摘要：旨在利用二代靶向测序技术比较不同靶区对CRISPR/Cas9基因编辑结局的影响,为该技术应用过程中的靶区筛选提供技术参考。本研究进行如下试验:1)以小鼠Pyk2基因为研究对象,针对其第一外显子区设计3个靶区,通过打靶质粒构建、细胞转染及转染细胞DNA二代靶向测序等手段发现,不同靶区总体的基因编辑(Indels)效率相差较大(site1:32.0%;site2:7.9%;site3:69.5%),编辑修复的偏好性也存在较大区别;而对于同一靶区,总编辑效率在2组试验重复中较为稳定(site1:31.8%vs 32.3%;site2:7.4%vs 8.4%;site3:71.3%vs 67.8%),编辑的偏好性也相对一致;2)针对上述筛出的最佳靶区site1,通过sgRNA与Cas9体外转录、小鼠胚胎显微注射和移植及子代的基因型鉴定等手段,结果发现,上述靶区的基因编辑偏好性在基因编辑动物生产中也得到证实;3)利用上述得到的site1靶区插入一个碱基的突变小鼠,在原靶区位置设计与site1仅相差一个碱基的sgRNA。通过突变小鼠基因组PCR和Cas9酶体外切割试验发现,靶区切割位点单碱基的插入就对该靶区编辑的效率产生显著影响(49.2%vs 0%)。综上所述,靶区选择对CRISPR/Cas9基因编辑的结局影响显著,通过二代靶向测序可以有效筛选CRISPR-Cas9基因编辑靶区,并在模式动物生产过程中也获得较好的结果。此外,针对靶区切割位点的单个碱基插入对基因编辑效率影响显著。

摘要：基于传统行业——水暖卫浴产业面临的挑战背景、现状、瓶颈,受到主客观条件影响,以及需要转型升级而提高产品质量的要求,建议利用统一认识"工业4.0暨中国制造2025"的机遇期,设立政府专项资金,集中资源优势支持"*目标企业"试点,将工艺改良路线图结合产业特性,推动大数字、网络化、智能化制造、创新设计能力等行"弯道超车"之举,实现转型,达到产品质量提升的目的,从而促进产业进步。

摘要：科学的考试模式是评价学生学习效果的最佳途径。在公差与配合课程的建设中,根据职业能力培养目标的要求,采取科学的评价方式,通过合理地设计试题,充分地发挥考试的督导功能和教育教学功能,极大地调动教学双方的积极性和主动性,提高公差与配合课程的教学质量,为学生进一步掌握专业知识打下坚实的基础。

摘要：首先介绍了汽车座椅计算机辅助设计的一般过程。通过建立七自由度汽车动力学模型，对汽车座椅平顺性进行了仿真计算，并对座椅刚度、阻尼进行了优化；提出了汽车座椅外观尺寸的选择原则和汽车座椅强度计算的一般途径；阐述了基于ＡｕｔｏＣＡＤＲ１２．０的汽车座椅参数化绘图软件的开发方法。

摘要：引言 对于我国的高等级公路沥青路面，无论采用哪种级配表面层，水进入沥青面层后，在大量高速行驶车辆，尤其是重型载重车作用下，经常会产生各种不同的水破坏现象，并且破坏速度之快，危害之大，已经成为高等级公路路基、路面破坏的主要因素。水损害是指沥青路面在水或冻融循环的作用下，

摘要：FCS2000现场总线控制系统是一种建立在SCADA基础上的通用综合性控制系统。介绍FCS2000系统在除尘控制中的实际应用,同时通过对系统的整体配置、自动控制系统的论述,给出了一种集散控制系统实际应用的设计方案。

摘要：结合云南保山蒲赛公路水长河临时桥的预应力张拉过程,研究锚外控制应力和伸长值计算的方法。预应力钢绞线的锚内与锚外控制应力不等的原因:波纹管的偏摆系数和摩擦系数的增大和锚具夹片损失系数等。根据设计图纸的预应力钢绞线锚内控制应力计算锚外控制应力,选取合适的控制应力计算伸长值。

摘要：随着数据存储和处理需求的大量增加,数据中心已被广泛应用于各种重要行业。随着数据中心、网络交换中心、金融计算中心、重要的系统管理中心和重要的商业部门不断增加使用要求。数据中心可用性参数是数据中心用户关注的主要指标之一,这些指标直接反映了数据中心的性能。与此同时,数据中心的参数也是向客户提供高成本决策而不是数据中心的重要基础之一。研究目前的情况和影响数据中心可用性的因素,总结文件中的信息。利用数据中心研究电力分配系统,开发中心和计算信息中心的应用方法被开发和计算信息中心开发,以确保分配系统的可用性。为了提高数据中心信息的效率和准确性,数据中心必须选择根据不同要求选择的替代营养。

摘要：职业技能竞赛对职业教育有重要的推动与促进作用。它是职业学校核心竞争力水平的展示平台。是课程体系设置与优化的重要依据，是提升师资水平的重要手段，是校企合作的重要基点。对教育教学模式创新、专业设置、课程体系及内容改革有重要现实意义。彻底改变了传统的学科型教学模式，开展了以课堂、教师、教材为中心的教学方法．实现了课堂教学与就业岗位的零距离对接。

摘要：介绍一种用数据选择器和译码器的组合优化逻辑设计的方法 .该方法可减少数据选择器芯片及门电路使用的数量