摘要：为了快速准确检测进境玉米样品中的玉米内州萎蔫病菌Clavibacter michiganensis ***(Cmn),根据GenBank中Cmn的16S-23S序列设计引物CM1/CM4和引物PSM1/CM3。引物PSM1/CM3仅能从供试的4株Cmn菌株中扩增获得208 bp的预期产物,而其他36株对照菌株均不能扩增出预期条带。灵敏度测试结果表明引物CM1/CM4和PSM1/CM3组合的巢式PCR方法的检测灵敏度高于常规PCR,检测灵敏度可达40 fg DNA或6.8 CFU目标细菌。常规PCR和巢式PCR方法对进境美国玉米样品的阳性检出率分别为8%和24%,试验结果表明所建立的PCR方法可用于玉米样品中Cmn的快速检测。

摘要：本研究对毒麦及其近似种的ITS2序列进行扩增测序,根据序列比对得到的多态性位点设计特异性引物及Taqman-MGB探针,建立Real-time PCR检测毒麦的方法;同时对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估。结果表明:该方法检测灵敏度能达到5×10-3 ng/μL,对其他黑麦草属样品检测结果均为阴性。本研究为毒麦样品的快速、准确检测奠定了基础。

摘要：根据小麦印度腥黑穗病菌Tilletiaindica和黑麦草腥黑穗病菌T .walkeri核糖体ITS序列设计了两对通用引物和两条特异性探针 ,建立了小麦印腥印度腥黑穗病菌Tilletiaindica和黑麦草腥黑穗病菌T .walkeri的实时荧光PCR检测方法 ,检测的灵敏度为 1个冬孢子。这种检测方法可以直接用于样品小麦印腥和黑麦草腥黑穗病菌冬孢子的快速检测 ,整个检测过程缩短至 1天。

摘要：小金蝠蛾(Hepialus xiaojincusis)是冬虫夏草的优势寄主昆虫,主要分布在四川省小金县。冬虫夏草的品质与产地和寄主昆虫密切相关,研究快速准确鉴定冬虫夏草寄主小金蝠蛾可准确进行冬虫夏草的溯源及品质鉴定。该试验根据小金蝠蛾线粒体DNA中特异序列设计实时荧光Taqman探针,优化反应条件,建立了小金蝠蛾实时荧光PCR快速鉴定方法,可对四川小金县产冬虫夏草进行精准鉴定。

摘要：小麦花叶病毒(wheat mosaic virus,WMoV)是严重危害小麦、玉米等禾本科作物的种传病毒,在我国尚无发生,具有重要检疫意义。本研究利用引物WMoV-283F/R全国首次检测出玉米种子中的WMoV,成功扩增出了两个不同典型毒株NP序列,并分析其序列特征。根据WMoV-RNA3、WMoV-RNA3A和WMoV-RNA3B序列特点设计特异性引物,经RT-PCR扩增玉米种子样品2211-2和8044-10的RNA,扩增产物测序得到283 bp基因序列,分别与WMoV分离物GG1-RNA3B(GenBank登录号KT988872.1)、WMoV分离物K1-RNA 3(GenBank登录号KT988889.1)同源性为96.11%、96.47%。设计引物分别扩增玉米种子样品2211-2和8044-10的RNA核衣壳全长序列,得到WMoV-Germany RNA3、WMoV-Malaysia RNA3A和WMoV-Malaysia RNA3B全长序列。使用MEGA6软件采用Maximum likelihood法建立系统发育树,它们分别属于3个同源性差异明显的簇。通过DNAMAN序列比对分析三者的关系,RNA3序列在标尺碱基位点220~506区域序列差异性最大,而序列700~892、972~1102区段则相对保守。这为检测引物的设计提供了重要参考。WMoV的首次截获并鉴定为该病毒的检测鉴定和致病机理研究提供依据。

摘要：从上海口岸进境的澳大利亚小麦中发现一种类似小麦印度腥黑粉病菌的腥黑粉菌冬孢子,对该菌冬孢子进行了形态学特征和PCR检测,根据结果,将这种冬孢子鉴定为沙地牧草腥黑粉菌Tilletiaehrhartae;本研究设计了***的特异引物Eh2/Eh4,结合引物Till/Til4建立了***的套式PCR检测方法。

摘要：根据水稻腥黑粉菌两个聚类群与其它黑粉菌ITS序列的差异,分别设计了两个聚类群的特异引物Hor2/Hor9和Hm1/Hm5,结合ITS通用引物Til1/Til4建立了分别检测水稻腥黑粉菌两个聚类群单个冬孢子的套式(巢式)PCR检测方法,整个检测过程可以缩短至8h。

摘要：目的建立食品过敏原羽扇豆成分的环介导等温扩增检测方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。方法根据羽扇豆的ITS基因设计羽扇豆的特异性引物,进行特异度、灵敏度、稳定性测试,建立LAMP检测方法。结果本文建立的食品过敏原羽扇豆成分LAMP检测方法能有效对羽扇豆成分进行快速检测,具有较强的特异度和稳定性,灵敏度可达0.001%(w:w)。结论该方法特异度强、灵敏度高,可以快速、准确检测食品中过敏原羽扇豆成分。