摘要：目的:探讨狭窄空间气体中毒急救药品库的构建及其数字化管理数据库的需求分析和设计方案,规范急救用药,提高基层单位气体中毒伤者的救治水平,完善救治预案。方法:该系统拟采用浏览器/服务器(B/S)模式,按照现有救灾和突发公共事件处置标准、急救流程和预案,设计狭窄空间气体中毒急救药品库架构图,探讨狭窄空间气体中毒急救药品库数字化管理等,并制成数据库软件单机操作光盘。结果:所构建狭窄空间气体中毒急救药品库数据库设计方案符合需求,有毒、有害气体中毒救治机制科学合理,数字化管理技术设计方案规范可行。结论:探讨狭窄空间气体中毒急救药品库的构建和数字化管理,可对研究此类中毒事故救灾和突发公共事件处置具有一定借鉴意义。

摘要：目的表达纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7的紧密黏附素（intimin）及突变体intiminN916Y，并构建其转位紧密黏附素受体（translocatedint intin receptor，Tir）结合片段（intiminbinding domain，Tir-IBD），通过BIACore技术检测紧密黏附素及突变体intiminN916Y与***蛋白质相互作用特性的变化，探索特定氨基酸的突变对其黏附结合功能的影响。方法设计引物采用PCR法自EHEC0157：H7基因组扩增Tir—IBD的编码基因tir-~d，TA克隆后构建原核表达质粒pET-21a（＋）-tir—ibd，经测序鉴定后转化最coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，PAGE检测。目的蛋白经***亲和纯化后，再用阴离子交换柱ResourceQ和分子筛柱Superdex200进行纯化。同时按包涵体复性后纯化的方案制备紧密黏附素及突变体intiminNgl6Y，将所得高纯度目的蛋白Tir-IBD适当稀释后耦联BIACore3000配套的NTA芯片，在25℃和37℃条件下分别以紧密黏附素及突变体***916Y作为流动相进行BIACore检测。结果EHEC0157：H7基因组扩增出了约270bp的目的片段；原核表达质粒pET-21a（＋）-tir-ibd经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化EcoliBL21（DE3）后IPTG诱导目的蛋白表达率约15％；PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（肘，）约10x103，破菌后电泳证实目的蛋白为可溶表达。Ni-NTA亲和纯化和阴离子交换纯化效果明显，高纯度的Tir-IBD蛋白耦联NTA芯片，在25℃和37℃条件下对紧密黏附素及突变体intiminN916Y与＇***相互作用的BIACore检测结果显示，intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。结论EHEC0157：H7的紧密黏附素、突变体intiminN916Y及Tir-IBD经基因克隆后获得了较好的表达，纯化后获得高纯度的目的蛋白。在此基础上建立了蛋白相互作用的BIACore检测体系，证明intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。

摘要：近年来，随着我国各种地震、煤矿等灾害事故的频发，形成的各种各样的狭窄空间，其对人体伤害越来越得到人们的重视，使狭窄空间医学也得到一定程度的发展，其中有毒有害气体中毒的防治措施研究是很重要的一个部分。另外，在军队各类武器装备科研试验任务中形成了纷繁复杂的试验环境，

摘要：目的评价荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）在生殖器疱疹（GH）诊断和分型中的应用。方法以单纯疱疹病毒（HSV）-1 DNA多聚酶基因和HSV-2糖蛋白D基因为靶基因区,设计合成正向、反向引物和探针,分别对HSV-1和HSV-2进行FQ-PCR检测,优化反应体系,进行方法学评价,并对疑似GH患者的生殖器棉拭子标本采用FQ-PCR进行检测和分型。结果建立的FQ-PCR对HSV检测和分型具有特异性;线性范围好（标准品的浓度为5×10^2～5×10^8 copies/ml,r=0.998）;灵敏度达到5×102 copies/ml;重复性较好,批内CV值为2.29%,批间CV值为4.76%。186例患者HSV阳性44例,阳性率为23.7%（44/186）;其中44例阳性者中HSV-1 8例（占18.2%）,标本病毒载量为8.5546×10^6 copies/ml,HSV-2 36例（占81.8%）,病毒载量为1.9 861×10^6 copies/ml。FQPCR与PCR法的HSV检出率与分型检测结果一致。结论建立的FQ-PCR方法具有高特异性和敏感性,分型、定量准确,方法快速、简便,可用于GH的诊断和分型。

摘要：目的 荧光定量聚合酶链反应（FQ PCR）用于单纯疱疹病毒（HSV）分型检测的方法学评价及其初步应用.方法 以HSV-1 DNA多聚酶基因和HSV-2糖蛋白D基因为靶基因区,设计合成正向引物、反向引物和探针,采用FQPCR分别检测HSV-1和HSV-2标准株,对FQ-PCR进行方法学评价,并与病毒分离培养法相比较. 结果 建立的FQ-PCR对HSV检测和分型具有特异性;线性范围好（标准品的浓度在5×10^2 ～5×10^8 copies/ml,r=0.998）;灵敏度达到5×10^2 copies/ml;重复性较好,批内CV值为2.3％,批间CV值为4.8％.对120份生殖器棉拭标本用FQ-PCR和分离培养法进行分型检测,FQ-PCR的阳性率为25.8％,高于分离培养法的阳性率20.0％ （P＜0.05）. 结论 FQ-PCR方法具有快速、特异性好、敏感性高的优点,且分型准确,可用于HSV感染的早期诊断和分型.