摘要：抑制素βA基因(Inhibin-βA,INHβA)的表达与绵羊(Ovisaries)的产羔数有一定关系。利用RNAi技术构建载体用来干扰INHβA的表达。根据GenBank上绵羊INHβA(GenBank:NW_004080167.1)mRNA的序列设计干扰片段4个PLLU2G-shINHβA-1(I-1)、PLLU2G--shINHβA-2(I-2)、PLLU2G-shINHβA-3(I-3)、PLLU2G-INHβA-4(I-4),其中I-2对INHβA表达的沉默效果最好。实验研究结果为绵羊繁殖性状和发情性状的研究奠定了良好的理论基础,构建的干扰载体有望进一步应用于提高绵羊繁殖性能的生产实践中。

摘要：目的 探讨宫颈上皮内瘤变和宫颈癌与内质网蛋白57（ERp57）基因启动子区甲基化水平的关系和意义。方法应用MethPrimers软件设计ERp57基因启动子区CpG岛特异性PCR引物，对宫颈癌SiHa细胞DNA进行亚硫酸氢盐修饰、目的片段扩增、质粒载体克隆和测序，确定目的片段所含CpG序列甲基化情况。收集15例正常宫颈上皮（对照组）、30例宫颈上皮内瘤变（CIN组）和33例宫颈鳞癌（CSCC组）患者的新鲜组织标本，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF）技术定量分析宫颈病变组织DNAERp57基因启动子单-CpG位点的甲基化水平。结果ERp57基因相应目的片段各含9个CpG位点，在宫颈癌SiHa细胞基因组DNA中，所有的CpG位点都发生了甲基化，甲基化率为100％。MALDI—TOF检测结果显示，在CSCC组中，CpG-1、CpG_5和CpG．_7位点的甲基化水平分别为0．9021±0．1810、0．85214-0．1696和0．9671±0．1425，对照组分别为0．7721±0．0644、0．7347±0．0924和0．8765±0．0226，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。CSCC组、CIN组和对照组宫颈组织ERp57基因的甲基化水平分别为0．9065±0．3709、0．8697±0．3336和0．8040±0．4705，差异无统计学意义（P=0．052）。结论维吾尔族妇女宫颈病变组织中，ERp57基因启动子某些单个CpG位点发生甲基化后，引起该基因转录下调，其位点可能是关键性CpG位点。