摘要：本文建立了甘蔗花叶病毒(SCMV)RT-LAMP可视化检测方法。针对甘蔗花叶病毒的cp基因保守区设计引物,建立并优化了特异性检测甘蔗花叶病毒的高灵敏度RT-LAMP反应体系。所优化的SCMV RT-LAMP方法灵敏度高,对于SCMV cp基因的最低检测量为20 fg,可从简单提取的甘蔗总RNA中检出病毒核酸。研究结果表明所建立的针对SCMV的RT-LAMP体系具有特异性强、灵敏度高、操作简单和快速的特点,在实际检测中展示出良好的应用前景。

摘要：为加强SrMV在蔗区的流行动态监控,本研究建立了反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法。实验中针对SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)保守序列设计特异性引物,构建了含CP基因的标准质粒用于RT-LAMP反应体系的优化,并采用实时浊度仪和优化的荧光可视化检测方法进行了特异性、敏感性及符合性实验。结果显示,RT-LAMP方法特异性强,可检测到的标准质粒的最低量为2.02 fg,其灵敏度是RT-PCR的100倍,对田间样品的检测结果与RT-PCR相符。建立的RT-LAMP方法特异性强、灵敏性高、操作简便,可用于甘蔗健康种苗中SrMV的检测及蔗区中SrMV流行动态监控。