摘要：为建立一种能够快速、灵敏、特异的检测甘蔗杆状病毒(sugarcane bacilliform virus,SCBV)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,针对SCBV的基因序列,设计了特异性扩增引物,利用构建的标准品建立和优化针对SCBV的荧光定量PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、稳定性、灵敏性等的测试,随后用于田间样品的检测。结果表明:将含有SCBV基因组序列的重组质粒进行梯度稀释制成标准品,利用标准品进行荧光定量PCR,获得标准曲线y=-3.4821x+37.264,相关系数r^2=0.9999,说明CT值与反应起始模板数量呈线性关系,可进行准确定量;组内和组间变异系数在0.19%~1.68%之间,表明检测方法重复性良好;建立的荧光定量PCR方法最低可检测到10个拷贝重组质粒/μL,是常规PCR检测灵敏度的100倍。使用建立的荧光定量PCR方法和常规PCR方法对采集的90份甘蔗叶片样品进行检测,常规PCR检出53份阳性样品,荧光定量PCR检出56份阳性样品,表明所建立的荧光定量PCR方法较常规PCR敏感性高,且准确性高。本研究建立的SCBV荧光定量PCR检测方法重复性好,灵敏度高,为构建甘蔗健康种苗体系提供了一种高效检测方法。

摘要：为加强SrMV在蔗区的流行动态监控,本研究建立了反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法。实验中针对SrMV外壳蛋白(coat protein,CP)保守序列设计特异性引物,构建了含CP基因的标准质粒用于RT-LAMP反应体系的优化,并采用实时浊度仪和优化的荧光可视化检测方法进行了特异性、敏感性及符合性实验。结果显示,RT-LAMP方法特异性强,可检测到的标准质粒的最低量为2.02 fg,其灵敏度是RT-PCR的100倍,对田间样品的检测结果与RT-PCR相符。建立的RT-LAMP方法特异性强、灵敏性高、操作简便,可用于甘蔗健康种苗中SrMV的检测及蔗区中SrMV流行动态监控。

摘要：试验旨在研究添加不同水分对全株构树发酵饲料的营养成分和发酵品质的影响。试验采用单因素试验设计,分为4组,液料比分别为0.5 (Ⅰ组)、0.8 (Ⅱ组)、1 (Ⅲ组)和1.4 mL/g (Ⅳ组),每组3个重复。发酵60 d,取样测定营养成分和发酵品质。结果显示:Ⅲ组发酵饲料的质地、气味均优于其他组,感官总评分最高,等级为优。Ⅰ组发酵饲料的pH值、乙酸含量均显著高于其他组(P<0.05)。Ⅲ组发酵饲料的酸溶蛋白、乳酸含量均显著高于其他组(P<0.05)。Ⅲ组发酵饲料的氨态氮/总氮显著低于其他组(P<0.05)。随水分增加,各组发酵饲料的干物质含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅲ组发酵饲料的中性洗涤纤维含量显著低于其他组(P<0.05)。Ⅲ组发酵饲料的酸性洗涤纤维含量显著低于Ⅱ组(P<0.05),酸性洗涤木质素含量显著低于Ⅳ组(P<0.05)。研究表明,液料比为1 mL/g时,能够明显改善全株构树发酵饲料的质量。

摘要：试验研究添加糖蜜、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌和纤维素酶对全株构树青贮饲料营养成分及发酵品质的影响。采用单因素试验设计,设置5个处理组,分别为对照组、添加10%糖蜜组(试验Ⅰ组)、添加10%糖蜜+8%植物乳杆菌+1%纤维素酶组(试验Ⅱ组)、添加10%糖蜜+4%植物乳杆菌+4%产朊假丝酵母菌+1%纤维素酶组(试验Ⅲ组)和添加10%糖蜜+4%植物乳杆菌+4%枯草芽孢杆菌+1%纤维素酶组(试验Ⅳ组),每组3个重复。青贮发酵50 d后进行营养成分和发酵品质测定。结果显示,与对照组相比,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的酸香味更浓,总评分较高。各试验组间pH值和氨态氮/总氮(AN/TN)均显著低于对照组(P<0.05),且以试验Ⅲ组最低。相比对照组,各试验组酸溶蛋白和乳酸含量均显著提高(P<0.05),且以试验Ⅲ组最高。各试验组乙酸含量均显著低于对照组(P<0.05),试验Ⅱ和Ⅲ组的丙酸含量显著低于其他各处理组(P<0.05)。与对照组相比,各试验组干物质(DM)含量均显著提高(P<0.05),中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量降低(P<0.05),其中试验Ⅲ组和试验Ⅳ组酸性洗涤木质素(ADL)含量均显著低于对照组、试验Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组粗蛋白(CP)含量均显著提高(P<0.05)。研究表明,全株构树青贮饲料品质以组合添加糖蜜、植物乳杆菌、产朊假丝酵母菌和纤维素酶发酵效果最佳。

摘要：试验研究不同添加量的混合菌剂(产朊假丝酵母菌和植物乳杆菌,比例1∶1)对全株构树发酵饲料营养成分及发酵品质的影响。采用单因素试验设计,设置4个组,混合菌剂添加量分别为2%(Ⅰ组)、6%(Ⅱ组)、8%(Ⅲ组)和12%(Ⅳ组),每组5个重复。发酵30 d。结果显示,Ⅲ组和Ⅳ组发酵饲料的气味均比Ⅰ组和Ⅱ组酸香味浓,总评分最高。各组发酵饲料的pH值和乙酸含量差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组和Ⅳ组发酵饲料的酸溶蛋白和乳酸含量显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05),氨态氮/总氮(NH_(3)-N/TN)值和丙酸含量显著低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组和Ⅳ组发酵饲料的干物质(DM)含量显著低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组发酵饲料的酸性洗涤纤维(ADF)含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。研究表明,按1∶1混合添加产朊假丝酵母菌和植物乳杆菌的最佳添加量为8%,可以显著改善全株构树发酵饲料的品质。

摘要：试验探究单独或混合添加植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌对全株构树青贮饲料品质的影响。试验采用单因素设计,分为5个试验组,分别为对照组、添加8%植物乳杆菌组(Ⅰ组)、混合添加8%植物乳杆菌+产朊假丝酵母菌组(1∶1,Ⅱ组)、混合添加8%植物乳杆菌+枯草芽孢杆菌组(1∶1,Ⅲ组)及混合添加8%植物乳杆菌+产朊假丝酵母菌+枯草芽孢杆菌组(1∶1∶1,Ⅳ组),每组3个重复。青贮发酵50 d。结果显示,Ⅱ组青贮饲料感官评定总评分最高,等级为优。Ⅱ组青贮饲料氨态氮/总氮显著低于对照组和Ⅳ组(P<0.05)。Ⅱ组青贮饲料乳酸含量显著高于其他各处理组(P<0.05)。Ⅱ和Ⅲ组青贮饲料丙酸含量均显著低于对照组(P<0.05),Ⅱ组青贮饲料丙酸含量显著低于Ⅲ组(P<0.05)。Ⅲ组青贮饲料干物质含量显著高于其他各处理组(P<0.05)。Ⅳ组青贮饲料粗蛋白含量显著高于对照组和Ⅰ组(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组青贮饲料中性洗涤纤维含量显著低于对照组(P<0.05),且三者之间差异显著(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组青贮饲料酸性洗涤纤维含量显著低于对照组(P<0.05)。试验表明,添加植物乳杆菌和产朊假丝酵母菌进行全株构树青贮,可以提高青贮品质,获得优质全株构树青贮饲料。