摘要：Ewing肉瘤是一种好发于儿童及青少年具有高度侵袭性的骨与软组织肿瘤；依靠新辅助化疗、手术及放疗等多途径联合治疗，Ewing肉瘤患者的预后及生活质量得到了明显的改善。然而，近20多年来Ewing肉瘤的治疗进入了平台期，患者的五年生存率维持在55％-75％。肿瘤的多发转移及术后复发是Ewing肉瘤患者预后差，甚至死亡的主要原因。化疗、放疗及分子靶向治疗仍是目前治疗Ewing肉瘤的主要方法。抗肿瘤药物的毒副作用、耐药性及组合方案的使用等问题一直困扰着临床工作者。对于如何提高化疗药物疗效并降低毒副反应，国内及欧美国家已针对Ewing肉瘤局部控制或复发转移的患者开展了多学科、多中心临床研究。放疗作为治疗Ewing肉瘤重要的辅助手段，治疗后患者常会出现一系列并发症，包括局部损伤或二次肿瘤的风险。因此，放疗的适应证及术前、术后放疗时机的选择还需进一步明确。目前，虽然已经发现Ewing肉瘤中存在特异性染色体易位及其易位融合基因EWS／FLI1的表达，但导致肿瘤复发及转移的具体机制仍不清楚。分子靶向治疗能通过调控EWS／FLI1上游或下游的靶向基因来抑制肿瘤的发生及发展。总之，了解Ewing肉瘤的治疗现状、多中心临床试验的成果及基因学研究理论将有助于设计新的生物疗法，从而建立个体化治疗的模式。本文就目前针对Ewing肉瘤化疗、放疗、分子靶向治疗及免疫治疗的研究进展作一综述。

摘要：背景:在大分子药物的设计中,往往需要在载体与药物之间引入新的基团,即连接基。选择合适的连接基,可以控制药物在体内的释放形式和释放速率。目的:制备和表征一种新的大分子靶向抗肿瘤药物。设计、时间及地点:观察实验,于2007-06/2008-11在南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室完成。材料:L-天冬氨酸,无水N,N-二甲基甲酰胺,BOP试剂购自美国Sigma公司,其余均为国产试剂。甲氨蝶呤由连云港恒瑞制药有限公司赠送。方法:实验把甲氨喋呤与PHEA和PHEA-suc偶联,制备琥珀酰化的α,β-聚-(2-羟乙基)-D,L-天冬酰胺-甲氨喋呤(PHEA-Suc-MTX)和α,β-聚-(2-羟乙基)-D,L-天冬酰胺-甲氨喋呤(PHEA-MTX)。主要观察指标:采用红外图谱、核磁共振、元素分析方法检测大分子靶向药物的结构,紫外分光光度法测定PHEA-Suc-MTX和PHEA-MTX中甲氨喋呤的含量。结果:PHEA-MTX和PHEA-suc-MTX的结构通过红外光谱和核磁共振分析确认。甲氨喋呤与PHEA及PHEA-suc共价偶联,其甲氨喋呤含量分别为5.80%及5.86%。结论:合成的大分子靶向药物PHEA-MTX、PHEA-suc-MTX结构稳定。

摘要：背景:寻找一种新的大分子作为靶向药物载体。目的:制备一种新型聚天冬酰胺衍生物——琥珀酰化的α,β-聚-(2-羟乙基)-D,L-天冬酰胺(PHEA-Suc)和半乳糖基化的琥珀酰化的α,β-聚-(2-羟乙基)-D,L-天冬酰胺(Gal-PHEA-Suc),对材料进行了表征,体外观察其细胞毒性。设计、时间及地点:体外观察实验,于2005-06/2007-06在南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室完成。材料:L-天冬氨酸,无水N,N-二甲基甲酰胺,乳糖酸,异硫氰酸荧光素,二甲亚砜,MTT购自美国Sigma公司;人宫颈癌细胞系HeLa和肝癌细胞系HepG2均购自上海细胞所细胞库;新生牛血清购自杭州四季青生物公司;胰蛋白酶购自美国Hyclone公司;其余试剂均为国产分析纯。方法:采用红外图谱、核磁共振、元素分析、分子量测定等方法对材料进行了表征,通过四唑盐比色法测定PHEA-suc和Gal-PHEA-suc的细胞毒性。主要观察指标:聚天冬酰胺衍生物载体的结构及细胞毒性。结果:PHEA-suc和Gal-PHEA-suc的结构通过红外光谱和核磁共振分析确认。由元素分析算得PHEA-suc和Gal-PHEA-suc的琥珀酰化度为43%(mol/mol),Gal-PHEA-suc的半乳糖基化度为7.6%(mol/mol)。PHEA-suc和Gal-PHEA-suc的体外细胞毒性分析表明,它们对HeLa和HepG2细胞生长的抑制作用很小,在浓度低于500mg/L时没有抑制作用。结论:聚天冬酰胺衍生物PHEA-suc、Gal-PHEA-suc细胞毒性低,且具有-suc活性基团和-gal靶向基团,可以作为理想的靶向药物载体。

摘要：目的探讨Livin在骨肉瘤细胞中的表达及Livin反义寡核苷酸(ASODN)对骨肉瘤细胞活性及功能的影响。方法设计针对Livin的ASODN序列,根据转染效率评价结果,选择下调作用最强的ASODN序列制备脂质体-寡核苷酸复合物并转染MG-63细胞。采用免疫细胞染色法及Western blotting检测转染24 h后MG-63细胞中Livin的表达情况,Cell TiterGlo法检测转染72 h后MG-63细胞的增殖情况,划痕法检测ASODN对MG-63细胞迁移能力的影响,流式细胞仪检测转染24h后MG-63细胞的凋亡情况和细胞周期。结果 Livin蛋白主要表达于MG-63细胞的胞质。选用下调作用最强的ASODN转染MG-63细胞后,Livin蛋白表达显著下降;不同浓度Livin ASODN对MG-63细胞的增殖及迁移有剂量依赖抑制作用;而ASODN组的凋亡率明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论靶向Livin的ASODN可以显著抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力并促进其凋亡。

摘要：目的通过总结四肢骨肉瘤化疗的随机对照多中心临床研究中大剂量甲氨蝶呤(high dose methotrexate,HD-MTX)的应用,为临床安全应用HD-MTX提供依据。方法收集2009年2月至2010年12月国内五所医院的63例骨肉瘤患者(分为实验组32例、对照组31例)。对随机对照多中心的研究中的实验组与对照组合并分析,根据实验设计行统一、规范给药并进行血药浓度监测及相应实验室检查,对HD-MTX应用的相关并发症及毒性反应进行了回顾分析。不良反应采用(the national cancer institute common terminology criteria for adverse event,CTCAE)v4.0评分系统评价肝、肾、血液学及黏膜毒性反应等。结果 63例中HD-MTX治疗共计60例,共给药186个周期,平均给药剂量为7.45 g/m2。血药浓度给药后24 h>20μm占27.9%,48 h后占1%。两组总无进展生存率为37.0%(20/54),总生存率为66.7%(36/54)。谷丙转氨酶最大值2133 mmol/L,>800 mmol/L共发生4例次(CTCAE 4度),200~800 mmol/L(CTCAE 3度)发生15例次;肌酐最大值190 mmol/L(CTCAE 2度),肾功能异常4例次(CTCAE 2度)。严重肝损害发生率为4.8%(9/186),严重肾功能损害发生率为2.2%(4/186)。死亡1例,除死亡病例外无不可逆肝肾损害发生。最早出现的不良反应为给药后1~24 h出现皮肤过敏反应,在有记录的病例中发生率为18.8%(6/32),而其余28例中I^II度骨髓抑制发生率为45%,IV度骨髓抑制发生率12%,口腔炎发生率为13.5%。出现过敏反应后的肝肾损害和骨髓抑制并发症的发生率及程度,较没有过敏反应的病例无差别。呕吐、腹胀、腹泻等不同程度胃肠道反应发生率>90%(CTCAE 1~4度)。结论本研究充分地反映了使用HD-MTX的现状,为今后更加合理应用提供了有利的数据支持,也为临床应用的安全性的提高提供了依据。

摘要：目的探讨青少年四肢长骨恶性肿瘤切除后长节段骨缺损修复重建的方法及其疗效评价。方法回顾性分析2015年4月至2019年10月共10例进行骨缺损修复重建的四肢长骨超长病灶骨恶性肿瘤患儿病例资料,其中男4例,女6例,年龄10.2岁(范围6~16岁)。骨肉瘤7例,尤文肉瘤3例;肱骨肿瘤2例,股骨肿瘤7例,胫骨肿瘤1例。肿瘤切除后骨缺损占病变骨全长的比例为80.9%(范围71.4%~89.3%)。考虑青少年涉及骨骺生长问题,手术在保证肿瘤扩大切除的前提下,采用自体腓骨移植、传统假体结合钢板、3D打印设计保留关节骨骺的超长假体,并在假体与骨结合端做3D打印骨小梁的骨长入处理,两端保留骨骺的短力臂设计辅助钢板及交锁螺钉增强稳定性。主要观察X线片及CT检查评估假体重建稳定性及骨连接端3D打印处理处骨长入情况,同时评估患者术后功能评分评价疗效。结果 10例均顺利完成手术,术中无神经、血管损伤等并发症发生。随访5~58个月,平均随访22.9个月。1例术后2年复查X线片示移植腓骨有骨吸收迹象,内固定位置良好无明显异常;2例术后1年半至2年内出现辅助钢板断裂,给予更换断裂钢板目前内固定良好。按照国际保肢学会的评估标准进行评分:2例肱骨骨肉瘤术后评分分别为23、26分,平均24.5分;4例股骨骨肉瘤及3例股骨尤文肉瘤评分分别为26、25、19、30、27、24、28分,平均25.6分;1例胫骨骨肉瘤评分为26分;均获得比较满意的治疗效果。本组10例肿瘤体积自110~367 cm3,平均224.5 cm3;病变与近侧骨端的距离平均为5.2 cm(范围0~11.3 cm);与远侧骨端的距离平均为4.2 cm(范围0~8.7 cm);。规范新辅助化疗后30%患者达到部分缓解,70%患者达到疾病稳定。保肢治疗效果良好,目前均无复发病例。结论利用3D打印与传统机加工技术相结合,制作保留骨骺的个体化长节段假体在骨恶性肿瘤保肢治疗中的合理应用可以达到良好的治疗效果。

摘要：目的肿瘤假体置换是目前治疗骨肉瘤的常用手段,功能化假体的设计和应用是目前研究的热点方向。肿瘤细胞周围微环境对肿瘤的增殖、活力和凋亡等行为起重要作用。探讨不同的官能团对细胞生物学特性影响。方法通过自组装技术在金片表面接枝不同的化学基团(-CH_3、-COOH、-NH_2、-OH),测定接触角和X线光电子谱确定其表征,采用早期扫描电镜、DAPI、CCK-8法、死/活细胞染色、流式细胞检测仪等方法观察不同官能团对骨肉瘤Saos-2细胞的黏附、增殖、活力、凋亡的影响。结果 -CH_3、-NH_2、-OH、-COOH基团的表面接触角分别为(103.0±10.1)°、(58.5±5.7)°、(13.5±0.5)°和(19.1±2.8)°。电镜下可见骨肉瘤Saos-2细胞在含有-NH_2和-COOH基团的材料表面伸展较大,细胞贴壁展开,形态不规则,大多呈梭形和盘状,细胞间突起相互连接紧密;细胞在含有-OH基团的材料表面铺展面积相对较小,细胞形态基本正常,而含有-CH3基团的材料表面细胞的黏附数量明显较少,不同的官能团对Saos-2细胞黏附、增殖率影响的顺序从大到小依次为-COOH≥-NH_2>-OH■-CH_3;而对Saos-2细胞凋亡率和毒性的顺序-CH_3■-OH>-NH_2>-COOH;不同的官能团对细胞凋亡的影响从大到小依次为-CH_3(19.1%)■-OH(7.2%)>-NH_2(4.3%)>-COOH(2.9%)。结论含有-CH_3基团的材料不利于细胞的黏附和增殖,并对细胞的凋亡有一定的促进作用。

摘要：对于复杂的髋臼骨折或陈旧性髋臼骨折,进行非手术治疗或切开复位内固定术,其治疗的效果均不满意[1].随着关节外科技术、假体材料及设计的不断改进,对于这类骨折病人,行人工全髋关节置换术,能够最大限度地保留关节功能.

摘要：目的探讨Survivin在骨肉瘤细胞中的表达及Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响。方法设计针对Survivin的ASODN和正义核苷酸(SODN)序列,制备脂质体-寡核苷酸复合物并转染MG-63细胞,分为空脂质体(Lip)组、脂质体介导的SODN(Lip-SODN)组和脂质体介导的ASODN(Lip-ASODN)组。采用免疫细胞染色法检测MG-63细胞中Survivin的表达情况,Western blotting检测各组转染48h后的Survivin蛋白水平,MTT法检测转染24、48和72h后MG-63细胞的增殖情况,流式细胞仪检测转染48h后MG-63细胞的凋亡情况。结果 Survivin主要表达于MG-63细胞的胞核。Lip-ASODN组的Survivin蛋白水平均低于Lip-SODN组和Lip组。不同浓度Survivin ASODN对MG-63细胞的增殖抑制程度不同,Lip-ASODN组的细胞增殖抑制率高于Lip组,且呈浓度依赖性;而Lip-SODN组的增殖抑制率与Lip组的差异无统计学意义(P>0.05)。Lip-ASODN组的凋亡率为(88.47±0.79)%,高于Lip组的(10.01±0.90)%和Lip-SODN组的(4.12±0.25)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向Survivin的ASODN可以显著抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力,并促进其凋亡。

摘要：我院自1995年9月至1997年12月,采用自行设计波形钢板治疗股骨干骨折48例、49个股骨干,经随访取得良好效果。 1 材料和方法 1.1 一般资料 本组48例49个股骨干骨折(1例为双侧股骨干骨折)中,男42例,女6例。年龄从20～55岁,平均32.5岁。骨折部位:股骨上1/3骨折11例,中1/3 24例,下1/3 14例。骨折类型:横形骨折X例,粉碎性骨折15例,斜形骨折12例。骨折原因:38例为车祸,8例为重物砸伤。