摘要：本试验旨在采用CRISPR/Cas9技术获得整合素αV(IntegrinαV,ITGαV)及整合素β3(Integrinβ3,ITGβ3)基因敲除的猪睾丸(Swine testicle,ST)细胞系,进而在细胞水平上研究ITGαV及ITGβ3在猪δ冠状病毒(Porcine deltacorovirus,PDCoV)入侵过程中的作用及相互作用机制。根据GenBank上猪的ITGαV及ITGβ3基因序列分别设计三对引导RNA(sgRNA),并整合到LentiCRISPR‐V2载体上,与辅助质粒pSPA×2及pMD2.G共转染293 T细胞进行慢病毒包装,包装完成后感染ST细胞并用嘌呤霉素进行压力筛选。用T7酶进行酶切检测,选出编辑效率较高的细胞群体,进一步用有限稀释法筛选出单克隆敲除细胞系。对分离出的ST‐ITGαVKO(敲除ITGαV基因的ST细胞)及ST‐ITGβ3KO(敲除ITGβ3基因的ST细胞)的单克隆细胞系进行测序和Western Blotting鉴定,结果显示ITGαV与ITGβ3均被成功敲除。采用敲除细胞系进行PDCoV感染试验,结果表明敲除ITGαV、ITGβ3基因均可抑制PDCoV在ST细胞内的增殖,成功构建的ST‐ITGαVKO及ST‐ITGβ3KO细胞系为后续阐明ITGαV、ITGβ3在PDCoV入侵过程中的作用提供了细胞模型。

摘要：猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)属于星状病毒科,是哺乳动物星状病毒属家族成员,临床上主要引起仔猪呕吐、腹泻等症状,且常与其他病原混合感染。PAstV衣壳蛋白(capsid protein,Cap)与宿主细胞受体结合,诱导机体产生中和抗体,是开发PAstV疫苗的靶蛋白。为制备抗猪星状病毒5型衣壳蛋白的兔源多克隆抗体,本研究通过DNA Star软件对PAstV5 Cap进行抗原性分析,选择出抗原优势区域ORF2开放阅读框1~642 bp(642 bp),构建原核表达质粒pET32a-Cap-642,测序结果正确后将其转化至大肠杆菌Rosetta。经IPTG诱导,重组蛋白以包涵体形式表达,大小约为43 ku。重组蛋白经尿素透析法纯化,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。间接ELISA方法测定多克隆抗体效价为1∶51 200,间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western-blot)结果显示抗PAstV5 Cap多克隆抗体能够特异性地识别PAstV5感染猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)中表达的天然抗原;同时将抗PAstV5 Cap多克隆抗体进行了初步应用,结果表明该多抗具有良好反应性。本研究为PAstV5检测方法的建立以及PAstV5衣壳蛋白功能的研究奠定了基础。

摘要：电动汽车能量及行驶距离是其重要参照数据,为提高两项性能策略优化,根据ECER13法规曲线和I线的再生制动控制方法,可以在前、后轴之间进行分配以确保车辆的安全性和稳定性;其次,在液压制动和电动机制动之间进行分配,根据不同的制动强度,分为四类进行研究;最后建立模型,嵌入到AVL_CRUISE软件中,选用NEDC和CLTC_P两种工况联合仿真。结果表明,此方案可满足制动稳定性的需求,其动力分配曲线也契合相应的制动特征,能够高效地回收制动能量,强化电池荷电状态(SOC),提升电动汽车的续驶能力。

摘要：目前对高性能与高稳定性的电催化剂进行精准合成仍然是亟待解决的问题。熵作为是最重要的热力学参数之一,是描述体系无序程度的物理量,其数值主要由材料的结构、磁矩、原子和电子振动共同决定。根据体系的构型熵值,我们通常将材料分为低熵材料(ΔS_(mix)1.5R)。随着熵值的增加,材料本征的物理与化学性质也会随之发生相应的变化。得益于不同金属元素的共存,在界面处原子级的多组分排列,所产生的协同性高熵效应能够有效地提升电催化反应的活性,因此在电催化领域中得到了广泛的研究关注。本综述对高熵电催化剂的基本概念、合成路线(“自上而下”与“自下而上”)以及在不同电催化反应类型中的高熵材料结构与性能之间的构效关系进行了系统总结,主要包括析氢(HER)、析氧(OER)、氧还原(ORR)、醇氧化(AOR)、氮还原(NRR)和二氧化碳还原反应(CO_(2)RR)等,从而阐明熵增工程对高性能电催化剂设计与应用的优势与潜力。同时,针对目前高熵催化剂研究所面临的主要问题与挑战,对未来基于熵增工程的高熵电催化剂的设计思路与合成方法进行展望。

摘要：当代生活世界的文学审美和消费显示出与此前时代文学现象不同的意义品质,这种意义品质要求我们从交往论的视野来探寻其合理性维度,明晰其价值指向。借助哈贝马斯前期对于文学公共领域的探讨和后期"戏剧行为"的言语交往活动的阐述,可以将文学交往的内涵明晰为:平等主体之间以文学为媒介,在语感形式的共契、情感的共鸣、意义的共识三个层面达成的交往型意义活动。当代生活中的文学交往在日常消费的审美活动中完成了主体之间的理解和共契,为克服现代性分裂的"解分化"路径打开了一个可能维度。

摘要：在钾离子电池石墨负极中,钾离子在石墨层间嵌入/脱出的模式能够实现储能,且具有较低工作电位和廉价等优势,表现出巨大的吸引力.然而,在缺乏足够界面保护等条件下,石墨负极在传统碳酸酯类电解液中容易发生连续的副反应,充放电容量会面临严重的持续衰减.本文从电解液设计的角度出发,针对石墨负极的钾离子存储问题,配制了阻燃的局部高浓度电解液,其特有的溶剂化结构可调控石墨表面固体电解质界面相,改善界面的结构稳定性和离子传导特性,从而实现石墨负极储钾的高稳定循环.同时,电解液的高阻燃特性也为钾离子电池的高安全性提供了保障.

摘要：目的退行性腰椎侧凸多并发于腰椎间盘突出、椎间关节退变及椎管狭窄等,是临床常见的脊柱畸形,进一步分析了解其临床特点,从而讨论其手术治疗方案。方法收集该科2003年8月至2010年8月的48例患者,通过了解其临床表现,分析影像学资料特征,从而探讨临床治疗方案。结果在了解退行性腰椎侧凸的基础上,根据病例不同特点而设计个性化治疗方案,取得了较好的临床疗效。结论重新认识退行性腰椎侧凸,应根据患者的临床特点、病变节段、椎管狭窄状况、椎体旋转程度、腰椎侧凸角度及腰椎失稳情况评估手术疗效,制定个性化的治疗方案。

摘要：采用植物叶总RNA提取试剂盒提取康宁木霉总RNA,利用依据木霉cbh2基因序列设计合成的一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到了康宁木霉cbh2基因cDNA,并成功转入大肠杆菌.序列测定结果表明该基因序列与已公布的木霉cbh2基因的同源性最高可达91.93%.

摘要：根据番茄溃疡病菌ITS序列,设计并合成了PCR-DHPLC检测引物,对番茄溃疡病菌及其他病菌共10个标准菌株进行了PCR-DHPLC检测。结果表明,番茄溃疡病菌的PCR-DHPLC检测图谱出现了特异性吸收峰,而其他病菌均未在相同洗脱时间出现吸收峰,说明这种方法具有检测番茄溃疡病菌的特异性。灵敏度实验结果表明,PCR-DHPLC体系与PCR-琼脂糖凝胶电泳体系的检测灵敏度一致。研究表明,PCR-DHPLC方法是一种特异、灵敏、快速的番茄溃疡病菌检测方法。

摘要：在电力部门日常检修工作中,大型电力设备需要定期进行模块化检修,其中,冷凝器作为装置散热的核心部件,其检修工作十分重要,针对其体积大,重量大的特点,本文提出了一款能够代替人力对冷凝器进行推拉操作的冷凝器检查装置,以期达到节省人力,提高检修效率的目的。