摘要：本文首次在国内建立了PCR/RFLP法检则宫颈癌组织中的P^(53)基因杂合性丢失,以P^(53)基因外显子4中72密码子两侧设计的一对引物进行PCR扩增,产物为162bp。在BSH12361限制性内切酶消化下,8％聚丙烯酰胺凝胶电泳,EB染色,PFLP分析,观察20例宫颈癌组织中有5例为杂合性丢失,1525％(5/20)。该法需微量的标本DNA和快速的特点。PCR/RFLP检则肿瘤组织中的P^(53)基因杂合性丢失方法的建立,将有利于宫颈癌癌变原理研究,并为肿瘤防治新手段的出现,提供新的线索和依据。

摘要：目的旨在获得无转化活性而保留抗原性的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７Ｃ端，为进一步研制抗ＨＰＶ１６疫苗打下基础。方法应用自行设计合成的引物进行ＰＣＲ扩增ＨＰＶ１６Ｅ７Ｃ端亚基因片段，并克隆入真核表达载体ｐＬＮＣＸ。结果准确获得含有Ｅ７Ｃ亚基因片段的重组质粒ｐＬＮＣＥ７Ｃ，将ｐＬＮＣＥ７Ｃ转染Ｂ１６细胞。对Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性克隆应用Ｅ７多抗进行免疫组织化学方法检测，检出Ｅ７Ｃ的表达。结论所构建的表达质粒适于ＤＮＡ疫苗的制备。

摘要：拟从分子生物学水平探讨肺癌的早期诊断问题。实验采用ｐ５３基因中第６，７，８外显子各设计一对引物，对３４例肺癌手术标本进行聚合酶链反应扩增（ＰＣＲ），产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行单链构象多态性分析（ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄ－ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｏｒ－ｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ），发现３０例发生突变，突变率为８８．２％，其中鳞癌１０／１２例，腺癌８／１０例，小细胞癌３／３例，大细胞癌１／１例，肺泡细胞癌５／５例，腺鳞癌３／３例。在突变的１例鳞癌中同时伴有杂合性缺失。统计学分析表明，ｐ５３突变与组织分型、分化程度、临床分期及吸烟史无密切相关。提示ｐ５３突变在肺癌发生过程中起某种作用，可能主要影响肺癌发生的早期。本实验还运用多重引物ＰＣＲ方法对３４例肺癌标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶＤＮＡ）检测，发现４例阳性，且皆为鳞癌；而其中３例检测出ｐ５３突变。

摘要：本研究于国内首次建立了人乳头瘤病毒／沙眼衣原体两对引物ＰＣＲ技术，即ＨＰＶ／ＣＴ双重引物ＰＣＲ。将设计在人乳头瘤病毒（Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６型早期基因Ｅ１保守区的一对共有引物和设计在沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ，ＣＴ）隐蔽质粒区的一对引物同时加入同一反应体系，一次反应可同时检出泌尿生殖道标本中存在的ＨＰＶ和ＣＴ的单独或混合感染；对设计的两对引物做了敏感度、特异性试验。结果表明，０．１ｆｇＨＩＺＰ－ＨＰＶＤＮＡ及１～２个拷贝的沙眼衣原体即可被检出，且只对ＣＴＬ２ＥＢ血清型及ＨＰＶ６、１１、１６、１８型ＤＮＡ有扩增产物出现，而对人基因组ＤＮＡ、ＨＣＭＶＤＮＡ、ＨＳＶ－２ＤＮＡ、大肠杆菌Ｍ１０９ＤＮＡ、奈瑟氏淋球菌ＡＴＴＣＣ２９４０２ＤＮＡ、解脲支原体Ｔ８ＤＮＡ无扩增产物；并用该方法对２９例临床标本（１８例尖锐湿疣、１１例宫颈癌）中的ＨＰＶ和ＣＴ感染进行了检测，同时用ＨＰＶ多重引物ＰＣＲ对２９例病理确诊后标本中ＨＰＶ感染进行了对比检测；用ＣＴ－ＭＯＭＰ蛋白基因区单重引物ＰＣＲ对１８例尖锐湿疣的ＣＴ感染进行了对比检测。结果表明，ＨＰＶ和ＣＴ相应的两种检测方法的检测?