摘要：一、细读文本是成就课堂的第一步语文教师只有读懂文本,读透文本,读出自己的文本,才能游刃有余地设计教学方案。细心研读文本是上好课的前提。记得著名教育家叶圣陶先生说过:"字字未宜忽,语语悟其神。"这就告诉我们在细读文本时,不要忽视每一个字、每一个词,要读出每个字词后面的意蕴和味道。2010年,我到一所中学送教,教的是七年级的《散步》。课题选定后,我没有急着翻看教参,也没有上网去查任何资料,而是老老实实地把语文书捧起来,朗朗地读起来,美美地把课文背下来。

摘要：由于在VB程序设计中,不同的数据类型都可以转化为数值型数据,所以在编程中经常出现逻辑错误问题;在使用多分支控制结构编程时,也容易出现逻辑问题.因此在VB编程时注意容易出现逻辑问题的地方,对一些初级编程者很有帮助作用,对中级编程者也有参考价值.

摘要：为探究不同覆膜对黄芩生长的影响,设计了未覆膜、覆黑膜和覆白膜3种方式,以1年生和2年生黄芩为试材,对其株高、茎粗、根长、根粗、干物质积累量和药用成分含量进行调查。结果表明,1年生黄芩表现为黑膜处理的植物学指标和黄芩苷含量均高于未覆膜处理,白膜仅在地下根部的干物质积累和黄芩苷含量上高于未覆膜处理;2年生黄芩除白膜的地下干物质积累量略低于未覆膜处理外,白膜其他生长指标和黄芩苷含量均高于未覆膜处理,黑膜黄芩在所有指标上均优于未覆膜和白膜。因此在黄芩的栽培中可进行覆黑膜栽培。

摘要：通过根据糖海带(Laminaria saccharina)叶绿素 a/c 结合蛋白基因 lhcf6的 cDNA序列设计的引物和 PCR 方法获得了海带(***)配子体 lhcf6基因的 cDNA 全长序列(GenBank 登录号:DQ250739)。该序列的开放阅读框(ORF)与糖海带 lhcf6编码序列的相似性高达99%,而两非翻译区(UTR)序列的相似性只有94%。经推测,海带配子体 lhcf6基因序列的 ORF 编码一个含218个氨基酸的前体蛋白 LHCF6,其氨基端的40个氨基酸组成跨质体内质网和叶绿体膜的信号肽,跨膜酶切后变为含178个氨基酸的成熟蛋白,它的分子量为19.3 kD,等电点为4.88。预测的成熟蛋白 LHCF6高级结构存在2个保守性的β折叠和3个跨类囊体膜的α螺旋区。根据海带配子体 LHCF6成熟蛋白以及 GenBank 中12个同源蛋白质的氨基酸序列所构建的 Neighbor-joining 分子进化树,显示藻类在光捕获蛋白氨基酸序列水平上存在着蓝藻与红藻、杂色藻类、裸藻与绿藻等三个方向的演化途径,其中裸藻和绿藻与高等植物的亲缘关系更近。

摘要：根据糖海带(Laminaria saccharina)光捕获蛋白基因lhcf4的cDNA全长序列(GenBank登录号:AF226860)设计引物,通过RT-PCR方法获得海带(Saccharina japonica)配子体lhcf4基因的cDNA全长序列,共1 042 bp,编码一个含218个氨基酸的前体蛋白LHCF4,推测分子量为23.11 kDa,等电点为5.36。与其同源基因相似度分析表明,lhcf基因的开放阅读框(Open reading frame,ORF)在家族内及物种间高度保守,变异主要发生在非翻译区(Untranslated re-gion,UTR)。预测LHCF4成熟蛋白三级结构存在4个α螺旋区,其中第一、三螺旋较长,形成跨膜螺旋,第二个螺旋相对较短,完全镶嵌在膜中,另外一个为短螺旋,位于类囊体膜-类囊体腔界面上。杂色藻类、绿藻及豌豆光捕获蛋白氨基酸多序列比对显示叶绿素a结合位点及盐桥形成氨基酸残基在植物进化中高度保守;将预测的海带LHCF4蛋白3D结构与豌豆X-衍射晶体结构进行空间重叠,获得了结合在LHCF4蛋白上的5个叶绿素a的空间分布。Neighbor-joining分子进化树显示原绿球藻、绿藻和杂色藻类的光捕获蛋白基因是三个独立进化的系统,共同起源于蓝细菌的只结合叶绿素a的光捕获蛋白;海带lhcf4基因与糖海带lhcf4及巨藻的fcpb基因为直系同源;糖海带lhcf4、lhcf7及lhcF1基因为旁系同源。实时荧光定量PCR结果证实lhcf4基因具有雌、雄配子体差异表达特征。

摘要：采用锚定PCR技术,构建了瓦氏马尾藻（Sargassum vachellianum）微卫星富集文库.阳性克隆筛选、测序和序列分析结果表明,在筛选的523个白色菌落中,214个克隆（占筛选白色菌落数的41％）含有重复的微卫星序列,其中105个（20.1％）有随机侧翼区,可以进行引物设计,109个缺乏足够的侧翼序列.在获得的微卫星序列中,完全的占50％;不完全的占2.3％;复合的占47.7％.重复次数5以上的微卫星序列主要以二碱基重复为主,除引物中使用的CT、GT和CAC重复单元外,还观察到AC、GA、CG、AT、CTA、TAG和AGT的重复序列.微卫星重复次数主要集中在6～10次之间,占92％,最高为23次.设计的54对微卫星引物中有8对能够在野生瓦氏马尾藻群体中进行多态性扩增.本研究中构建的瓦氏马尾藻富集微卫星文库将为以后开发未知微卫星标记提供帮助.

摘要：根据海带配子体光捕获蛋白基因lhcf6的cDNA全长序列(GenBank登录号:DQ250739)设计引物,利用基因组步移技术克隆得到其在雌、雄配子体中的5'-侧翼序列,长度分别为932,901 bp。测序结果比对显示二者相似度为33.3%,说明该基因在雌、雄配子体中具有不同的上游调控区。网络服务器PlantCARE和Softberry启动子元件预测结果表明,二者均含有TATA框、节律性相关元件MBS、光反应相关元件MNF1和GAG-motif,其中雌配子体lhcf6基因5'-侧翼序列还特有LHC基因特征元件AT-rich序列,雄配子体特有节律性相关元件Circadian元件,这些元件可能与该基因表达受光质、光强、节律性等因素的调控有关。将其与GFP报告基因一起构建融合表达载体pCAMBIA1304-Flhcf6和pCAMBIA1304-Mlhcf6,利用pCAMBIA1304作对照,通过电击转化法分别转化莱茵衣藻。激光共聚焦荧光显微镜检测结果显示,含pCAMBIA1304-Flhcf6和pCAMBIA1304-Mlhcf6的转基因藻体中GFP基因均有表达,说明克隆得到的海带雌、雄配子体lhcf6基因的5'-侧翼序列具有启动子功能。

摘要：徐皓峰的武侠小说创作于纷杂多元的"后金庸时代",在面对梁羽生、金庸、古龙等武侠小说自然产生的"影响的焦虑"时,如何突破武侠文学的类型常规是徐皓峰写作时所思考的问题。"有独创性的作家并不一定是发明家或别出心裁,而是能将借鉴别人的东西揉进新的意境,在造就完全属于他自己的艺术品的过程中获得成功的人。"1从文学流脉上说,徐皓峰的小说接续了民国武侠小说家宫白羽的写实传统,追忆的是民国武林的社会现实。

摘要：为研究海带核基因组编码的nuc Cbb X蛋白的结构和功能,根据海带配子体核基因cbb X(Gen Bank登录号:NP_053838)设计含有酶切位点的引物,通过RT-PCR方法获得末端连接NdeⅠ、XhoⅠ酶切位点的完整ORF。序列保守性分析表明,预测的海带成熟nuc Cbb X蛋白序列含具有AAA+结构域、Walker-A和Walker-B ATP结合位点及ATP水解酶和Ru Bis Co活化酶活性相关位点。序列相似度分析表明,海带nuc Cbb X与其质体基因组编码的pt Cbb X和类球红细菌的Rs Cbb X蛋白氨基酸序列相似度均较低,分别为37.4%和36.8%,相比pt Cbb X与Rs Cbb X相似度较高为57.6%。以Rs Cbb X蛋白单体晶体结构模型为模板,预测获得的海带nuc Cbb X蛋白三级结构中N端为一个α/β子域含有5个α螺旋和5个β折叠,C端为α螺旋子域含有5个α螺旋。为进一步研究海带nuc Cbb X蛋白晶体结构,通过双酶切和连接反应成功构建p ET28a-cbb X原核表达载体,并转化至BL21感受态细胞,获得p ET28a-cbb X/BL21重组菌株。利用终浓度为1%的IPTG进行诱导后,重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子量为50.2 k Da,较nuc Cbb X成熟蛋白(44.7 k Da)大。重组蛋白经变性、纯化和复性后用于蛋白结晶,初步获得海带nuc Cbb X蛋白晶体。

摘要：量子噪声温度计系统可通过比较导体中电子运动的热噪声和量子电压参考噪声精密测量玻尔兹曼常数,其中量子电压噪声源所合成的量子电压参考噪声由一组超导约瑟夫森结阵产生.本文详细介绍了基于Nb/Nb_xSi_(1-x)/Nb约瑟夫森结的量子电压噪声源芯片的设计、制备及测试;采用脉冲驱动模式,合成了具有量子精度的100 kHz交流量子电压信号.结果表明:本文所研制的噪声温度计核心芯片已具备了合成交流电压的功能,可为后续玻尔兹曼常数精密定值、重新定义及复现热力学温度研究提供核心器件.