机上进行三点弯曲试验 ,比较ACIN与梅花针的生物力学性能。临床应用 30例 ,均为新鲜骨折 ,含股骨干上段、中段、中下及下 1/3部位的横形、斜形、螺旋形及粉碎性骨折。全部病例采用开放置入髓内针的方法。　结果　ACIN固定组最大扭矩、扭转刚度、正前向及外侧向弯曲刚度均明显优于梅花针固定组 (P <0 .0 1)。全部病例均得到随访 ,随访时间 9～ 2 7个月 ,平均 14.5个月 ,骨折全部愈合。按照Klemm等功能恢复分级标准 ,总优良率 10 0 %。　结论　(1)ACIN设计合理 ,有较好的生物力学性能 ,抗骨折部弯曲及扭转的能力能够满足临床需要。 (2 )手术操作简单 ,术中不需X线机监视 ,便于推广。 (3)ACIN有一定的加压作用 ,有利于骨折愈合。(4 )扩大了髓内固定治疗股骨干骨折的适应证。

摘要：如何有效的控制烈性犬在预防免疫、检查与治疗过程中的攻击性行为,历来就是宠物门诊中的难题。理想的保定器械应具备安全、牢靠、使用简便、便于消毒、不损伤犬本身、多次重复使用时犬接受率高、能够得到犬主人的认可等一系列的优点。常规的保定方法众多,但在实际使用过程中,尤其是当面对攻击性、敏感性较强的犬时,效果往往不甚理想,无法达到保定预期的目的。实践中存在的问题,对烈性犬的保定器械制作提出了更高的要求。这就促使我们不得不在总结前人和自身实践的经验与教训的基础上,不断创新,设计和研制出正真实用的新型烈性犬保定器械。经过三年的努力研究与实践,先后制作了七种不同的保定器械,终于在第七次实践中,成功研制了靠墙保定式特制脱卸摇门套件,并在使用过程中取得了令人满意的效果。