摘要：为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)体外诱导表达的MGF360-13L蛋白,试验依据GenBank中报道的MGF360-13L基因序列设计引物,引入His标签,以ASFV全序列为模板扩增目的片段。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中进行体外诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白质的表达情况,将表达的重组蛋白通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化,蛋白质印迹(Western-blot)分析蛋白质的活性。结果表明:克隆得到的MGF360-13L基因片段长度为1060 bp,获得的重组蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达,分子质量约为60 ku,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,用BCA法测定最高浓度为2.73 mg/mL。Western-blot检测结果显示在60 ku处有一条明显的特异性条带说明MGF360-13L蛋白可以在BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中表达并纯化,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,且具有良好的反应原性。

摘要：为获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)体外诱导表达的MGF505-3R蛋白。实验依据GenBank中报道的MGF505-3R基因序列设计引物,引入His标签,以ASFV基因全序列为模板扩增目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,并转入大肠杆菌Transetta(DE3)中。用1 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达菌体,分别取上清液和沉淀进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分析。将表达的蛋白经过Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化。免疫印迹实验(Western-blot)分析蛋白的活性。克隆得到的MGF505-3R基因片段长度为843 bp,与原序列一致。蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达,相对分子质量约为53 ku。纯化后可得到纯度较高的MGF505-3R重组蛋白。免疫印迹实验结果呈阳性。MGF505-3R蛋白可以在大肠杆菌Transetta(DE3)中表达并纯化,蛋白具有良好的表达活性。近几年,多基因家族(Multigene Families,MGFs)基因缺失疫苗被认为是目前ASF疫苗研制的主要方向,本研究获得的MGF505-3R重组蛋白将为ASFV MGF505-3R蛋白的研究提供基础,也为基因缺失疫苗相关免疫学方面的检测提供前期技术储备。

摘要：通过研究总结出一套沼气发酵罐的冬季增温保温技术,设计出了理想的BZ2007型金属沼气发酵罐,总结出适于北方冬季干发酵,春、夏、秋稀发酵的沼气生产工艺流程;同时掌握了一般农户沼气需要量和季节产气量的关系。通过生产沼气实现舍外净化的目的。

摘要：本文针对生猪以农户经营为主、人畜不分的现状，在吉林省牧业局立项，提出了兴建规模高效养猪小区，进行优质安全肉猪生产的发展思路，开展了小区规划设计与建设，带动公主岭市小区发展；对猪肉品质评定方法和猪肉胴体分级标准进行深入研究，制定了胴体分级标准；对夏季不同结构育肥猪舍小气候环境、北方冬季规模猪场非供热猪舍小气候环境猪等合内参数进行了深入研究；开展了寒冷地区冬季生产沼气的技术研究，建立了生猪养殖、清洁生产、加工、技术服务四大技术体系，依靠自有成果，推广I8项科技成果，促进县域经济发展。