摘要：为获得高密度培养清酒广布乳杆菌及其冻干菌粉制备的方法,通过设计单因素和正交实验,对发酵培养基、种子液和发酵罐培养条件、离心参数以及冻干保护剂进行研究。结果表明,培养基为蔗糖30 g/L、酵母浸粉35 g/L、硫酸锰0.25 g/L、磷酸氢二钾3.0 g/L、柠檬酸氢二铵3.0 g/L、乙酸钠7.5 g/L、吐温801.5 g/L、硫酸镁0.87 g/L;培养温度30℃、摇瓶初始pH7.5、种子液培养10~20 h、发酵罐恒定pH6.0、搅拌速度50 r/min,不通气培养,使用0.2%聚醚消泡剂和4 mol/L氢氧化钠为中和剂、并补料30%蔗糖;离心转速6000 r/min、离心时间10 min,保护剂为10%蜂蜜。此条件下生物量OD_(620 nm)值达到了8.91,菌粉活菌数、存活率和水分含量分别达到6.27×10^(11)CFU/g、88.08%和2.94%。该研究通过优化清酒广布乳杆菌高密度培养和菌粉制备工艺,发酵液和菌粉的生物量显著提升,可为工业化生产清酒广布乳杆菌及其菌粉奠定基础。

摘要：为了满足市场对凝结魏茨曼氏菌(Weizmannia coagulans)不断增加的需求和获得高密度培养凝结魏茨曼氏菌的方法,该研究以凝结魏茨曼氏菌D1为试验对象,以MRS培养基为基础,通过单因素试验和响应面试验,对凝结魏茨曼氏菌高密度培养条件进行了优化,并在最佳条件下进行10 L放大培养。结果表明,最佳培养条件为培养温度50℃、初始pH值为8.0、培养时间16 h,最佳培养基配方为葡萄糖24 g/L;酵母浸粉-胰蛋白胨(1∶1)31 g/L、七水合硫酸镁0.29 g/L。优化后菌株的OD620 nm值达到了2.15,比优化前增长了68%,且延滞期更短。在上述试验结果的基础上,菌株在10 L发酵罐、搅拌速度200 r/min并通气培养的条件下,OD620 nm值达到了7.90。研究结果为凝结魏茨曼氏菌的工业化生产提供了依据,为后续菌粉生产奠定基础。

摘要：主要从安全性、方位性以及观赏性3个方面分析了宅旁绿地造景中人、植物和生境之间的相互关系。在此基础上,提出了桂林市宅旁绿地园林植物设计思路,以及园林植物配置模式和配置方法,以期对桂林市住宅区绿化地造景设计建设提供借鉴作用。

摘要：以细毛羊育种为例．阐述了畜禽遗传评定的基本原理，并结合育种信息管理系统．研究了如何利用管理系统的信息资源，进行遗传评定输出。分析了畜禽遗传评定微机实现的数据流程。并使计算育种值和多性状综合选择指数中各种性状的选择根据具体需要由育种工作者自己设定，且通过报表打印出育种值和务性状综合选择指数。整个设计由系统的主控菜单集合，最后打包到信息系统软件包中，形成用于销售的商用软件。

摘要：为了建立同时鉴别检测蓝舌病毒(BTV)2型、3型、4型、7型及12型的快速方法,针对BTV不同血清型的VP2基因保守区,采用Ge XP原理,设计了5对特异性嵌合引物和1对通用引物,优化建立了可单管同步鉴别BTV2型、3型、4型、7型及12型的HPCE方法。该方法仅对BTV 2型、3型、4型、7型、12型的病毒核酸有扩增,对BTV的其他基因型以及小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒均无扩增,特异性好。敏感性试验结果显示:该方法对单一病毒核酸的最低检测量为100~1 000 copies/μL;对五种血清型病毒混合核酸的最低检测量为100 copies/μL。组内重复试验与组间重复试验结果均一致,重复性好。临床样品和模拟样品检测结果显示,本研究建立的HPCE方法与OIE推荐的套式RT-PCR敏感性一致,且该方法可以特异、敏感、快速地鉴别蓝舌病毒(BTV)2型、3型、4型、7型及12型。

摘要：本研究建立了快速检测单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)与副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的重组酶聚合酶等温扩增(Recombinase polymerase amplification,RPA)方法。根据单核细胞增生李斯特氏菌hlyA基因和副溶血性弧菌tlh基因设计合成引物和CRISPR RNA(cr RNA),合成荧光标记ssDNA探针,建立RPA-CRISPR/Csa12a检测方法。对建立方法的特异性、灵敏度进行检测,并通过人工污染样本对方法进行验证。结果显示,建立的RPA-CRISPR/Cas12a方法可特异性检出单核细胞增生李斯特氏菌和副溶血性弧菌靶标基因,且不与大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、伊氏李斯特菌等常见致病菌发生交叉反应;灵敏度试验结果显示,对于质粒标准品,副溶血性弧菌检出限为27 copies/μL,单增李斯特菌检出限为21 copies/μL;人工污染样品检测结果显示,本方法可以准确快速地检出样品中的单核细胞增生李斯特氏菌和副溶血性弧菌。该方法特异性良好,灵敏度高,不依赖温度循环装置,可实现采样现场快速检测,提升检测效率。

摘要：为建立一种快速、敏感鉴别诊断绵羊痘病毒(SPPV)和山羊痘病毒(G TPV)的方法,本研究根据SPPV和GTPV基因组保守区,分别设计特异性引物和探针,建立了SPPV和GTPV实时荧光RPA (real-time fluorescent recombinase polymerase amplification)检测方法。结果显示,该方法仅对SPPV和GTPV的靶基因扩增呈阳性,而对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、传染性脓疱病毒(O RFV)、蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、水疱性口炎病毒(VSV)、A型口蹄疫病毒(FM DV type A)、O型口蹄疫病毒(FMDV type O)、亚洲1型口蹄疫病毒(FMDV Asia 1)等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好;对SPPV和GTPV检测的灵敏度分别为4.72×10~2copies/μL和4.35×10~2 copies/μL;利用该方法对临床样品进行检测,与OIE推荐的普通PCR检测结果符合率为100%。结果表明,建立的SPPV和GTPV实时荧光RPA方法灵敏、快速、特异性强,为SPPV和GTPV感染的早期诊断提供了技术支持,适用于SPPV和GTPV的检疫、疫情监测及流行病学调查,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义。

摘要：[目的]建立猪瘟病毒(CSFV)快速、灵敏的检测方法。[方法]选择CSFV基因组中保守的5′端非编码区(NTR)作为研究对象,根据重组酶聚合酶扩增(RPA)原理,设计特异性RPA引物和exo探针,并对反应温度和时间进行优化,建立检测猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。[结果]该研究建立的方法能在39℃恒温条件下30 min内得到检测结果,实现了快速检测CSFV的目的。该方法仅对CSFV的核酸有扩增反应,而对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪肺炎支原体(Mhp)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪水疱病病毒(SVDV)和猪细小病毒(PPV)8种常见猪病病原的检测结果均为阴性,表现出良好的特异性,对含有CSFV目的片段的重组质粒的最低检测限为8.3×10^(2)copies/μL。同时使用新建立的CSFV实时荧光RPA检测方法和国家标准(GB/T 16551—2020)中的实时荧光RT-PCR对采集自重庆某养猪场的33份临床样本进行CSFV核酸检测,以验证CSFV的实用性,结果显示,2种方法检出的阴、阳性样本完全一致。[结论]该研究建立的CSFV实时荧光RPA方法反应条件温和、核酸扩增迅速、检测结果特异、灵敏,为CSF的诊断提供了新的选择。

摘要：采用野外湿地样方调查及结合文献资料,选择物种多样性指数,研究了湖北远安县湿地植物多样性、区系特征、主要群落类型及数量特征。结果表明:远安县湿地植物有108科264属360种,科级区系分布类型可划分为7类5种变型,以世界广布和热带分布型为主,温带分布类型较少,中国特有类型仅1科。县域范围内分布的典型湿地植物群落54种,群落物种多样性指数中,Patrick指数均值为18.80±5.19;Shannon-Wiener多样性指数均值为2.15±0.39;Simpson优势度指数均值为0.81±0.10;Pielou均匀度指数均值为0.75±0.10;Margalef指数均值为3.44±0.87。鬼针草群丛的Patrick指数与Margalef指数最低,竹叶眼子菜群丛的香农多样性指数、Simpson优势度指数、Pielou均匀度指数最低;芋群丛Patrick指数最高,乌桕群丛Pielou均匀度指数最高,加杨群丛香农多样性指数和Simpson优势度指数最高,白饭树群丛Margalef指数最高。该研究结果可为远安县及类似地区湿地生态系统保护修复及湿地资源管理提供了基础资料和科学依据。

摘要：发酵是提高燕麦浆品质的有效方法,但目前缺乏燕麦浆适配性发酵菌株,且未明确发酵燕麦浆的品质特征。该研究以燕麦浆为发酵基质,以嗜热链球菌st195、保加利亚乳杆菌lb31、植物乳杆菌Eden-Star PC06和植物乳杆菌Eden-Star PC108为发酵菌株,分别进行单菌发酵及混菌发酵,考察不同乳酸菌组合发酵对燕麦浆品质的影响,旨在筛选适宜发酵燕麦浆的乳酸菌菌种。研究结果表明,不同乳酸菌表现出不同的发酵性能,植物乳杆菌Eden-Star PC06表现出较好的生长性能与产酸性能。发酵燕麦浆乳酸菌数均增至7lgCFU/mL以上;发酵显著降低了燕麦浆中的还原糖,积累了有机酸和挥发性物质(醇类、酸类、酮类)含量。不同乳酸菌组合发酵对燕麦浆品质影响不同,植物乳杆菌Eden-Star PC06、嗜热链球菌st195和保加利亚乳杆菌lb31混菌发酵的燕麦浆的挥发性成分含量最高,感官评分较高,并且该组的燕麦浆在贮藏过程中后酸化程度较弱,能在一定程度上保持燕麦浆在贮藏过程中的品质稳定性。说明st195+lb31+lpPC06是适宜发酵燕麦浆的菌种组合,具有较大的研究开发价值,为进一步开发燕麦饮品发酵剂奠定了基础。