摘要：为了建立快速、敏感、特异的小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)活疫苗中病毒含量的检测方法,本研究根据GenBank数据库中登录的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)基因序列设计合成特异性引物,采用RT-PCR扩增PPRV基因片段,并克隆至pUC57载体上,构建标准品质粒p UC57-N-PPRV,再采用SYBR GreenⅠ染料法进行实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测,绘制标准曲线并进行特异性、稳定性和重复性试验,同时应用于检测4批不同厂家生产的PPR活疫苗病毒含量。结果显示,用该方法检测病毒含量为2.61×10^(1)~2.61×10^(9)copies/μL的标准品,各稀释度质粒拷贝数与C_(t)值之间呈良好的线性关系,且相关系数高(R^(2)=0.999),说明引物特异性强。4批不同厂家生产的PPR活疫苗的病毒含量水平差异显著(P<0.05)。结果表明,该方法具有耗时短、灵敏度高、特异性强且稳定等优点,可用于检测PPR活疫苗中病毒含量水平。