摘要：目前,公路工程的试验检测管理工作受到相关施工单位的高度重视,与之相关联的工程材料使用以及书面结构设计优化更是成为当今基础设施建设的热点话题。基于此,本文首先介绍了公路工程材料试验检测管理的意义,其次分析了公路工程材料试验检测管理现状,并在此基础上,针对性提出了公路工程材料试验检测管理的策略,以大幅度提高公路工程试验检测的精确度与科学性。

摘要：基于主题意义的阅读教学是将主题作为核心概念,以单元为整体进行设计和组织的教学方式.基于调查研究,对当前小学英语主题意义式阅读教学过程中所存在的问题进行了分析.为推进主题意义式阅读教学的有效实施,切实提高小学生英语阅读素养,提出以下实施建议:以话题理解为出发点,各抒己见;以文本整体为立足点,泛读提炼;以问题驱动为切入点,深度领会;以意义理解为落脚点,学以致用.

摘要：当前,国有企业作为国民经济的主要载体,是我们党执政兴国的重要支柱和依靠力量。国有企业要实现高质量发展,实现从速度和规模的发展向质量和效益的转变,必须要抛弃粗放式发展模式,放弃不讲风险不讲代价的发展方式。内部审计可以为新发展方式提供助力,内部审计通过发挥“治已病、防未病”的作用,通过履行内部监督和咨询服务的职能,找准国有资产流失的风险点、出血点,提高监管效能,推动国有企业规范管理和合规经营。本文基于内部审计为国有企业增加价值的必要性出发,阐述了内部审计为企业增加价值的路径,从转变观念、审计报告质量以及提高审计信息化水平等方面探索了内部审计为企业增加价值的方法。

摘要：【目的】在建立快速且准确检测牛弓形虫病的实时荧光定量PCR方法,以进一步研究该病对奶牛的感染情况,为临床诊断与防控提供依据。【方法】以已发表的牛弓形虫GRA6基因作为检测弓形虫病的目的基因,对上述基因各设计一对引物和一条Taqman探针,该探针5'端用荧光基团JOE标记,3'端用Eclipse标记,进行单重荧光定量PCR。【结果】经反应条件的优化,建立了能够检测牛弓形虫GRA6基因的荧光定量PCR方法。该方法具有具有较好的特异性和可重复性,对GRA6基因的检测最低限为7×100copies/反应,是普通单重PCR的灵敏度的100倍。【结论】用该方法对58份临床样品进行检测,有12份样品存在弓形虫感染,阳性检出率为20.69%,可用来对弓形虫进行快速、准确的检测。

摘要：为建立同步检测布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体的双重PCR方法,根据GenBank上公布的布鲁氏菌Bp26基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计一对特异性引物,分别扩增出219 bp和130 bp的目的片段,通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立起了能够同步快速检测布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体的双重PCR方法,该方法具有较好的特异性、可重复性和较高的灵敏性。利用该双重PCR方法对流产牛抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,共检测到布鲁氏菌感染阳性样品53份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,混合感染阳性样品2份,阳性检出率分别为30.8%、5.8%、1.2%。初步临床应用结果表明,该方法可用来安全、同步、快速、灵敏地对布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体进行检测。

摘要：为了建立同步检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体感染的多重PCR方法,根据GenBank上具有属间特异性的布鲁菌.Bp26基因、鹦鹉热衣原体23S rRNA基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计1对特异性引物。通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立了能够同时检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体的多重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性,对3种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×10~2拷贝·反应^-1,对3种病原基因同步检测的敏感性能达到3.1×10~3拷贝·反应^-1。利用该方法对采自不同流产牛的抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,检测到布鲁菌感染阳性样品53份,鹦鹉热衣原体感染阳性样品2份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,且检测到布鲁菌和鹦鹉衣原体混合感染阳性样品2份,布鲁菌和贝纳氏柯克斯氏体混合感染阳性样品2份,尚未检测到3种病原混合感染的阳性样品。结果表明,建立的多重PCR方法可以用来对奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体进行同步、快速、灵敏的检测。

摘要：为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36%。该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制。

摘要：为了建立区分检测牛新孢子虫病和弓形虫病的双重PCR方法,本研究以已发表的牛新孢子虫Nc-5基因和弓形虫GRA6基因分别作为目的基因,各设计一对引物,可分别扩增出222bp和124bp的目的条带。经优化反应条件,建立了可同时检测牛新孢子虫病和弓形虫病的双重PCR方法。该方法对上述两种基因的检测灵敏度均为103copies/反应,只比单PCR的灵敏度低10倍,且具有较好的特异性和重复性。经临床应用验证,该方法可用来对新孢子虫病和弓形虫病进行同步快速检测。

摘要：【目的】建立天然植物化妆品中3种动植物源致病菌的快速、敏感、特异的多重PCR诊断检验方法。【方法】设计肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformisin)3种菌的特异性PCR引物,通过单一、双重及三重PCR反应检测。【结果】种动植物源致病菌的单一、双重和三重PCR均成功扩增出目的片断,没有非特异性扩增。通过对人工感染膏状染发剂的PCR检测进行灵敏度验证,得出三种菌检出限:Klebsiella pneumoniae为4.5×10 CFU/m L;Pseudomonas aeruginosa为6×102CFU/m L;Bacillus licheniformisin为1×10 CFU/m L。【结论】建立的多重PCR反应系统具有较好的特异性和灵敏性,为天然植物型化妆品中常见致病菌的检测提供了快速、简便、可靠的方法。

摘要：为建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法,本研究根据BVDV 5＇-UTR区序列设计引物和荧光标记探针,通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增获得内标模板,经体外转录得到可以作为内标物的cRNA。经反应条件的优化,建立了BVDV内标双重TaqMan荧光RT-PCR检测体系。结果表明：当cRNA浓度为103拷贝/μL时,二者均有较好的扩增曲线;该方法对I型BVDV的检测灵敏度为0.25 TCID50,对II型BVDV的检测灵敏度为2.5 TCID50;利用该方法对猪瘟病毒等其他相关核酸的检测结果均为阴性;重复性检测Ct值变异系数为0.54~4.73。对506份临床样品检测,结果有23份样品为阳性,阳性样品检出数量和编号与不含内标的单一荧光RT-PCR方法完全一致,表明该方法可以用来对BVDV进行准确、快速检测,并且可以对检测结果进行质量监控。