摘要：目的：观察RNA干扰技术对乳腺癌MDA—MB-231细胞VEGF—C表达的影响。方法：制备针对VEGF—C的三种小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA），分别是siRNAa、siRNAb、siRNAc，筛选靶向基因最有效siRNA，据此设计短发夹RNA（shorthairpinRNA，shRNA）寡核苷酸链，构建pGenesil-1／VEGF—C重组质粒表达载体。利用脂质体将此质粒转染人乳腺癌MDA—MB-231细胞，采用RT—PCR、免疫组织化学染色法和Westernblot方法检测VEGF—C的变化情况，利用QuantityOne软件对RT—PCR、Westernblot图像进行半定量分析，用Image—ProPlus6．0图像分析软件测量并分析免疫组织化学染色法结果。结果：RT—PCR结果显示siRNAa、b、c对MDA—MB-231均有抑制作用，与空白对照组、脂质体组的差异性显著（P〈0．05），siRNAa抑制率最高（72．41％）。利用针对siRNAa合成的shRNA与质粒pGenesil-1构建表达载体pGenesil-1／VEGF—C，酶切鉴定及测序结果均表明构建成功。将其转染乳腺癌MDA—MB-231细胞后，RT—PCR、免疫组织化学染色法和Westernblot方法检测均表明VEGF—C的表达明显受到抑制（P〈0．05）。结论：shRNARNA干扰技术可以有效沉默人乳腺癌细胞株MDA—MB-231中VEGF—C的表达，提示该技术可能是抑制乳腺癌淋巴管生成的有效手段。