摘要：目的构建基于sacB负筛选标记的Targetron质粒分析系统。方法构建sacB毒蛋白诱导表达受体质粒pACYC-sacB(携带p15A复制子),分析sacB毒蛋白对大肠埃希菌的毒性。设计sacB基因打靶位点,构建脱水四环素诱导的Targetron供体质粒pSY11-sacB(携带colE1复制子和sacB405a打靶位点)。双质粒共转化大肠埃希菌BL21(DE3),脱水四环素诱导Targetron表达并对sacB基因进行打靶。涂布含有5%蔗糖和0.1 mmol/L IPTG的选择培养基,筛选sacB基因失活的阳性菌落,利用菌落PCR进一步验证Ⅱ型内含子在靶位点的插入情况。结果sacB基因表达的大肠埃希菌不能在含有5%蔗糖的平板中生长;双质粒共转化后,脱水四环素诱导Targetron表达能够插入到sacB405a靶位点;sacB基因失活后,大肠埃希菌能够在含有5%蔗糖的平板上生长,菌落PCR验证内含子插入到DNA靶位点。结论建立了基于sacB负筛选标记的Targetron质粒分析系统,为Ⅱ型内含子功能鉴定、迁移规律分析等奠定了基础。

摘要：目的:探索以豆粕大规模培养干酪乳杆菌试生产菌株T1发酵技术,通过响应面法优化干酪乳杆菌T1的发酵条件。方法:单因素试验及响应面方法研究p H值、培养温度、接种量等因素对干酪乳杆菌T1发酵的影响,确定最佳发酵工艺参数。此外,利用豆粕代替蛋白胨发酵干酪乳杆菌,试制成本更低的工业发酵培养基。结果:响应面优化回归方程为Y=0.9-0.041X_10.6X_2+0.015X_3-0.015X_1X_2-0.021X_1X_3+0.034X_2X_3+0.011X_(12)-0.15X_(22)-0.019X_(32)。在养温度为27℃,培养基初始pH为6,接种量为8.09%条件下,得到最大生物量的响应值。优化后活菌数显著提高,为3.23×108/mL,较优化前增加1个数量级。结论:干酪乳杆菌试生产菌株T1对豆粕培养基适应性好,通过响应面法优化发酵条件,能显著提高干酪乳杆菌T1生物量,且为设计和改进大规模生产条件提供基础。

摘要：运用有限元理论和有限元分析软件ANSYS,对通用翻盖手机结构进行强度和模态分析;利用集成优化软件iSIGHT,在满足强度和模态的要求下,对手机结构进行轻量化设计.