摘要：本试验旨在构建用于核酸适配子筛选的随机寡核苷酸文库并对筛选过程中的PCR条件进行优化。利用Primer Premier 5.0构建了随机寡核苷酸文库并据文库两端固定序列设计引物,对对称PCR和间接不对称PCR中的上、下游引物的比例、模板量、退火温度、循环数等条件进行优化并验证其重复性,得到了对称PCR和间接不对称PCR的最佳反应条件,获得较理想的dsDNA和ssDNA并具有良好的重复性。本试验成功构建了寡核苷酸文库,优化了PCR条件,为适配子筛选和后续试验奠定了一定的基础。

摘要：使用新型小动物口鼻暴露系统检测了叶菌唑原药对大鼠的急性吸入性,求出了半数致死浓度(LC50),为急性吸入毒性划分等级提供试验依据。参照OECD化学品测试导则,以SD(Sprague Dawley)大鼠为实验动物,设计浓度分别为5000mg/m^3、2000mg/m^3、1000mg/m^3和0mg/m^3。根据叶菌唑物理与化学性质对其进行前处理,利用新型口鼻暴露系统对经过处理后的叶菌唑原药进行急性吸入毒性试验。观察实验动物一般临床症状、中毒症状及死亡情况,试验结束后对死亡的实验动物的肺部组织进行病理检查。结果表明:成功建立了叶菌唑原药新型口鼻暴露系统吸入毒性试验体系;而SD大鼠急性吸入毒性试验LC50值分别为:雄性2418 mg/m^3(4h),雌性2144 mg/m^3(4h);测定的粒径分布MMAD的结果为3.69μm,3.77μm,3.73μm,GSD为1.95,1.90,1.98;病理检查显示死亡实验动物出现肝脏空泡变性,肝脏细胞肥大,肺脏泡沫细胞团;根据全球化学品统一分类与标签制度(GHS)大鼠急性吸入毒性分级标准及依据《农药登记资料要求》(中华人民共和国农业部公告第2569号)中附件14的农药产品毒性分级标准,叶菌唑原药急性吸入毒性为4级,属于低等毒性,该结论为叶菌唑的安全使用提供了依据。