摘要：目的通过组织实施奶粉中沙门菌的能力验证,对国内实验室的沙门菌检测能力进行分析和评价。方法采用人工污染的方式制备奶粉中沙门菌能力验证样品,即菌种复苏、增菌后配制成菌悬液加入配制好的复原牛乳中混匀分装,进行冷冻干燥;对制备好的样品进行均匀性检验和稳定性检验。本次能力验证设计3组不同的能力验证样品,每个实验室随机发送2个样品,将各参加实验室提交的检测结果与指定值比较,评定各参加实验室的测试结果为满意或不满意(假阴性或假阳性)。结果全国共337家实验室参加该项沙门菌的检测能力验证,有满意结果的实验室323家,满意率为95.8%,有不满意(假阴性和假阳性)结果的实验室14家,占比为4.2%。共向实验室发送674个样品,658个结果满意,满意率为97.6%;16个样品结果不满意(假阴性或假阳性),占比为2.4%。结论采用不同组别的样品随机编号且随机发样的方式,取得了良好的考核效果;本次人工污染方式制备的能力验证样品,充分考虑了目标菌、类似干扰菌和背景菌,制备的样品与实际样品一致性较好,考核效果良好。能力验证评价结果表明,全国参加考核的实验室奶粉中沙门菌检测能力总体较好,少部分实验室的检测能力有待改进提高。

摘要：建立了从肉骨粉中提取DNA的稳定、简便易操作的方法。根据牛线粒体DNA特异性片段设计引物 ,建立了PCR技术检测肉骨粉中牛源性成分的方法。同时 ,根据 1 8Sr RNA基因序列 ,设计通用引物来扩增所有真核生物的同源性基因片段 ,以此作为内源参照基因来检查从肉骨粉中提取模板的质量 ,避免假阴性结果。PCR反应循环参数是 96℃ 2min ;94℃ 40s,60℃ 50s,72℃ 60s ,35次循环 ;之后 72℃延伸 5min。肉骨粉中牛源性成分经PCR扩增出 2

摘要：建立了从肉骨粉中提取DNA的稳定、简便易操作的方法。根据牛、羊线粒体DNA基因片段设计特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光PCR技术检测肉骨粉中牛、羊源性成分的快速、特异、敏感的方法。

摘要：婴幼儿配方乳粉是根据不同时期婴幼儿生长发育所需营养特点设计的产品,既包含提供能量的脂肪、蛋白质等成分,也包括人体所需的维生素、矿物质元素。近几年,政府相继出台实施了一系列保障婴幼儿配方乳粉质量安全的有力措施,大幅提高了婴幼儿配方乳粉生产准入门槛和产品质量安全保障水平[1-3]。

摘要：本研究应用PCR技术对转基因 (GM)玉米及其粗加工食品如 :爆玉米花、熟玉米棒、速溶玉米片中通常转入的基因构建元件 35S启动子、NOS终止子和外源抗虫GryIA(b)目的基因进行检测 ;对GM玉米的检测低限可达到 0 1% ;设计征服玉米自身醇溶贮藏蛋白 (ZEIN)基因的扩增和阳阴性样品对照、试剂空白质控 。

摘要：目的利用TaqMan荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针[1];利用构建的质粒标准品优化Mg2+的浓度和引物探针浓度,并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性;初步应用于粪便标本的检测分析。结果Mg2+终浓度为4.5 mmol/L,上下游引物终浓度为0.4μmol/L,灵敏度为6拷贝数/反应;绘制两种标准曲线,构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型,检测粪便标本结果显示TaqMan荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法。

摘要：目的通过对宫颈癌患者血液核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因RNH的突变分析,探讨RNH基因与肿瘤生长的关系。方法针对RNH全基因序列设计21对引物,PCR扩增后采用SSCP对突变进行检测。结果正常人和宫颈癌患者均扩增出相应的21个条带,未发现异常;经过SSCP分析未发现所收集的18例宫颈癌患者血液中的RNH基因有突变发生。结论尚不能肯定RNH基因的突变是否与肿瘤无关,也不能肯定其他肿瘤没有发生突变。需缩小检测片段进一步实验。

摘要：目的利用SYBR GreenI荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域设计合成特异性的引物;利用构建的质粒标准品绘制两种标准曲线,构建基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型并初步应用于粪便标本的检测分析。结果所建立的SYBR GreenI荧光定量PCR方法检测灵敏度可达7个拷贝数/reaction。粪便样本根据实时荧光定量PCR方法所得的理论数值与培养菌值之间差异无显著性(P>0.05)。非炎性腹泻标本中菌数与健康成人标本中菌数差异无显著性(P>0.05)。灵敏度曲线所得的数值大于菌数标准曲线,可能由于DNA提取过程中存在部分的损失。检测粪便标本结果显示SYBR GreenI荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法。