摘要：目的设计表达一种全新的重组蛋白(重组Ficolin-2蛋白,F蛋白)并包被磁珠,实现多种抗凝血中EB病毒的富集效果。方法通过体外基因合成重组F蛋白基因片段,该片段包括人IL-2信号肽、his标签、人IgG1 Fc、人Ficolin-2颈区及纤维蛋白原样区域(fibrinogen-like domain,FGD);并整合进表达质粒pCDNA^(TM)3.1(+)载体中,通过转染HEK293F细胞,实现上清中的分泌表达;通过镍柱纯化蛋白后包被到蛋白A磁珠上构建F磁珠;最后,收集三种不同抗凝剂(分别为ETDA、肝素、柠檬酸钠)抗凝的临床EB病毒血样本,并且比较了F磁珠和课题组前期开发的重组甘露聚糖结合凝集素磁珠(M磁珠)对三种抗凝剂抗凝血液中EB病毒富集的效果。结果M磁珠对肝素和柠檬酸钠抗凝血液中EB病毒富集效果均较好(P<0.01),但是对EDTA抗凝血EB病毒没有富集作用;而F磁珠对三种抗凝血中EB病毒的富集效果均较好(P<0.01)。结论F磁珠可以实现多种抗凝血中EB病毒的富集作用。

摘要：目的调查分析北京市昌平区不同年龄及教育程度人群对抗菌药物及细菌耐药的认知、态度及行为,了解城市人群对抗菌药物及细菌耐药的认知缺口,为制定遏制耐药科普宣传策略提供依据。方法设计调查问卷,采用分层随机抽样方法,借助微信“问卷星”平台开展问卷调查,利用SPSS软件进行统计分析,使用卡方(χ^(2))检验分析不同人群对抗菌药物认知、态度、行为状况及差异。结果共收集到1267份有效问卷,依据受访者年龄和教育程度的不同,将受访人群分为7个年龄组和4个学历组分别进行统计分析。受访者中对抗菌药物、当前的耐药形势及耐药菌跨领域传播的正确认知率分别为58.09%、48.38%和52.80%,研究生及以上学历组正确认知率高于另外3个学历组(χ^(2)=32.378,P<0.05)。90.69%的受访者表示愿意学习抗菌药物的相关知识;93.61%的受访者使用前会主动了解药物的使用剂量、注意事项和不良反应;89.42%的受访者会在使用抗菌药物前阅读说明书,显示民众学习了解抗菌药物相关知识的主观意愿比较强。93.37%的受访者赞同必须医生开具处方才可购买抗菌药物的规定,但严格遵从医嘱使用抗菌药物的比例仅为74.19%。71.03%的受访者家中常备抗菌药物;55.72%的受访者会在患病时自行服用抗菌药物;23.84%的受访者会依据病情变化自行加减或停用抗菌药物。而且,55.01%的受访者认为自己不存在抗菌药物过度使用或不规范使用的情况。结论遏制耐药国家行动计划实施五年,城市居民对于抗菌药物及细菌耐药的认知和关注度高,反映出北京市在遏制耐药科普宣传方面取得了很好的效果。但在对耐药现状及耐药菌危害认知方面,不同人群间差异大。此外,认知同行为脱节,认识到个人存在抗菌药物使用不当行为的人群比例低,提示抗菌药物正确使用行为规范科普宣传有待提高。因此,下一步将加强具体行为规范的科普,针对不同年龄段、不同教育背景人群开展更有针对性的宣传,强化认知到行为的转变,促进全人群合理用药的行为规范,以达到“扩大认知,遏制耐药”的公共卫生目标。

摘要：目的建立临床常见感染假丝酵母菌多重PCR快速检测法。方法根据假丝酵母菌r DNA序列,设计光滑假丝酵母、白念假丝酵母和近平滑假丝酵母的种特异性引物,并应用真菌通用引物ITS1和ITS4,以白念假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、克柔假丝酵母、近平滑和季也蒙假丝酵母共6种菌的DNA为模板,进行多重PCR,2%琼脂糖凝胶电泳检测结果。大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌为阴性对照。同一PCR反应均重复2次。实验室保存的77株假丝酵母菌(25株白念假丝酵母,15株光滑假丝酵母,15株热带假丝酵母,8株克柔假丝酵母,8株近平滑假丝酵母,6株季也蒙假丝酵母)检测其重复性和稳定性。结果得到3条种特异性引物,扩增出种特异性条带和ITS区域片段。重复2次均得出同样大小的产物片段。阴性对照均未扩增出条带。结论该方法能快速准确检测6种常见感染的假丝酵母菌,具有高特异性。与传统培养方法相比,提高了非白假丝酵母鉴定的准确性,缩短了检测时间,具有一定的临床应用价值。

摘要：食品冷链可以定义为温度受到严格控制的供应链,是跨越多个行业、部门之间相互结合的整体,冷链的信息来自食品生产加工企业、物流配送企业、超市零售商等多个部门。食品需要在源头进行唯一的物理标识,并将整个冷链上下游各个企业的信息附加在这个物理标识上,实现无缝对接与防伪保真,使追溯系统信息具有可信、可追溯的功能。论文基于区块链和RFID相关技术,讨论食品冷链追溯系统实现的功能、特点,并提出技术上的设计方案与实施方法。

摘要：文章主要阐述了一种测试变速箱系统变形的试验方法,由于变速箱在受载状态下壳体、轴、轴承、齿轮等零部件刚度不同,刚度耦合后会产生不同变形,综合作用导致零件偏离未受载状态的形状和位置,影响齿轮啮合性能和强度,为了验证变速箱的变形计算是否准确,采用试验与Romax仿真对比的方法提高模型的准确度,校正模型后对齿轮强度、微观参数设计有很大帮助。

摘要：目的建立一种检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法。方法设计针对艰难梭菌gyrA基因的特异性引物,并针对莫西沙星耐药株和敏感株的gyrA基因突变位点设计不同的TaqMan-MGB探针,优化可同时检测ATT、ACT突变点的双重荧光定量PCR方法,验证该方法的灵敏性、特异性和重复性,并进行应用评价。结果该方法对莫西沙星耐药株和敏感株gyrA基因突变位点的检测下限分别可达4 copies/μL和5 copies/μL,对艰难梭菌以外其他常见肠道菌群的检测均为阴性。重复性检测结果显示,批间和批内变异系数均<5%,该方法的检测结果与测序结果一致性高(k=0.98)。结论针对耐莫西沙星艰难梭菌gyrA基因点突变建立的双重荧光定量PCR方法,灵敏且具有很高的特异性和重复性,可有效鉴别艰难梭菌莫西沙星敏感株和耐药株,并可辅助识别流行株BI/NAP1/RT027的暴发。

摘要：目的 建立一种快速、准确检测细菌中ISCR1复合型Ⅰ型整合子的MGB探针二重实时荧光PCR方法。方法 根据ISCR1复合型Ⅰ型整合子中int1基因和ISCR1元件序列设计特异性引物和探针,在多种经常携带有2种多耐药相关基因元件的细菌中检测其特异性;使用含有2种基因元件特异性序列的重组质粒标准品评价建立方法的灵敏度。结果 建立的MGB二重探针实时荧光PCR检测方法特异性好,携带2种基因元件或单独含有ISCR1或者int1的实验菌株均出现相应特异性扩增曲线,对2种基因元件均不含的菌株进行试验扩增时,均未见出现特异性扩增曲线。对2种基因元件都存在的实验菌株的扩增中,亦不存在由于2套引物/探针相互影响而造成的干扰扩增。根据标准质粒样品构建的标准曲线可确定其对int1基因和ISCR1元件的检测灵敏度分别为5.89×10~1拷贝/μl和4.13×10~1拷贝/μl。结论本研究成功建立了MGB二重探针实时荧光PCR快速检测方法。

摘要：目的建立一种快速、准确检测细菌中arm A耐药基因的Taq Man实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。方法根据arm A基因设计特异的引物及探针,在多种常见致病菌中检测其特异性;使用阳性质粒标准品评价该方法的灵敏度;使用粪便模拟标本验证该方法的应用性。结果本方法特异性好,建立的arm A耐药基因real-time PCR方法标准曲线,确定其对质粒标准品的灵敏度为4.07×101拷贝/ml。应用该方法对粪便模拟标本进行检测,其检测下限为1.3×104cfu/ml。结论本研究建立了arm A耐药基因荧光定量PCR检测方法,有望在耐药基因监测中推广使用。

摘要：目的利用侧流层析–重组酶聚合酶扩增(LF-RPA)技术建立快速、敏感、特异的土拉弗朗西斯菌(土拉菌)检测方法。方法基于土拉菌特异性基因(tul4)设计重组聚合酶恒温扩增方法的引物及探针,优化反应时间和温度,同时评价该方法的灵敏度及特异性,并通过模拟血液样品评估此方法的实用性。结果该方法最佳反应条件是40℃,20 min,可检测核酸浓度最低为20fg/μl,与实时荧光定量PCR(qPCR)方法相近,且不与7种非土拉菌发生交叉反应。土拉菌模拟样本最低检测浓度为460CFU/ml。结论该检测方法操作简单,特异性良好,敏感度高且无需大型精密实验设备,在临床及现场检测土拉菌中具有应用前景。

摘要：从解决既往专业技术岗位聘任存在的技术性难题入手,探讨如何建立岗位聘任量化评价指标体系。文章以中国疾病预防控制中心传染病预防控制所专业技术岗位聘任为例,依据中国疾病预防控制中心专业技术岗位聘任条件,并结合单位实际情况,对照专业技术岗位设置、职责进行调查分析,以注重实绩为导向,对拟实现岗位聘任量化的评价要素、评价指标、评价方法等进行研究。设计定性和定量两大类评价指标,在明确定性指标权重的基础上,同时给出定量指标的计算规则,最终建立疾病预防控制系统专业技术岗位聘任量化评价指标体系。该体系经过实践检验,具备可操作性,能够较好地实现疾病预防控制专业技术岗位聘任工作的科学评价,对树立正确的人才科学评价导向、破除论文“SCI至上”、营造风清气正的科研环境、推动疾病预防控制系统人才评价改革具有一定的参考价值。